Заключение окрашенных срезов под покровное стекло

Целью окраски срезов является оптическая дифференцировка структурных элементов клеток и тканей.

Употребляемые в гистологической технике краски делятся на 4 группы:

1. Кислые (фоновые, протоплазматические) краски, например, эозин, фуксин кислый, пикриновая кислота, отсюда и термин оксифилия — любящий кислоту, т. к. некоторые тка­невые элементы воспринимают или окрашиваются только кислотными красителями.

2. Основные (ядерные), например, гематоксилин.

3. Нейтральные, например, метиленблау, нейтраль-рот (нейтрофилия).

4. Специальные, например, судан III и др.

Процесс окраски заключается в обработке среза в красящих растворах, контрастных по цвету и различных по химическому характеру.

Эозин (кислая краска красного цвета) реагирует со щелочной протоплазмой (оксифилия).

Гематоксилин (краска с щелочной реакцией лилового цвета) реагирует с кислым ядром (базофилия).

Метахромазия — такое явление, когда краска окрашивает ткань в другой цвет, нежели она сама. Например, тионин, муцикармин и др. являются красками синего цвета, а слизь окрашивают в красный цвет.

Способы окраски

Гематоксилин-эозин — обязательная ориентировочная окраска.

Дополнительные методы окраски, например, на соединительную ткань, жир, гемосидерин, эластику и т. д.

Следует помнить, что на качество окраски влияют способ фиксации, а также предварительная и последующая обработка препарата. Красящие растворы должны быть чистыми, для чего любой краситель необходимо перед употреблением отфильтровывать, а водный раствор готовить только на дистиллированной воде. Окрашивать лучше красками низкой концентрации в течение длительного времени. Лучше срезы перекрашивать, а затем доводить до требуемой окраски путем отмывания в соответствующей жидкости, что позволяет более отчетливо видеть определенные элементы тканей. Окраска должна вестись под контролем микроскопа в течение длительного времени. Лучше срезы перекрашивать, а затем доводить до требуемой окраски путем отмывания в соответствующей жидкости, что позволяет более отчетливо видеть определенные элементы тканей. Окраска должна вес­тись под контролем микроскопа.

Окраска срезов гематоксилин—зозииом

Необходимые материалы

1. Гематоксилин. Эту краску получают из коры кампеше­вого дерева, красящим веществом является продукт его окис­ления — гематеин (С₁₆Н₁₂О₆).

2. Существует много рецептов окисления гематоксилина: например, квасцовый гематоксилин (гемалаун) Майера, же­лезный гематоксилин Вейгерта, гематоксилин Эрлиха и т. д.Гемалаун Майера: гематоксилина — 1,0, квасцов калийных — 50,0, йодноватокислого калия — 0,2, воды дистиллированной —1000,0. Гематоксилин Вейгерта: 1 %-ный раствор гематоксилина в спирте. Полуторахлористого железа — 4 см³,

соляной кислоты — 1 см³, воды дистиллированной — 95 см³.

Оба раствора приготовляют отдельно, смешивают перед употреблением в равных объемах.

Примечания.

1.50%-ный раствор водного хлорного железа FeCl₃-6H₂O— желто-бурая масса.

2. Соляная кислота — 1 %-ный водный или спиртовый раствор.

3. Эозин (анилиновая краска) —0,1 — 1 %-ный водный или спиртовый раствор.

Результаты окраски: 1) ядра лиловые, синие, 2) цитоплазма клеток — различные тона красного цвета.