Лабор.діагност.вірус.хв

АНОТАЦІЯ. Викладено основні дані щодо біології представників родини парвовусів. Проілюстровано роль останніх в патології ссавців та птахів. Охарактеризовано найбільш актуальні хвороби та методи діагностики

План

1.Загальна характеристика родини парвовірусів.

2.Парвовірусна інфекція собак.

3.Панлейкопенія котів.

4.Парвовірусна інфекція свиней.

5.Парвовірусна інфекція великої рогатої худоби.

6.Ентерит норок. Алеутська хвороба норок.

ЗМІСТ ЛЕКЦІЇ

Парвовіруси є одними із самих дрібних ДНК містких

вірусів тварин. Їх		віріон	має		в	діаметрі18— 26 нм і
складається	тільки	з білка і			ДНК. В	родину Parvoviridae
входять	три	:	родипарвовіруси,				депендовіруси
(аденоасоційовані		віруси)		і			денсовіруси (вірус

денсонуклеозу). Представники перших двох родів широко поширені серед теплокровних тварин, починаючи від домашніх птахів і кінчаючи людиною(табл. ). Інтерес до парвовірусів як об'єктів дослідження обумовлений рядом причин. У природних умовах парвовіруси патогенні для ссавців, птахів, а також для людини. Хвороби, які викликають ці віруси, наносять істотний економічний збиток тваринництву багатьох країн. Парвовіруси мають унікальну структурну і функціональну організацію генома і є гарною моделлю для вивчення реплікації1-спіральної ДНК. Аденоасоційовані віруси (AAV) унікальні серед вірусів тварин у тім відношенні, що для їхньої продуктивної інфекції необхідно спільне зараження з неспорідненим вірусомпомічником, таким, як аденовірус чи вірус простого герпесу. Поряд з цими розходженнями в автономних парвовірусів і AAV є багато загального в будівлі геномів, їхній організації й експресії. У цій главі ми порівняємо реплікацію цих двох пологів на молекулярному і біологічному рівнях. Складові третій рід віруси денсонуклеозу виділені тільки зLepidoptera

і Orthoptera. Оскільки по спектрі хазяїнів ці віруси не входять

учисло тих, котрим присвячена дана книга, і оскільки

питання про їхню приналежність доParvoviridae усе ще

залишається

відкритим,

їхню

реплікацію

ми

не

будемо

розглядати.

Парвовіруси

(від

лат. parvus - маленький) - група

вірусів, що уражає хребетних і комах. Віріон парвовірусів

має відносно просту структуру і складається тільки з трьох

білків і лінійної одноланцюгової молекули ДНК. З'ясування

детальної

структури

віріонів

виявилося

дуже

важкою

задачею,

і

нічого,

крім

цих основних фактів, методами

електронної мікроскопії установити не удалося. Віріони

парвовірусів

являють

собою

позбавлені

суперкапсидної

оболонки ізометричні частки кубічної симетрії діаметром18-

26 нм. Капсид складається з 32 капсомерів діаметром 3-4 нм.

Ліпіди і вуглеводи в складі віріонів не виявлені. ММ віріонів

складає 5,5-6,2 МД. Геном

парвовірусів

представлений1-

спіральною лінійною молекулою ДНК із ММ1,5-2 МД,

частка Г+Ц складає41-53%. ДНК парвовірусів володіє

інфекційністю.

У

віріонах

автономних

і

дефектних

парвовірусів виявлено 3 поліпептиди з ММ 60-90 КД, тоді як

у віріонах денсовірусів - 4 поліпептиди. Реплікація вірусної

ДНК і зборка віріонів відбувається в ядрі клітини. Для

реплікації

автономних

парвовірусів

необхідні

компоненти

ДНК-синтезуючого апарата клітини-хазяїна, зокрема, ДНК –

полімерази.

Депендовіруси

активно

розмножуються

в

присутності

вірусів "помічників"

(аденовірусів,

герпесвірусів).

Приблизно 80% маси

складають

білки, решта—ДНК.

Завдяки відносно високому відношенню ДНК/білок плавуча

щільність

інтактного віріону

CsCв І

складає 1,39— 1,42

г/см3. Висока

плавуча

щільність

CsCу

І

дозволяє

при

спільному

зараженні

легко

відокремитиAAV

від

аденовірусів-помічників.

