Окраска замороженных срезов для выявления жира Суданом III

Необходимые материалы

1. Судан III

Рецепт: спирта 70°— 100 см³

Судана III — 0,3 г.

Кипятят несколько минут на водяной бане, охлаждают, филь­труют.

2. Гематоксилин Майера или Вейгерта.

3. 1%-ный раствор соляной кислоты.

2. 50%-ный раствор глицерина для заключения срезов под покровное стекло.

окраски

Срезы заключают в глицерин под покровное стекло

Результаты окраски: жир оранжево-красного цвета; ядра синие, лиловые; протоплазма бесцветная.

Очень хорошие результаты для выявления жира получают при окраске щелочным Суданом по Герксгеймеру:спирт абсолютный (или 96°) —70 мл.

10%-ный раствор едкого натра — 20 мл,

дистиллированная вода — 10 мл.

судан III или IV — 0,25—1,6 г.

Кипятят в течение нескольких минут на водяной бане. Окрас­ка 3—5 мин.

Окраска на слизь муцикармином Мейера

Способ фиксации и приготовления срезов не имеет значе­ния.

Необходимые материалы

1. Квасцовый гематоксилин (с. 23).

2. 1%-ный солянокислый спирт.

3. Раствор муцикармина.

Приготовление муцикармина: готовую краску разводят 50%-ным спиртом из расчета 1,5 г сухого красителя на 100 мл спирта.

Ход окраски

1. Окрашивают срезы квасцовым гематоксилином.

2. Промывают в воде.

3. Дифференцируют в 1%-ном солянокислом спирте.

1. Подсинивают в слабощелочной воде и снова хорошо промывают в водопроводной воде в течение 5 мин.

4. Выдерживают в растворе муцикармина, разведенном в 5 раз водой, 10—15 мин (в неразведенном 5—10 мин.).

5. Промывают срезы в воде.

6. Проводят через спирты, ксилол и заключают в бальзам. Результаты окраски: слизь окрашивается в красный цвет, ядра клеток — в синий.

Реакция Шифф — йодная кислота (шик — реакция)

С помощью этой реакции можно выявить гликоген, мукопротеиды, гликопротеиды, гликолипиды. Фиксация — форма­лин, спирт, жидкость Карнуа. Срезы парафиновые и заморо­женные.

Необходимые материалы

1. Йодная кислота или перйодат натрия или калия.

2. Реактив Шиффа.

Приготовление реактива Шиффа. 1 г основного фуксина растворяют в 200 мл кипящей дистиллированной воды и, пери­одически встряхивая сосуд с раствором, продолжают кипя­чение в течение 5 минут. Затем, охладив до 50°, раствор фи­льтруют, добавляют 20 мл 1 н раствора НС1 и охлаждают до 25°, после чего добавляют 1 г метабисульфита натрия (Na₂S₂O₅) или калия (K2S2O5) и оставляют в темноте. Через 18—24 часа добавляют 2 г активированного угля, фильтруют. Готовый реактив светло-желтого цвета.

3. Сернистая вода. К 200 мл дистиллированной воды прибавляют 10 мл 10%-ного раствора биосульфита натрия и 10 мл нормального раствора соляной кислоты.

4. Дистиллированная вода.

Ход окраски

1. Срезы из воды погружают в раствор йодной кислоты на 5—10 мин или перйодата натрия или калия на 20—30 мин.

2. Тщательно промыть в двух—трех порциях дистиллиро­ванной воды (по 3—5 мин), чтобы удалить остаток йодной кислоты.

3. Помещают в реактив Шиффа на 10—20 мин.

4. Обрабатывают в трех порциях свежеприготовленной сернистой воды (1—2 мин.).

5. Промывают в водопроводной воде в течение 10 мин, ополаскивают в дистиллированной.

6. Обезводить, просветлить и заключить в бальзам (перед заключением возможно проводить докраску срезов гематок­силином).

Результаты окраски: полисахариды пурпурно- или лилово-красного цвета, нейтральные мукополисахариды пурпурно-красные, гликоген более темный.