Занятие 6
ТЕМА: МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ХОЛЕРЫ.
Цель: изучить методы микробиологической диагностики холеры. Ознакомиться с методами специфической профилактики и терапии холеры.
Холера - острое антропонозное особо опасное карантинное инфекционное заболевание, характеризующееся клиническими симптомами гастроэнтерита с резким обезвоживанием и тяжелой интоксикацией.
Вид Vibrio cholerae имеет 4 биовара: cholerae, eltor, proteus (вибрион Мечникова), albensis (светящийся вибрион). Холеру вызывают 2 биовара: cholerae и eltor. Холерный вибрион монотрих, очень подвижный, требователен к PH, растет на щелочных средах, обладает высокой биохимической активностью. По отношению к трем углеводам- сахарозе, маннозе и арабинозе все вибрионы делятся на 8 групп (по Хейбергу). Биовары cholerae и eltor относятся к I группе Хейберга: расщепляют до кислоты без газа сахарозу и маннозу и не расщепляют арабинозу.
Холерный вибрион содержит О- и Н- антигены. По О-антигену все вибрионы делятся на серогруппы. Биовары cholerae и eltor относятся к О- I группе. В 1993 году как возбудитель холеры выделен серовар О139(Бенгал) Антиген О I- серогруппы состоит из 3х компонентов: А, В и С, разные сочетания которых образуют серовары: Огава (АВ), Инаба (АС), Гикошима (АВС). Если холерные вибрионы не агглютинируются О-I сывороткой, но обладают специфическими для вида свойствами, то их называют неагглютинирующими или НАГ-вибрионами.
Вирулентность холерного вибриона обусловлена двумя токсинами: эндотоксином и экзотоксинам. Ведущую роль в патогенезе заболевания играет экзотоксин-холероген. Он вызывает цитотоксический эффект –потерю организмом жидкости и солей натрия, калия ,что является главной причиной развития алгида и смерти больного.
Диагностика холеры проводится бактериологическим методом. Материалом для исследования служат испражнения, рвотные массы, пищевые продукты, трупный материал и др.
Питательные среды для культивирования холерного вибриона: 1% щелочная пептонная вода, щелочной агар, среда ТЦБС.
Самостоятельная работа студентов:
Зарисовать в тетрадь схему микробиологической диагностики холеры.
На первом этапе исследуемый материал изучают в мазках, окрашенных по Граму и методом «раздавленная» и «висячая» капля, а затем засевают на 1% щелочную пептонную воду и плотные питательные среды.
Для накопления материала культуру пересевают на новую пептонную воду и еще раз на пластинчатые среды. Выделяют чистую культуру.
Выделенную культуру идентифицируют по морфологическим и тинкториальным (микроскопия мазков, окрашенных по Граму), культуральным, биохимическим и антигенным свойствам.
Серовары Vibrio cholerae определяют в реакции агглютинации на стекле с агглютинирующими сыворотками Инаба, Огава, Гикошима.
Биохимические свойства определяют к углеводам: сахароза, манноза, арабиноза.
Изучение препаратов для профилактики и терапии холеры.
Оформление протокола исследования.
Схема 4. Микробиологическое исследование при холере
(По Борисову л.Б., 2001)
