- •Імені михайла туган-барановського
- •Технічна мікробіологія методичні рекомендації
- •2. Правила надання невідкладної медичної допомоги в лабораторії
- •3. Будова оптичного мікроскопу
- •4. Техніка мікроскопії
- •Завдання:
- •Питання для самоконтролю:
- •Техніка приготування препаратів для живих та неживих культур
- •1.2. Підготовка препарату «висяча крапля»
- •1.3. Підготовка фіксованого офарбованого препарату
- •2. Методи фарбування мікроорганізмів
- •2.1. Фарбування живих клітин мікроорганізмів
- •2.2. Простий метод фарбування
- •2.3. Складний метод фарбування (за Грамом)
- •Етапи фарбування за Грамом:
- •2.4. Фарбування спор бактерій
- •Завдання:
- •Завдання:
- •Питання для самоконтролю:
- •2. Форми дріжджових клітин
- •2. Будова міцелію гриба
- •3. Характеристика пліснявих грибів і актиноміцетів
- •Завдання:
- •Питання для самоконтролю:
- •2. Стерилізація поживних середовищ и посуду
- •Завдання:
- •Питання для самоконтролю:
- •Умови протікання спиртового бродіння:
- •Методика отримання накопичувальних культур збудників спиртового бродіння
- •1.2. Молочнокисле бродіння
- •Сумарне рівняння молочнокислого бродіння
- •Методика отримання накопичувальних культур молочнокислих бактерій:
- •1.3. Маслянокисле бродіння
- •Сумарне рівняння маслянокислого бродіння:
- •Методика отримання накопичувальних культур маслянокислих бактерій:
- •2. Бродіння аеробного типу
- •2.1. Оцтовокисле бродіння
- •Рівняння оцтовокислого бродіння:
- •Методика отримання накопичувальних культур оцтовокислих бактерій:
- •Завдання:
- •Питання для самоконтролю:
- •Методика підрахунку мікроорганізмів в камерах Горяєва:
- •2. Метод культивування мікроорганізмів (чашковий).
- •1. 1. Підготовка матеріалу для дослідження
- •2.2. Методика приготування десятикратних розведень матеріалів
- •2.3.Висів у чашки Петрі й культивування посівів
- •2.4. Облік вирощених колоній і розрахунок кількості мікроорганізмів
- •Кількісний облік мікроорганізмів за допомогою пластини Лафара і камери Вольфюгеля:
- •3. Метод крайніх розведень (титраційний метод обліку мікроорганізмів)
- •Титраційний метод включає наступні етапи:
- •Завдання:
- •Питання для самоконтролю:
- •Лабораторна робота № 9 Санітарно-бактеріологічне дослідження мікрофлори повітря Зміст роботи:
- •1. Визначення мікрофлори повітря аспіраційним методом (на апараті Кротова)
- •Методика визначення мікрофлори повітря на апараті Кротова:
- •2. Визначення мікрофлори повітря седиментаційним методом.
- •Методика визначення мікрофлори повітря седиментаційним методом:
- •Завдання:
- •Відбір проб води:
- •1. Кількісний аналіз бактерій в воді
- •Методика визначення мікробного числа:
- •2. Санітарно-мікробіологічне дослідження питної води бродильним методом
- •Методика визначення загальних коліформ:
- •Завдання:
- •Питання для самоконтролю:
- •Лабораторна робота № 11 Мікробіологічні дослідження твердих поверхонь методом змивів Зміст роботи:
- •1. Санітарно-мікробіологічне дослідження поверхні робочого столу, інвентарю та посуду
- •2. Санітарно-мікробіологічне дослідження змиву з рук персоналу
- •Завдання:
- •Визначення загальної кількості мікроорганізмів в молоці та молочних продуктах
- •Методика визначення мікробного числа:
- •2. Визначення бгкп у молоці
- •Висів молока в елективне для кишкової палички середовище:
- •Облік бродильної проби:
- •Ідентифікація кишкової палички:
- •Завдання:
- •Питання для самоконтролю:
- •Лабораторна робота № 13 Санітарно-бактеріологічне дослідження м’яса та ковбасних виробів Зміст роботи:
- •1. Визначення загальної кількості мікроорганізмів в м'ясі та продуктах його переробки
- •Методика визначення загальної кількості мікроорганізмів в 1 г продукту:
- •Визначення свіжості м'яса бактеріоскопічним методом
- •Методика проведення бактеріоскопії м 'яса:
- •Завдання:
- •Питання для самоконтролю:
- •Лабораторна робота № 14 Мікробіологічне дослідження харчових продуктів Зміст роботи:
- •Визначення мікробіологічних показників в рідинних харчових продуктах згідно з нормами чинних стандартів
- •2. Визначення мікробіологічних показників щільних харчових продуктів згідно з нормами чинних стандартів
- •Завдання:
- •Запитання для самоконтролю:
- •Список літератури
- •Додатки
- •Показники епідемічної безпеки питної води (дСанПіН 2.2.4-171-10)
- •Мікробіологічні нормативи якості м'яса
- •Мікробіологічні показники якості м'ясних продуктів
- •Мікробіологічні нормативи якості риби
- •Мікробіологічні нормативи якості молока та молочних продуктів
- •Мікробіологічні показники якості кисломолочних продуктів
- •Мікробіологічні показники якості морозива
- •Мікробіологічні показники якості масла і сирів
- •Мікробіологічні показники безпеки яєчних товарів
- •Мікробіологічні нормативи жирових продуктів
- •Мікробіологічні нормативи якості кондитерських виробів та цукру Мікробіологічні показники якості деяких кондитерських виробів
- •Мікробіологічні показники якості цукру
- •Мікробіологічні показники якості слабоалкогольних напоїв
2.3. Складний метод фарбування (за Грамом)
Цей метод є однією з диференційних ознак при вивченні видової приналежності бактерій.
