Антигенная система резус

Резус-фактор содержится в эритроцитах и контролируется тремя парами аллельных генов.

Rh₀(D) – Hr(d)

rh’(С) – hr’(c)

rh”(Е) – hr”(e)

Наибольшее значение в силу распространенности имеет аллель антигенов Rh₀(D) – Hr(d), которая определяет резус принадлежность реципиента. Резус принадлежность донора определяют одновременно аллели Rh₀(D) – Hr(d) и rh’(С) – hr’(c). Антиген Е на современном этапе не имеет клинического значения.

Антигены системы резус способны вызвать сенсибилизацию (во время беременности резус-отрицательной матери резус-положительным плодом, после переливания резус-положительной крови). Образующиеся антитела относятся к неполным, тепловым. Они обусловливают несовместимость крови при повторном переливании резус-положительной крови.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС-ФАКТОРА МЕТОДОМ КОНГЛЮТИНАЦИИ

С ПРИМЕНЕНИЕМ ЖЕЛАТИНА В ПРОБИРКАХ С ПОДОГРЕВОМ

I пробирка - 1 капля эритроцитов + 2 капли антирезус-сыворотки + 2 капли 10% желатина → 60 минут в термостате при температуре +46+48^оС + 5-8 мл изотонического раствора(для исключения неспецифической аггрегации эритроцитов и для лучшей визуализации истинных агглютинатов)

II пробирка (контроль) - 1 капля эритроцитов + 2 капли изотонического раствора + 2 капли 10% желатина → 60 минут в термостате при температуре +46+48^оС + 5-8 мл изотонического раствора

Определение резус-фактора экспресс-методом в пробирке без подогрева

В пробирке: 2 капли универсальной антирезус сыворотки + 1 капля эритроцитов - экспозииция 5 мин - + 5-8 мл изотонического раствора

ПРОБЫ НА ИНДИВИДУАЛЬНУЮ СОВМЕСТИМОСТЬ

Проводятся in vitro между эритроцитами конкретного донора и сывороткой конкретного реципиента для предупреждения гемотрансфузионных осложнений отдельно для систем АВ0 и резус. Для получения сыворотки пациента берут 10 мл его крови, центрифугируют 10 мин при 1000-2000 об/мин, затем следует дождаться ретракции фибринового сгустка в надосадочной жидкости (10-15 мин). После этого можно собрать пипеткой достаточное количество сыворотки.

Проба на совместимость по системе ав0

Каплю сыворотки реципиента и каплю эритроцитов донора перемешивают на плоскости при комнатной температуре. Отсутствие агглютинации в течение 5 минут свидетельствует о совместимости.

Проба на совместимость по резус-фактору с применением 10% раствора желатина

В пробирку вносят 1 каплю отмытых эритроцитов донора + 2 капли сыворотки пациента, ставят в термостат при +46+48^оС на 30 минут, добавляют 5-8 мл изотонического раствора и оценивают. Отсутствие агглютинации свидетельствует о совместимости.

Причины ошибок при определении группы крови,

резус-принадлежности и проб на совместимость

I Технические

1) Ошибочный порядок расположения реактивов на тарелках и в пробирках

2) Нарушение температурных условий (неспецифическая холодовая агрегация при температуре менее 15^оС и отсутствие реакции антител анти-А и анти-В с антигенами А и В при температуре выше 25^оС.

3) Неправильное соотношение растворов

4) Нарушение временных условий (при недостаточной экспозиции можно получить отсутствие агглютинации со слабыми антигенами, при избыточной экспозиции капля по краям подсыхает, создается видимость агглютинации)

5) Плохое качество реагентов (в том числе при нарушении правил хранения)