Описані

важкі

і

легкі

форми

віріонів.

Останні

містять

молекули

ДНК

зі

значними

делеціями, вони можуть брати участь у зараженні в якості дефектних інтерферуючих частинок(ДІЧ). Точна причина появи віріонів, більш важких, чим звичайні, невідома. ДНК, що міститься в більш важких віріонах, нічим не відрізняється від ДНК нормальних віріонів, тому можна припускати, що в перших утрачена частина білків. Невідомо, чи складають утрачені білки специфічний набір. Коефіцієнт седиментації

віріонів у нейтральному сахарозному градієнті дорівнює

110—122 S.

Можливо, що саме унаслідок своєї простої структурної

організації віріони надзвичайно стійкі до інактивації. Вони

витримують рН від 3 до 9 і прогрівання при 56 °С протягом 1

год.

Парвовіруси

стійкі

до

розчинників

.

ліпідів

Інактивуються

віруси

формаліном, b-пропіолактоном,

гідроксиламіном і окислювачами.

КЛАСИФІКАЦІЯ

У родині Parvoviridae 3 роди: Parvovirus, Dependovirus,

Densovirus. 1. Рід Parvovirus. До складу роду входять дрібний

вірус мишей (прототипний вірус), парвовіруси людини (В

19), свиней, ВРХ, собак, кроликів, єнотів, гусаків, пацюків,

віруси ентериту й алеутської хвороби норок, панлейкопенії

кішок, а також віруси Н1, RT, TVX і LuIII, походження яких

неясно. Можливим представником роду є парвовірус курчат,

дрібний вірус собак, НВ

і RA1. У

віріонах

більшості

представників роду міститься мінус - ДНК. Однак у частини

віріонів парвовірусів ВРХ, пацюків,

HI,

Lu111

і

В19

міститься плюс - ДНК. Усі віруси роду Parvovirus автономні

(не дефектні). Вони викликають у тварин ентерити, гепатити,

міокардити,

геморрагічну

енцефалопатію, панлейкопенію,

загибель ембріонів і плодів, відставання в рості, пригнічують

гематопоез і лімфопоез та імунну відповідь.

2. Рід Dependovirus (від лат. dependere - залежний). У

рід входять аденоасоційовані віруси (ААВ) людину і мавп (5

серотипів), ВРХ, собак і птахів. Типовий представник роду -

ААВ1,

можливі представники -

ААВ

коней

і

овець. У

віріонах депендовірусів міститься або плюс- , або мінус -

ДНК. Ці типи ДНК комплементарні один

одному inі vitro

поєднуються з утворенням2-спіральних молекул. ДНК має

кінцеві інвертовані повтори довжиною145 нуклеотидів, що

формують

шпильки. Перші 125

нуклеотидів

утворюють

поліндромні

послідовності.

Ефективна

реплікація

депендовірусів

відбувається

в

присутності

-

аденоі

герпесвірусів.

Однак

у

відповідних

умовах(наявність

мутагенів,

синхронізація

клітин

Sу-фазі)

реплікація

здійснюється і без вірусів - “помічників”.

3. Рід Densovirus (від лат. densus - щільний). У рід

входять парвовіруси, що уражають комах загону двокрилих

(Diptera),

лускокрилих

(Lepidoptera)

і

прямокрилих

(Orthoptera).

Типовий

представник

роду-

вірус

денсонуклеозу

личинок

великий

вощаної

молі. У

віріонах

міститься або плюс- , або мінус - ДНК. Денсовіруси розмножуються в більшості тканин личинок, німф і дорослих тварин без вірусу- "помічника" з утворенням великих і щільних кристалічних внутрішньоядерних включень.

ПАРВОВІРУСНА ІНФЕКЦІЯ СОБАК

Парвовірусна

інфекція

собак(ПВІС, парвовірусний

ентерит

собак)

-

контагіозна

хвороба,

що

проявляється

блювотою,

геморрагічним

гастроентеритом,

міокардитом,

лейкопенією, дегідратацією і загибеллю щенят молодше5-

місячного

віку.

Ураження

локалізуються

в

тонкому

кишечнику, лімфоїдних тканинах.

ПВІСобак уперше зареєстрований у Бельгії в1976 р.,

далі

в

США, Канаді, Австралії,

Франції,

ФРН,

Великобританії, Швейцарії. В даний час це одна з найбільше

широко розповсюджених інфекційних хвороб.

