Справочные материалы для оформления протоколов и выполнения практических работ

Приложение №1

Методы санитарно-микробиологическое исследование воздуха.

Цель: определение общей микробной обсемененности, воздушно-капельного и производственного загрязнения.

Определяемые показатели: ОМЧ, наличие СПМ, наличие производственных штаммов микроорганизмов, патогенных микроорганизмов.

Методы и исследования: седиментационный, аспирационный, фильтрационный.

Седиментационный метод (метод Коха)

Чашки с МПА, кровяным агаром (для стрептококков) и дифференциально-диагностическими средами Эндо (для энтеробактерий), ЖСА (для стафилококков), Сабуро (для грибов) выставляют в открытом виде на срок от 10 до 30 мин в различных помещениях, после чего закрывают и помещают в термостат на двое суток с последующим выдерживанием при комнатной температуре в течение 2 суток.

Расчет по модифицированной формуле Омелянского ведется на 1 м² поверхности.

Х = n 10⁴ / пr² t,

где X - ОМЧ воздуха обследуемого помещения; n - количество колоний на чашке; t - время экспозиции чашки (мин); пr² - площадь чашки Петри (см²); 10⁴ - пересчет м² в см².

Формула Омелянского, даже модифицированная, имеет ряд существенных недостатков:

а) нельзя определить точный объем воздуха, из которого микробы оседают на чашку;

б) мелкодисперсная фаза аэрозоля (а с ним и микробы) практически не оседают и токами воздуха постоянно поддерживаются во взвешенном состоянии.

Результаты, получаемые с помощью этого метода, позволяют сравнить степень обсемененности разных помещений при проведении мероприятий по очищению воздушной среды.

Аспирационный метод

В этом методе используется принцип ударной струи воздуха, получаемый с помощью аппарата Кротова или других установок (ПУ-1Б). Порядок работы и механизм улавливания микрофлоры воздуха следующие:

1). Открывают крышку прибора и устанавливают на вращающийся столик чашу Петри с питательной средой. Закрывают крышку и включают прибор. 2). После установления поплавка ротаметра на заданной величине объема засеваемого воздуха начинают счет времени. Струя воздуха, проходя через узкую клиновидную щель, с большой скоростью ударяется о влажную поверхность питательной среды, и к ней прибиваются и прилипают частицы и капли, содержащие бактерии. Равномерное обсеменение поверхности чашек достигается вращением столика, на котором находится чашка с питательной средой. Скорость вращения столика устанавливают специальным винтом.

3). После посева необходимого объема воздуха, равного произведению показателя ротаметра на время, выключают прибор, открывают крышку, после остановки столика берут чашку со средой, закрывают крышку и помещают в термостат на двое суток с последующим выдерживанием при комнатной температуре в течение 2 суток.

4). На МПА определяют ОМЧ, на кровяном агаре - наличие стрептококков, на среде Эндо - бактерии кишечной группы, на ЖСА - стафилококки, на среде Сабуро - грибы.

5). Для определения ОМЧ исследуют 100 л воздуха, для выявления стафилококков, стрептококков, энтеробактерий и грибов - 250 л воздуха.

6). Расчет количества микроорганизмов в 1 м³ воздуха проводят по формуле:

К = N х 1000 / V х t,

где N -количество колоний на 1 чашке, V - скорость просасывания воздуха (м³/мин), t - время отбора пробы в минутах.

Приложение №2