Порядок выполнения работы

С сухую пробирку вносят 10 капель ацетона и 2 капли раствора лецитина. Выпадает белый осадок. В другую пробирку прибавляют к 10 каплям лецитина несколько капель дистиллированной воды до образования устойчивой эмульсии.

11.3. Стерины (стеролы) и стериды

Стерины — вторичные одноатомные непредельные циклические спирты, содержащие ядро циклопентанпергидрофенантрена. Представителем стеринов животных и человека является холестерин. Холестерин входит в состав липопротеинов тканей и крови. Особенно богаты холестерином мозг, надпочечники, яичный желток, желчь. Холестерин используется для синтеза витамина D, желчных кислот, кортикостероидов, эстрогенов и андрогенов. Холестерин нерастворим в воде и растворяется в хлороформе, эфире, ацетоне, горячем спирте и других органических растворителях, а также в жирах.

11.3.1. Открытие холестерина в тканях головного мозга

По химической природе холестерин является циклическим ненасыщенным вторичным спиртом.

Цветные реакции на холестерин зависят от дегидратации холестерина под действием концентрированной серной кислоты и последующей конденсации получаемых продуктов с образованием непредельных углеводородов с сопряженными двойными связями, дающих с серной кислотой различные окрашенные производные.

Реактивы и материалы: мозг, кальций сернокислый (гипс), в порошке, хлороформ, серная кислота концентрированная, уксусный ангидрид.

Оборудование и посуда: весы аптечные, ступка фарфоровая, стеклянная пластинка, сушильный шкаф, скальпель или нож, стеклянная палочка или лопаточка, пипетка на 5 мл, воронка с бумажным фильтром, штатив с пробирками, капельницы.

Порядок выполнения работы

1.Высушенный с гипсом мозг заливают в пробирке 5 мл хлороформа и экстрагируют 5 минут при комнатной температуре при интенсивном постоянном встряхивании.

2.Экстракт отфильтровывают в сухую пробирку, делят на две части и открывают холестерин двумя реакциями.

3.Для реакции Зальковского к одной части хлороформного экстракта мозга приливают равный объем концентрированной серной кислоты и содержимое перемешивают осторожным встряхиванием пробирки.

4.Дают жидкости отстояться. В результате образования холестерилена продукта дегидратации холестерина верхний хлороформный слой оказывается окрашенным в красный цвет. Нижний слой (H₂SO₄) имеет желто-оранжевую окраску с зеленой флуюоресценцией (жидкость в проходящем свете прозрачна и желто-красного цвета, в отраженном свете кажется мутной с зеленым оттенком).

5.Для постановки реакции Либермана—Бурхарда к другой части хлороформного экстракта мозга приливают 7 капель уксусного ангидрида и 1—2 капли концентрированной серной кислоты.

6.Жидкость хорошо перемешивают, после чего она принимает сначала синюю, затем сине-зеленую и, наконец, зеленую окраску. При незначительном количестве холестерина в растворе может сразу появиться зеленая окраска. Растворы, содержащие больше холестерина (1% и выше), дают сначала красную окраску, быстро пере ходящую в фиолетовую, синюю и, наконец, в зеленую. Последнюю окраску обусловливает сульфокислота холестерилена.