ВІРУС. Перший представник цієї групи вірусів був

виділений L.Kilham від пацюків у1959 р. Парвовірус

собак

(ПВС) уперше виділив і описавSiegl у 1976 р. Він показав

широке поширення хвороби в США. Збудник ПВІС близький

по

своїм

властивостям

вірусу

панлейкопенії.

кішок

Передбачається, що він може бути мутантною формою цього

вірусу. Вірусу ентериту норок близький вірус панлейкопенії

кішок, але не ідентичний йому, як і ПВС - вірусу ентериту

норок,

відрізняючись

від

них

по

АГ

структурі, ГА

властивостям, спектру патогенності для тварин

і будові

генома. ПВС має споріднення з парвовірусами

пацюків,

свиней і мишей. На 5-7-й день після зараження вірус індукує

утворення КЗА, ВНА й антигемаглютинуючих

антитіл.

Останні

становлять

найбільший

інтерес

в

аспекті

серодіагностики

й

оцінки

поствакцинального

імунітету.

Після досягнення максимуму титр їх не знижується протягом

2-х років.

У природних умовах ПВІС може спостерігатися в собак

усіх віків, однак частіше в щенят до 6-місячного віку. У 2-15-

тижневих щенят куниць і єнотовидних

собак

захворювання

з'являється частіше і летальність досягає 30%. Норки, червоні

лисиці, єноти, скунси не чуттєві.

КУЛЬТИВУВАННЯ. ПВС культивується в культурах

клітин нирки кошеняти, собаки, не викликаючи ЦПД. Для

виявлення

АГ

у

клітин

використовують

флюоресциююча

сироватка проти вірусу панлейкопенії кішок. Установлено чутливість до ПВС різних культур кліток: перещеплювальної культури нирки ембріону собаки, Vero, меланоми собаки,

нирки

кішки, первинно-трипсинізовані

клітини

ембріону

собаки, серця, легенів, печінки. З

усіх

культурах

внутрішньоядерні включення були виявлені на8-15-у добу

після зараження тільки в клітинах легень ембріону собаки і

нирки кішки.

ГЕМАГЛЮТИНУЮЧІ

ВЛАСТИВОСТІ.

ПВС

ГА

еритроцити свині, зеленої мавпи і кішки при 4°С і рН 5,8-8,2,

але не дає гемаглютинації з еритроцитами , коняВРХ і

морських свинок. РГА використовується для діагностики

нових випадків панлейкопенії кішок. Вірус, виділений у

культурі кліток, також володіє ГА активністю.

СТІЙКІСТЬ ВІРУСУ. Вірус має високу стійкість до

нагрівання (стабільний при прогріванні при60°С протягом

години), рН середовища 3, дезінфектантам, впливу факторів

зовнішнього

середовища.

Він

стійкий

до

дії

,

ефіру

хлороформу, спирту і чуттєвий до гіпохлориду

натрію

та

соди.

ПАТОГЕННІСТЬ.

Чутливість собак

до

парвовірусу

залежить не від породи і статі, а від віку. При природному

зараженні інкубаційний період триває до10 днів, а при

експериментальному - 3-4 дні.

Смертність

коливається

в

межах 5-50%. Летальність щенят у віці4-5 мес здебільшого

25-30%,

але

може

досягати

80%і . Виділяють 3

форми

хвороби: серцеву - спостерігається в собак у віці від3 до 8

тижнів, кишкову - частіше реєструється у тварин від 8-ми

тижневого віку до9-ти місяців і комбінованупереважно

відзначається

у

віці

від6 до 16 тижнів. Розвиток

того

чи

іншого

синдрому,

залежить

від

здатності

вірусу

розмножуватися в клітинах, які активно діляться і зв’язано це

з віком щенят : до 3-тижневого віку в них активно діляться

клітини міокарда, після цього - клітини кишечнику.

ЛАБОРАТОРНА ДІАГНОСТИКА. Діагноз на ПВІС

ставлять

на

підставі

клінічних, патологоанатомічних

і

епізоотологічних

даних. Для

підтвердження

діагнозу

проводять лабораторні, дослідження. Наявність вірусу може

бути встановлена за допомогою ЕМ у свіжих фекаліях від

хворих

тварин.

