Эстрадиола гемигидрат

Идентификация

Около 1 мг препарата смешивают с 0,5 мл свежеприготовленного сульфомолибденового реактива. Появляется синее окрашивание. В ультрафиолетовом свете (365 нм) раствор имеет интенсивную зеленую флуоресценцию. При добавлении 1 мл концентрированной кислоты серной и 9 мл воды окраска становится розовой с желтоватой флуоресценцией.

(Сульфамолибденовый реактив: 50 мг аммония молибдата растворяют в 10 мл концентрированной кислоты серной).

Количественное определение

Около 50 мг препарата (точная навеска) растворяют в мерной колбе вместимостью 50 мл в этаноле, доводят объем до метки тем же растворителем. 5 мл полученного раствора разводят в мерной колбе вместимостью 250 мл 0,1 М раствором натрия гидроксида до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 10 мм в максимуме при длине волны 238 нм на фоне 0,1М раствора натрия гидроксида.

Содержание эстрадиола гемигидрата в препарате в % рассчитывают с использованием значения удельного показателя поглощения по формуле:

где

D- оптическая плотность исследуемого раствора;

- разведение;

а - точная навеска препарата (г);

- удельный показатель поглощения эстрадиола гемигидрата при длине волны 238 нм, равный 335.

Препарат должен содержать не менее 97% и не более 103% эстрадиола гемигидрата.

Таблетки этинилэстрадиола

Идентификация

1. Количество порошка растертых таблеток, содержащее 1 мг этинилэстрадиола, взбалтывают с 10 мл этанола и фильтруют.

Фильтрат выпаривают досуха на водяной бане. К сухому остатку прибавляют 1 мл кислоты серной концентрированной; появляется оранжевое окрашивание с зеленой флуоресценцией (в Уф-свете, длина волны 365 нм). При разбавлении раствора 10 мл воды: окраска становится фиолетовой и выпадает фиолетовый осадок.

2. Количество порошка растертых таблеток, содержащее 2 мг этинилэстрадиола, взбалтывают с 10 мл этанола и фильтруют. Фильтрат выпаривают досуха на водяной бане до объема 2 мл, прибавляют 1 мл 10% раствора серебра нитрата; образуется белый осадок.

3. Количество порошка растертых таблеток, содержащее 0,1 мг этинилэстрадиола, растирают с 0,5 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и 5 мл воды, оставляют на 5 минут. Затем фильтруют, фильтрат подкисляют 0,15 мл кислоты серной концентрированной, прибавляют 3 мл эфира, взбалтывают. Эфирный слой отделяют и нагревают на водяной бане с 0,2 мл кислоты уксусной ледяной и 2 мл кислоты фосфорной концентрированной. Появляется розовое окрашивание с интенсивной оранжевой флуоресценцией.

4. Количество порошка растертых таблеток, содержащее 5 мг этинилэстрадиола, взбалтывают с 3 мл 10% раствора натрия гидроксида и 2 мл воды, оставляют на 5 минут и затем фильтруют. К фильтрату прибавляют 3 мл диазореактива; появляется красное окрашивание.

Идентификация эстрогенов методом тсх

(этинилэстрадиол, эстрадиола дипропионат).

Хроматографирование проводят на пластинах "Силуфол UF-254" размером 5 х 10 см. На пластину на линию старта наносят по 0,01 мл 1% спиртовых растворов веществ и их смеси. Хроматографируют в системе растворителей гексан - ацетон 7:3 восходящим способом. После разделения пластину сушат на воздухе, детекцию пятен осуществляют в УФ свете. Рассчитывают значенияR_fисследуемых веществ (примерное значениеR,- для эстрадиола дипропионата а в данной системе растворителей - 0,85; для этинилэстрадиола-0,59).