Порядок выполнения работы

1. В пробирку с дистиллированной водой постепенно добавляют по каплям солевую вытяжку. В момент смешивания капли вытяжки с водой хорошо видно образование осадка водонерастворимых белков (актомиозина и глобулина X).

2. К солевой вытяжке, помещенной в пробирку, добавляют при энергичном встряхивании кристаллический хлористый нат­рий до насыщения. В осадок выпадают актомиозин, глобулин X и частично миоген.

3. В химический стаканчик помещают 20 мл солевой вытяжки и добавляют 10 мл насыщенного раствора сернокислого аммония ('/а насыщения). Выпавший осадок актомиозина отфильт­ровывают и к 20 мл фильтрата добавляют 7 мл насыщенного раствора сернокислого аммония (²/₃ насыщения). В осадок вы­падают миоген и глобулин X.

23.2. Ферменты мышечной ткани

Мышечная ткань богата ферментами.

Сукцинатдегидрогеназа — этот фермент участвует в процессе клеточного дыхания. Он отнимает водород от янтарной кислоты, окисляя ее в фумаровую. Доказать наличие в мышечной ткани сукцинатдегидрогеназы можно реакцией с метиленовой синью.

Метиленовая синь способна окисляться и восстанавливаться, при этом окисленная форма ее имеет синюю окраску, а восстановленная — бесцветна. Метиленовая синь может служить промежуточным переносчиком водорода

Реактивы и материалы: мышечная кашица, 3% раствор янтарной кислоты нейтрализованной 10% раствором гидроксида натрия и доведенной до слабощелочной реакции по лакмусу, 0,02% водный раствор метиленовой сини.

Оборудование и посуда: пробирки, капельницы, пипетки, термостат.

Порядок выполнения работы

В две пробирки помещают по 3—4 г мышечной кашицы.

В первую пробирку добавляют 0,5 мл 3% раствора янтар­ной кислоты нейтрализованной 10% раствором гидроксида натрия и доведенной до слабощелочной реакции по лакмусу.

В обе пробирки добавляют по две капли 0,02% водного раствора метиленовой сини, встряхивают и ставят в термостат при 37 °С.

Через некоторое время в первой пробирке метиленовая синь обесцвечивается, во второй — сохраняет первоначальную окраску.

23.3. Экстрактивные вещества мышечной ткани

В мышечной ткани содержится 0,2—0,3% креатина и 0,003% креатинина.

Метод открытия креатина основан на превращении его в креатинин, что происходит при нагревании с кислотами.

Креатинин открывается по реакции с пикриновой кислотой [С₆Н₂(NО₂)₃ОH] в присутствии щелочи; при этом образуется оранжево-красная окраска.

Реактивы и материалы: водная вытяжка из мяса, 1 н. соляная кислота, 1 н. раствор гидроксида натрия, насыщенный раствор пикриновой кислоты, 10%-ный раствор гидроксида натрия.

Оборудование и посуда: пробирки, водяная баня, воронка, фильтровальная бумага, пипетки.

Порядок выполнения работы

В пробирку помещают 10 мл водной вытяжки из мяса, добавляют 5 мл 1 н. соляной кислоты и нагревают в течение 1 ч в кипящей водяной бане.

Жидкость отфильтровывают и 5 мл фильтрата осторожно нейтрализуют 1 н. раствором гидроксида натрия по лакмусу. Затем прибавляют 2—3 мл насыщенного раство­ра пикриновой кислоты и столько же 10%-ного раствора гидроксида натрия.

Появление оранжево-красной окраски указывает на наличие креатинина. Реакция зависит отчасти от присутствия в мышечной ткани креатинина, но главным образом от креатина, превратившегося в креатинин при нагревании с соляной кислотой.