Непрямим

методом

діагностики

може

служити

постановка

РГА

вірусомістким

матеріалом

з

еритроцитами свині чи африканської зеленої мавпи. Крім зазначених методів перспективним може виявитися РЗГА, ПЛР.

ІМУНІТЕТ І ЗАСОБИ СПЕЦИФІЧН ПРОФІЛАКТИКИ

Для профілактики ПВІС успішно використовуються гетерологічні, аттенуйовані чи інактивовані вакцини проти панлейкопенії кішок.

ПАНЛЕЙКОПЕНІЯ КІШОК
Панлейкопенія кішок (ПЛК,				парвовірусна		інфекція
котячих, агранулоцитоз		кішок,		чума	кішок,	котяча
лихоманка,	інфекційний ентерит кішок, котяча					атаксія,
інфекційний	ларинготрахеїт		кішок) -		висококонтагіозна
смертельна	хвороба	домашніх			, кішокщо	клінічно
виявляється	панлейкопенією,		лихоманкою, блювотою,
сильною діареєю і крайнім		зневоднюванням організму. При

клінічно вираженій хворобі гине 65-90% кішок.

Хвороба поширена повсюдно і реєструється в багатьох країнах світу (Франція, США, Англія, Канада, Бразилія, Індія й інші країни). Хворіють, головним чином, молоді кішки, а

там,	де вірус занесений	повторно, -	кішки усіх	віків.
Сприйнятливі всі представники родиниFelidae, леви, тигри.
У	Лондонському зоопарку	описані	смертельні	випадки

хвороби тигрів, леопардів, левів, гієн і інших представників родини котячих. Спостерігалося захворювання диких кішок,

єнотів	із	родиниProcyonidae.			Із	родини Mustelidae
заражаються тільки норки.
ВІРУС.		Вірус	вперше	ідентифікований			у Франції
Вержем і Христофором у 1928 р.
Морфологія і			хімічний	склад. Вірус має 1-спіральну
ДНК, ММ якого не визначена. Діаметр віріону 20-24 нм, він
має 32	капсомера,		20 з	них	гексони 12і		пентони.

Зустрічаються віріони витягнутої форми діаметром 9,5-12 нм. Плавуча щільність у CsCI 1,33 г/см3 . Вірус індукує у кішок утворення ВНА й анти-ГА, Перші виявляються на 3-й день після клінічного видужання і зберігаються кілька . років Гіперімунні сироватки титрують у РН і РЗГА. Виявлено кореляцію титрів у РЗГА і РН.

КУЛЬТИВУВАННЯ. Вірус розмножується в культурі клітин нирки, селезінки, лімфовузлів і наднирників

кошеняти. Він вибірково уражає клітини в стані активного

мітозу

через 2-3

години

після

клітинного

ділення.

Максимальний розвиток ЦПЗ настає на4-5-й день після

зараження

клітинного

моношару. На

3-й

день

після

інфікування культури клітин нирки кошеняти уражене ядро

збільшується, ядерний

хроматин

стає

більш

темним

і

зернистим.

Внутрішньоядерні

включення

збільшуються

в

розмірі, ущільнюються і оточені ореолом.

ГЕМАГЛЮТИНАЦІЙНІ

ВЛАСТИВОСТІ.

Вірус

володіє ГА активністю, але вона в різних штамів неоднакова.

СТІЙКІСТЬ ВІРУСУ. Вірус стійкий до фенолу, ефіру,

хлороформу, кислотам, трипсину, рН 3,0. При 56°С

вірус

залишається

активним

протягом60

хвилин.

Добре

зберігається в 50%-ному гліцерині, забуференому до рН 7,2.

У

культуральній

рідині, де

знаходиться

вірус, він

зберігається активним при температурах4° і 25°С протягом

13 місяців без зниження титру.

ПАТОГЕННІСТЬ

Частіше хворіють кішки у віці 7-12

місяців. Близько 70% захворілих

складають

тварини

молодше року. Хвороба протікає гостро і супроводжується

високою температурою (до 42°С), блювотою і лейкопенією

(100-50 лейкоцитів

у 1 мм3). Переважне

число

лейкопеній,

викликаних вірусом ПЛК, зустрічається серед кішок до3-

літнього віку. Патологоанатомічні зміни не характерні. При

розтині полеглих тварин знаходять слизисто-гнійний ексудат

на слизистій оболонці носа й ,

очейгострий

ентерит,

збільшення

селезінки,

набрякання

мезентеріальних

лімфовузлів. У клітинах епітелію кишечнику, а також у

лімфовузлах

виявляють

внутрішньоядерні

еозинофільні

включення.

