4. Иллюстративный материал

Внутрикомплесное соединение с солью кобальта

Внутрикомплесное соединение с меднопиридиновымреактивом

Кристаллы кислотной формы барбитала	Кристаллы кислотной формы барбамила	Кристаллы кислотной формы фенобарбитала
Кристаллы кислотной формы этаминала натрия	Кристаллы кислотной формы бутобарбитала	Кристаллы кислотной формы бензонала
Кристаллы продукта взаимодействия барбитала с раствором хлорцинкйода	Кристаллы продукта взаимодействия барбамила с раствором хлорцинкйода	Кристаллы продукта взаимодействия этаминала натрия с раствором хлорцинкйода
Кристаллы продукта взаимодействия фенобарбитала с железойодидным реактивом	Кристаллы продукта взаимодействия этаминала натрия с железойодидным реактивом	Кристаллы продукта взаимодействия барбамила с железойодидным реактивом
Кристаллы продукта взаимодействия бутобарбитала с железойодидным реактивом	Кристаллы продукта взаимодействия бутобарбитала со спиртовым раствором йодида калия	Кристаллы продукта взаимодействия барбитала с меднопиридиновым реактивом
УФ-спектры поглощения барбитуратов в зависимости от рН раствора

5. Литература

1. Калетина Н.И. Токсикологическая химия. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008.

2. Плетенева Т.В. Токсикологическая химия. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006.

3. Байзолданов Т. Токсикологическая химия ядовитых веществ, изолиремых методом экстракции. – Алматы,2002.

4. Крамаренко В.Ф. Токсикологическая химия. – Киев: Высшая школа, 1989.

5. Швайкова М.Д. Токсикологическая химия. – М.: Медицина,1975.

6. Белова А.В. Руководство к практическим занятиям по токсикологической химии.- М.:

Медицина, 1976.

6. Контрольные вопросы (обратная связь)

1. Что означает направленный анализ на барбитураты?

2. Какими методами проводят изолирование барбитуратов из биологического материала при

направленном ХТА?

3. Как проводится ТСХ скрининг на барбитураты?

4. Перечислите общие реакции на барбитураты.

5. Объясните, почему на барбитураты после проведения общих реакций, проводятся обязательно частные реакции?

6. Перечислите частные реакции на барбитураты.

7. На чем основан принцип спектрофотометрического определения барбитуратов в ХТА?

1.Тема 3 – Методы о6наружения и определения лекарственных веществ при проведении химическо-токсикологической экспертизы. Алкалоиды в ХТА.

2. Цель: Ознакомить студентов с методами обнаружения и количественного определения алкалоидов при проведении СХА, чтобы студент знал и мог применить их в своей практической деятельности.

3. Тезисы лекции

Направленный химико-токсикологический анализ алкалоидов

Объекты исследования: мозг, печень, почки, желудок и кишечник с содержимым, промывные воды, легкие, моча.

Изолирование. При направленном исследовании на алкалоиды используется частный метод изолирования – водой, подкисленной серной кислотой (метод В.Ф. Крамаренко) с учетом физико-химических свойств алкалоидов.

При направленном анализе алкалоиды – сильные основания и алкалоиды средней основности попадают в щелочное хлороформное извлечение, а алкалоиды слабые основания (производные пурина и индола) – могут попадать и в кислое извлечение, т.к. они образуют с щавелевой кислотой легко гидролизующиеся в кислой среде соли.

ТСХ скрининг алкалоидов проводится в общей системе растворителей хлороформ-диоксан-ацетон-25% раствор аммиака (45 : 47,5 : 5 : 2,5); сорбент – силикагель КСК; проявитель – реактив Драгендорфа модифицированного по Мунье. Алкалоиды обнаруживаются по наличию пятен оранжевого и оранжево-коричневого цвета в 1-4 зонах. Алкалоид из силикагеля элюируют смесью метанол-диэтиламин (9 : 1) с последующим проведением подтверждающего хроматографирования в частных системах растворителей хлоформ-этанол (20 : 1); циклогексан-ацетон (5 : 1); хлороформ-диэтиламин (9 : 1); хлороформ-ацетон (5 : 1).

В качестве «свидетелей» используются хлороформные растворы алкалоидов данной группы. Для проведения следующего этапа анализа алкалоиды элюируют смесью растворителей метанол-диэтиламин (9 : 1).

Очистка. Этап скрининга методом ТСХ позволяет параллельно проводить качественную очистку от биогенных примесей, которые локализуются на хроматографических пластинках в областях R_f < 0,2 и R_f > 0,8.

Однако, в элюате возможно присутствие остатков примесей, которые удаляются с использованием методов: экстракции, гель-хроматографии, электрофореза, сочетания экстракции и ТСХ.

Подтверждающие исследования элюата включают наиболее чувствительные химические и физико-химические методы анализа алкалоидов.

Идентификация химическим методом. Реакции осаждения с общеалкалоидными осадительными реактивами (пикриновая кислота, соль Рейнеке, реактивы: Драгендорфа, марме, Майера, Зонненшейна и др.).

Аморфные или кристаллические осадки с нехарактерной формой частиц указывают на наличие гетероциклического атома азота в алкалоидах. Реакции высокочувствительны, не специфичны.

Микрокристаллоскопические реакции. Очищенное хлороформное извлечение выпаривают досуха, остаток растворяют в 0,1 М растворе соляной кислоты. По капле раствора наносят на предметные стекла с углублениями, куда добавляют различные реактивы, результат наблюдают под микроскопом.

Реакции высокочувствительны и специфичны при определенных условиях (дополнительная очистка, температура, влажность и давление в лаборатории).

Реакции окрашивания на алкалоиды. Для проведения этих реакций на алкалоиды хлороформное извлечение или элюат вносят в несколько фарфоровых чашек или тиглей, получают сухие остатки, к которым добавляют по капле различных реактивов и наблюдают окраски.

Можно провести цветные реакции на хроматографических пластинках. Для этого несколько капель извлечения наносят на одну точку пластины с помощью капилляра и после высыхания пятна на него наносят различные реагенты.

Реакции чувствительны, неспецифичны.

Идентификация физико-химическими методами: по УФ- и ИК-спектрам, методами ТСХ, ГЖХ, ВЭЖХ.

Идентификация по УФ-спектрам возможна только после тщательной очистки экстракцией и ТСХ-методом, или при их сочетании.

Количественное определение проводится спектральными (УФ-спектрофотометрия, фотоэлектроколориметрия, экстракционная фотометрия) и хроматографическими методами (ТСХ – планиметрический и денситометрический методы, ГЖХ и ВЭЖХ).