- •Биологическое значение реакций трансаминирования
- •Клиническое значение определения активности трансаминаз
- •Принцип метода
- •Контрольные вопросы
- •Литература
- •ХОД РАБОТЫ
- •Таблица 1
- •Таблица 2
- •Таблица 3
- •Оформление работы
- •К занятию:
- •Во время занятия:
- •Реакции аммиака
- •Цикл мочевины
- •Альтернативные реакции выведения избытка азота
- •Регуляция цикла мочевины
- •Наследственные дефекты ферментов цикла мочевины
- •Карбамоилфосфат-синтетаза
- •Орнитин-транскарбамоилаза
- •Аргининосукцинат-синтетаза
- •Аргининосукцинат-лиаза
- •Аргиназа
- •Принцип метода
- •Контрольные вопросы
- •Литература
- •ХОД РАБОТЫ
- •Во время занятия:
- •Глутатион и аномалии эритроцитов
- •Принцип метода
- •Контрольные вопросы
- •Литература
- •ХОД РАБОТЫ
- •Оформление работы
- •Во время занятия:
- •Регуляторная роль пируваткиназы
- •Гипоксические повреждения тканей
- •Утилизация молочной кислоты
- •Принципы методов
- •Контрольные вопросы
- •Литература
- •Субстратные циклы
- •Обмен фруктозы
- •Синтез глюкозы из других сахаров
- •Фруктоза
- •Манноза
- •Галактоза
- •Принципы методов
- •Контрольные вопросы
- •Литература
- •ХОД РАБОТЫ
- •Оформление работы
- •Во время занятия:
- •Образование ЛПОНП и ЛПНП
- •Б. Гиперлипопротеинемия
- •Принцип метода
- •Контрольные вопросы
- •Литература
- •ХОД РАБОТЫ
- •Оформление работы
- •Во время занятия:
•На основании выполненных измерений оптической плотности заполняют табл. 3 и, по полученным численным значениям, строят калибровочные графики.
Таблица 3
|
|
|
|
|
|
|
|
№ пробирки |
АСТ |
|
АЛТ |
|
|
|
|
Активность, |
А540 |
Активность, |
А540 |
|
|
|
ммоль/ч.л |
|
ммоль/ч.л |
|
|
|
1 |
0,5 |
|
1,0 |
|
|
|
2 |
1,0 |
|
2,0 |
|
|
|
3 |
1,5 |
|
3,0 |
|
|
|
4 |
2,0 |
|
4,0 |
|
|
|
5 |
2,5 |
|
5,0 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
7. По графикам определяют активности трансаминаз в опытных пробах.
Примечание: норма активности трансаминаз в сыворотке крови:
АСТ – 0,1-0,45 ммоль/ч.л, АЛТ – 0,1-0,68 ммоль/ч.л.
Оформление работы
К занятию:
1.Кратко законспектировать теоретический материал по лабораторной работе.
Во время занятия:
2.Описать этапы работы.
3.Начертить калибровочные графики.
4.Оформить результаты измерений.
5.Сделать выводы.
14
Методические указания к лабораторному практикуму по курсу "Патобиохимия"
|
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 2 |
|
Тема: |
Определение мочевины в сыворотке крови по цветной |
|
|
реакции с диацетилмонооксимом |
|
Цель |
Определить концентрацию мочевины в сыворотке крови |
|
работы: |
||
с использованием тест-набора клинического назначения |
Оборудование и материалы:
•Центрифуга UNIVERSAL 30RF
•Спектрофотометр SOLAR
•Кюветы полистирольные
•Водяная баня
•Автоматические микропипетки
•Пробирки центрифужные
•Штативы для пробирок
•Колбы на 100-250мл
•Цилиндры мерные на 50-100мл
•Палочка стеклянная
Реактивы:
•Трихлоруксусная кислота (ТХУ), 10% раствор
•Цветной реактив
Реагенты для его приготовления:
Диацетилмонооксим, 2.5% раствор Тиосемикарбазид, 0.25% раствор Железо хлорное, раствор
•Мочевина, стандартный раствор (16.65мМ)
•Вода дистиллированная
15