ЛАБОРАТОРНА

ДІАГНОСТИКА.

Попередній

діагноз

ставлять

на

підставі

симптомів

хвороби

й

агранулоцитозу Для виділення вірусу з

трупів

беруть

шматочки

селезінки, мозку

і 12-палої

кишки.

Часто

вірус

виділяють

від клінічно здорових

на

вигляд

кошенят.

Внутрішньоядерні

включення

звичайно

виявляють

на4-й

день у інфікованих вторинних культурах нирок кошеняти.

Виділений вірус ідентифікують у РН і РЗГА. Ретроспективну

діагностику проводять на підставі серологічних реакцій РН,

РТГА

Можлива

експресдіагностика

за

допомогою РІФ,

ПЛР.

ІМУНІТЕТ			І			ЗАСОБИ			СПЕЦИФІЧН
ПРОФІЛАКТИКИ. Перехворілі тварини здобувають стійкий
імунітет, а	материнські AT			можуть		якийсь		час захищати
кошеняти від захворювання. Якщо в цей період кошенята
контактують з вірусом, у них може розвитися субклінічна
імунізуюча інфекція.
Активну		імунізацію			кішок			проводять		живим
аттенуйованим		чи	інактивованим				вірусом. У		США
застосовують живу вакцинуFelido vac L з аттенуйованого
штаму. Тварини		добре	переносять				вакцинацію. Вакцина
виявила гарні захисні властивості. Практикується також
аерозольна	вакцинація				кішок		культуральною			живою
вакциною.
ПАРВОВІРУСНА ІНФЕКЦІЯ СВИНЕЙ
Парвовірусна		інфекція		свиней-		(ПВІСв),		контагіозна
вірусна	хвороба,	що	виявляється				клінічно		тільки	в
супоросних	свиноматок		і	характеризується				прохолостами,

невеликою кількістю народжених поросят, народженням
муміфікованих плодів, мертвих і слабких поросят і рідше
абортами.
Зв'язок парвовірусу свиней з порушенням відтворної
функції свиноматок у природних умовах							уперше		була
встановлена		в 1967	р. у		Великобританії,			однак
експериментально хвороба була відтворена тільки через10
років. Необхідно враховувати, що					в патології		відтворної
системи свиноматок істотне значення мають віруси чуми
свиней,	хвороби		Ауескі,	японського			енцефаліту,
ентеровіруси, ротавіруси і парвовіруси. Причому останні
заподіюють		найбільший		економічний			,	збитокщо
виявляється, в основному, за рахунок загибелі і муміфікації
ембріонів. При виникненні хвороби в раніше благополучних
господарствах		народження		живих		поросят		на	одну
свиноматку в рік знижується на50-60%, у стаціонарно-
неблагополучних господарствах - на 10-20%.
ВІРУС. Вірус уперше виділили з абортованого плоду
свиноматки Майєр і ін. у 1966				р. у	господарстві,		де	було
відзначене		порушення	репродукції			свиней(передчасні
пологи, аборти, муміфікація плодів).
Морфологія і хімічний склад. Зрілий віріон має кубічну
симетрію,	включає 32 капсомера, 2				чи 3	капсидних		білки,

діаметр віріону близько 20 нм, не містить оболонки і ліпідів,

ММ складає 5,3´106Д. Вірусний геном представлений1спіральною ДНК із ММ1,4 МД, тобто близько 26,5% маси повного віріону. Плавуча щільність CsCIу повного інфекційного вірусу, неповного ("порожнього") віріону й екстрагованої віріонної ДНК складає1,38-1,395,1,30-1,315 і 1,724 г/см3 відповідно. Вірус містить 3 великих поліпептиди: А, В, С. Усі ізоляти ПС виявилися в АГ-відношенні схожі, якщо не цілком ідентичні.

