2.2. Осаждение белков солями тяжёлых металлов

Белки при взаимодействии с солями тяжелых металлов (медь, же­лезо, свинец, цинк, серебро, ртуть и др.) денатурируются и образуют нерастворимые в воде комплексные соединения, которые выпадают в осадок. Возникновение нерастворимых в воде комплексов обусловле­но адсорбцией тяжелого металла на поверхности белковой молекулы. В избытке солей первоначально образовавшиеся осадки растворяются (за исключением солей AgNO₃ и HgCl₂), что связано с адсорбцией тяжелого металла на поверхности коллоидных частиц и появлением положительного заряда на молекуле белка (адсорбционная пептизация). На способности белков образовывать нерастворимые осадки с солями тяжелых металлов основывается использование белков в качестве противоядия при отравлении тяжелыми металлами (ртутные, свин­цовые отравления), пока соли этих металлов еще не успели всосаться. При использовании белков (яичный белок, молоко) в качестве проти­воядий при отравлении следует давать их в больших количествах, учи­тывая то, что при избытке некоторых солей образуются с белками комплексные растворимые соединения. В случае отравления ртутны­ми солями необходимо помнить, что осадок белка, образующийся при воздействии Hg²⁺, может раствориться в присутствии поваренной соли.

Со свежеприготовленным гидроксидом меди (II) все -аминокислоты в мягких условиях дают хорошо кристаллизующиеся внутрикомплексные (хелатные) соли меди (II) синего цвета:

глицинат меди (II)

В таких солях ион меди координационными связями соединен с аминогруппами.

Реактивы и материалы: раствор яичного белка или разбавленная сыворотка крови, сернокислая медь, 5% раствор, уксуснокислый свинец, 5% раствор, азотнокислое серебро, 3% раствор.

Оборудование и посуда: штатив с пробирками, капельницы, пипетки, стеклянные палочки.

Порядок выполнения работы

1. В три пробирки наливают по 10 капель раствора белка.

2. В первую добавляют 1—2 капли 5% раствора сернокислой меди, во вторую 1—2 капли 5% раствора уксуснокислого свинца и в третью 1—2 капли 3% раствора азотнокислого серебра. Выпадает осадок белка во всех трех пробирках.

3. В каждую из трех пробирок добавляют избыток соответствую­щего осадителя, и раствор перемешивают стеклянной палочкой. В первой и второй пробирках наблюдается растворение осадка (пептизация). В третьей пробирке растворения осадка не происходит.

2.3. Осаждение белков алкалоидными реактивами

Алкалоидные Реактивы и материалы: осаждают как белки, так и алкалоиды — азотистые основания растений. Объясняется это наличием в белке азотистых гетероциклических группировок, аналогичных тем, ко­торые находятся в молекулах алкалоидов (пиррольные, индольные, юшдазольные). Осаждение белков алкалоидными реактивами проте­кает в кислой среде и обусловлено образованием нерастворимых солеобразных соединений с основными азотистыми группами бел­ков. При этом происходит адсорбция аниона осадителя, например [Fe(CN)₆]^4-, на белковой молекуле, являющейся вследствие подкисления катионом. Белки, обладающие основным характером (протамины, гистоны), осаждаются алкалоидными реактивами в нейт­ральной среде.

Реактивы и материалы: раствор яичного белка или разбавленная водой сыворотка крови, уксусная кислота, 10% раствор, уксусная кислота, 1% раствор, железистосинеродистый калий, 5% раствор, вольфрамовокислый натрий, 10% раствор, танин, насыщенный раствор, пикриновая кислота, насыщенный раствор, раствор йодной ртути в йодистом калии

Оборудование и посуда: штатив с пробирками, капельницы, пипетки.