Изучение набухания и растворения вмс
ОПЫТ 1. Определение степени набухания каучука в воде, бензине, скипидаре
Взвешивают 3 колечка (каждое отдельно) и опускают одно в бюкс с водой, другое – в бюкс с бензином, третье – в бюкс со скипидаром. Через 30 мин. вынимают каучук из растворителей, осторожно осушают фильтровальной бумагой и снова взвешивают. Рассчитывают степень набухания по формуле:
где m1 и m2 – масса каучука до и после набухания. Данные занесите в таблицу 1.
Таблица 1
Набухание каучука
|
№ |
Растворитель |
Исходная масса каучука m1 |
Масса после набухания m2 |
Величина набухания m2 – m1 |
Степень набухания α |
|
1. 2. 3. 4. 5. |
|
|
|
|
|
ОПЫТ 2. Зависимость величины набухания желатина от рН среды
В сухие мерные пробирки вносят по 0,5 мл порошка желатина и в каждую добавляют до 10 мл одного из растворов:
Таблица 2
Набухание желатина в зависимости от значения рН
|
№ |
Растворы электролитов |
Исходный объем желатина V1 |
Объем после набухания V2 |
Величина набухания V2 – V1 |
Степень набухания α |
|
1. 2. 3. 4. |
0,1 н. HCl (рН = 1) Буферный раствор рН = 4,7 Дистиллир. вода (рН = 7) 0,1 н. NaOH (рН = 13) |
|
|
|
|
Содержимое пробирок перемешивают палочкой, которую после каждого перемешивания следует промыть дистиллированной водой. Через 30 мин. определяют объем набухшего вещества. Рассчитывают степень набухания по формуле:
Постройте график зависимости величины набухания от рН среды. Сделайте вывод.
Лабораторная работа № 2
Определение изоэлектрической точки белка
Берут 5 центрифужных пробирок и в каждую наливают по 1 мл ацетатного буфера (СН3СООН + СН3СООNa) с рН 3,8; 4,1; 4,7; 5,3; 6,2.
Затем добавляют по 0,5 мл 1% раствора белка (желатина) и по 1 мл ацетона пипеткой. Содержимое пробирки тщательно перемешивают и на темном фоне отмечают степень и максимум мутности проб, качественно оценивая ее в системе 0 до +5 "плюсов" (в случае слабо выраженной мутности в каждую пробу вносят дополнительно по 0,5 мл ацетона).
Данные занести в соответствующую графу таблицы. Максимум мутности соответствует максимальной коагуляции белков в их изоэлектрической точке.
Для более четкого обнаружения пробы, в которой произошла максимальная коагуляция белка, их дополнительно подвергают центрифугированию на электроцентрифуге. После 2-3 минут центрифугирования по 3000 об./мин. центрифугу выключают, а пробы аккуратно вынимают из гнезд и устанавливают по порядку в штатив.
На дне проб отмечают осадок белка различной толщины. Надосадочную жидкость сливают быстрым опрокидыванием пробирок. К осадку добавляют по 2 мл биуретового реактива (CuSO4 + NaOH). Каждую пробу встряхивают до растворения осадка. Интенсивность фиолетовой окраски в пробах пропорциональна количеству коагулированного белка, выделенного центрифугированием в осадок. Оценивая интенсивность окраски количеством "+", результаты заносят в соответствующую графу таблицы 3.
Таблица 3