Суть|сутність| методу полягає в послідовному фарбуванні|пофарбуванні| двома фарбниками:|барвниками| генціан-віолетом і фуксином.
По методу Грама одні бактерії (коки, бацили, мікобактерії, клостридіальні бактерії) міцно забарвлюються генціанвіолетом| в синьо-фіолетовий колір|цвіт| (грампозитивні бактерії, гр+|). Здатність|здібність| грампозитивних бактерій утримувати генціановий| фіолетовий в комплексі з|із| йодом пов'язана з властивістю багатошарового| пептидоглікану| (основного компоненту клітинної стінки бактерій) взаємодіяти з|із| фарбником|барвником|. Окрім|крім| цього, подальша|наступна| обробка мазка бактерій спиртом викликає|спричиняє| звуження пір в пептидоглікані| і тим самим затримку фарбника|барвника| в клітинній|клітковій| стінці. Грамнегативні бактерії (гр.-|) (спірили, сальмонели, вібріони, псевдомонади, азотбактер, кишкова паличка), стінки яких містять|утримують| меншу кількість пептидоглікану|, після|потім| дії спиртом втрачають фарбник|барвник|, обезбарвлюються|знебарвлюють| і при обробці фуксином забарвлюються в червоний колір|цвіт|.
Етапи фарбування за Грамом:
Приготувати препарат і зафіксувати його (див. розділ 1.3).
Фіксований мазок накрити фільтрувальним папером і налити на нього невелику кількість генціан-віолету. | |барвника|
Через 2 хв|мінути| фільтрувальний папір зняти|сіяти| пінцетом, дистильованою водою змити фарбу|барву| і на препарат нанести|завдавати| розчин Люголя на 1-2 хв|мінути|. Залишок розчину злити.
Мазок занурити|навантажити| в розчин 96%-го| спирту на 30 сек|мінути|.
Промити мазок водою.
нанести на препарат водний розчин фуксину і залишити на 1 хв|мінуту|.
Промити препарат водою, промокнути фільтрувальним папером, нанести невелику краплю імерсійної олії і розглянути|розглядувати| під мікроскопом при збільшенні 15x90. Грампозитивні бактерії забарвлюються в синій колір|цвіт|, а грамнегативні - в рожевий|трояндовий|.
Замалювати грампозитивні і грамнегативні бактерії.
2.4. Фарбування спор бактерій
Спора - це клітина|клітина| бактерій, що покоїться, вона володіє високою стійкістю до фізико-хімічних|фізико-хімічних| дій. Спори деяких бактерій чіткіше можна розглянути|розглядувати| тільки|лише| після|потім| спеціального фарбування|пофарбування|.
Приготувати препарат і зафіксувати його (див. розділ 1.3).
На фіксований мазок, розташований|схильний| на мікробіологічному "містку" нанести|завдавати| лужний розчин метиленового синього (по Леффлеру) і довести його до кипіння, утримуючи препарат над полум'ям пальника 15-20 хв|мінути|.
Змити фарбу|барву| водою і дофарбувати мазок 0,5%-вим| розчином нейтрального червоного - 30 хв|мінути|.
Промити мазок водою і мікроскопувати| з|із| об'єктивом 90х|. Після|потім| фарбування|пофарбування| спори набувають|придбавають| блакитного|голубого| або синього кольору|цвіту|, а цитоплазма вегетативних форм клітин|клітин| - червоного кольору|цвіт|.
Замалювати клітини|клітини| з|із| виявленими забарвленими|пофарбованими| спорами.