Найбільша кількість вірусу виявляється в лімфоїдних тканинах. До загибелі плоду вірусний АГ накопичується в цитоплазмі більшості клітин ембріону й у плаценті. У всіх експериментально заражених не імунізованих поросят розвивається віремія, і вони виділяють вірус зі слиною і фекаліями. Поросята, що вижили, можуть залишатися все життя вірусоносіями і періодично виділяти його в зовнішнє середовище. Заражені парвовірусом кнури виділяють вірус зі спермою. Вірус володіє вираженою АГ активністю і індукує синтез ВНА, КЗА, ПА й анти-ГА.

КУЛЬТИВУВАННЯ. ПВСв добре розмножується в первинних культурах клітин нирок, щитовидної залози і тестикул поросяти і накопичується в титрі107-108ТЦД 50/мл. До вірусу чуттєві деякі перещеплювальні культури клітин свиней. У культурах клітин нирок(РК-15) і тестикул (ST) поросят він накопичується у тигрі106-107ТЦД 50/мл. Культура клітин СНЕВ не чуттєва до вірусу.

Реплікація ПВСв найкраще відбувається в культурах клітин свинячого походження. Найвища концентрація вірусу

досягається		на 3-4-й	день		культивування. ЦПД
характеризується		вакуолізацією		і	округленням	, клітин
дифузійною грануляцією. При вивченні циклу розмноження
методом РІФ було встановлено, що АГ виявляється в ядрі
клітин	через 6 годин після		зараження		і накопичується в
максимальних кількостях через 18-24 годин.
Перещеплювальні культури клітин людини (HeLa, Hep-
2, KB)	виявилися контамінованими			ПВСв. Імовірно, у		ці

культури клітин він був занесений із трипсином, отриманим з підшлункової залози інфікованих свиней. Виділення ПВСв із комерційних партій трипсину підтверджує цю гіпотезу і свідчить про високу стійкість вірусу до дії різних факторів у процесі виготовлення препарату. Контаміновані культури клітин можна звільнити від вірусу шляхом серійного

пасажування в присутності специфічної антисироватки(1%) у ростовому середовищі. Розмноження ПВСв у первинних і

перещеплювальних		культурах		клітин	супроводжується
розвитком	ЦПЗ,	які	характеризується			дифузійною
зернистістю й округленням клітин, відділенням їх від скла і
частковим чи повним руйнуванням моношару.
ГЕМАГЛЮТИНАЦІЙНІ				ВЛАСТИВОСТІ.		ПВСв
аглютинує еритроцити морської свинки, курчати,						кішки,
пацюка, миші,	мавпи, людини		і	не аглютинує	еритроцити

барана, коня, свині, ВРХ, собаки, кролика, хом'ячка і качки. Для визначення його гемаглютинуючої активності частіше використовують еритроцити морської свинки, реакцію проводять при температурі4°С. Найбільшим титр ГА спостерігається при використанні вероналового буфера.

	СТІЙКІСТЬ ВІРУСУ. Парвовірус свиней (ПС) стійкий
до	дії	різних	фізико-хімічних .		факторівЗберігає
інфекційність		при рН3-9 і 37°С 1,5 години, однак				цілком
інактивується при рН 2 при тих же умовах.
	ПАТОГЕННІСТЬ.		Парвовірус	свиней -	найбільш
частий		збудник	хвороби, відомий		як	СМЕДІ
(мертвонароджуваність,			муміфікація,	смерть		ембріона,

безплідність). Донедавна вважалося, що збудником СМЕДІ є тільки ентеровіруси п'яти типів. В даний час доведено, що в етіології синдрому СМЕДІ бере участь парвовірус одного серотипа. Парвовірусна і ентеровірусна інфекції клінічно

виявляються однаково.
Хвороба у свиноматок протікає, як							правило, без
видимих	симптомів.		Спостерігається			лише		порушення
репродуктивної функції. У перший тиждень після зараження
відзначають	легку		лейкопенію			й	іноді	короткочасне
підвищення температури. У цей період вірус може бути
виділений	із	крові		і	тканин		з	різко	виражено
проліферативною		активністю. У			період		віремії		вірус

проходить через плаценту й інфікує ембріони. Патогенна дія його поширюється до70-го дня супоросності тільки на ембріони, після чого вони стають імунокомпетентними і на зараження відповідають синтезомAT. Поросята народжуються нормальними, але є носіями одночасно вірусу

і AT.

ЛАБОРАТОРНА ДІАГНОСТИКА. На наявність у господарстві парвовірусної інфекції свиней вказують ознаки