Вопросы для самоконтроля:
1. Кем и когда были открыты вирусы?
2. Чем отличаются вирусы от всех живых организмов?
3. Что такое вирион? Что такое капсид, нуклеокапсид, суперкапсид?
4. Какие признаки вирусов положены в основу современной классификации вирусов?
5. Почему вирусы являются облигатными паразитами?
6. Перечислите основные методы диагностики вирусных заболеваний.
7. Какие методы используются для культивирования вирусов?
8. Что такое культура тканей(или культура клеток)? Какие вы знаете типы тканевых культур?
9. Какие питательные среды используются для выращивания культур клеток?
10. Какие существуют методы заражения куриного эмбриона? Какого возраста эмбрионы используются для заражения?
11. Как обнаруживают наличие вируса в курином эмбрионе? Как ставится реакция торможения гемагглютинации (РТГА)? Для чего она используется?
12. Как обнаруживают наличие вируса в культуре ткани?
13. Что такое ЦПД вируса?
14. Что собой представляет метод «бляшек»?
15. Какие вы знаете внутриклеточные включения? Какими методами их окрашивают?
Занятие 20
ТЕМА: МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ОСТРЫХ РЕПИРАТОРНЫХ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ. ГРИПП.
Цель: иметь представление о возбудителях ОРВИ. Изучить биологические особенности вируса гриппа и методы лабораторной диагностики.
ОРВИ включают большое количество вирусных болезней с поражением различных отделов дыхательных путей и аэрозольным механизмом передачи. Возбудителями ОРВИ могут быть более 200 различных вирусов.
Возбудители ОРВИ:
Вирусы гриппа (Orthomyxoviridae). Вирусы гриппа A, B и С.
Парамиксовирусы (Paramyxoviridae) - в это семейство входят различные представители, в том числе вирусы парагриппа человека (ВПГЧ) 1,2,3,4-го типов, паротита, респираторно-синцитиальный вирус (RS-вирус), вирус кори (род Morbilivirus).
Респираторные коронавирусы (Coronaviridae).
Пикорнавирусы (Picornoviridae). Из этого семейства собственно возбудителями ОРВИ являются риновирусы (род Rhinovirus,более 100 серовариантов), а также некоторые сероварианты вирусов ECHO и Коксаки (род Enterovirus).
Респираторные реовирусы (Reoviridae).
Респираторные аденовирусы (Adenoviridae).
Все перечисленные семейства относятся к РНК-содержащим вирусам, за исключением аденовирусов, геном которых представлен двунитевой ДНК.
Вирус гриппа относится к семейству ортомиксовирусов. Вирион имеет фрагментированную одноцепочечную РНК, которая состоит из 8 фрагментов, что обусловливает большую изменчивость вируса. Форма вириона чаще сферическая, капсид построен из простых белков, покрыт суперкапсидной оболочкой (см. схему строения вируса гриппа). На поверхности суперкапсидной оболочки имеются гликопротеины, представленные гемагглютинином и нейраминидазой. Гемагглютинин распознает мукопептидные рецепторы чувствительных клеток и способствуют адсорбции вируса на клетке. Нейраминидаза обеспечивает проникновение вируса в клетку, расщепляя сиаловые кислоты, входящие в состав мембран клетки. Вирус гриппа имеет внутренние антигены, на основании которых вирусы гриппа подразделяются на типы А, В и С, а также поверхностные антигены, представленные гемагглютинином (Н) и нейраминидазой (N). Эти поверхностные антигены более вариабельны. У вируса гриппа А различают 15 вариантов гемагглютинина и 10 вариантов нейраминидазы. Вирус гриппа А, поражающий человека имеет гемагглютинины Н1, Н2 , Н3 и нейраминидазу N1, N2.. В зависимости от их сочетания выделяют три варианта вируса гриппа H1N1,H2N2,H3N2 .
Источником инфекции для человека является больной человек. Путь заражения - воздушно-капельный. Возможен также контактный путь за счет попадания возбудителя инфекции в носоглотку через грязные руки, а также предметы бывшие в контакте с больным человеком - носовые платки, маски, инструменты и т.д. Природным резервуаром вируса гриппа А являются птицы, реже животные. Вирус гриппа В встречается только у людей, С - у людей, а также у свиней, возможно у собак. Вирусы адсорбируются на эпителиальных клетках дыхательных путей и с помощью нейраминидазы проникают в клетку, где происходит размножение. Из-за повреждения мембраны эпителиальных клеток на поверхности слизистой дыхательных путей образуются эрозии. Через эрозированную поверхность вирусы пападают в кровь (вирусемия) и разносятся по всему организму. Продукты распада клеток и некоторые вирусные белки оказывают токсическое действие на органы и системы организма. Инкубационный период короткий от нескольких часов до 7 суток, в среднем 1-2 суток. Для гриппа характерно острое начало, высокая температура, общая интоксикация, характеризующаяся недомоганием, головными болями, болями в глазных яблоках, мышцах.
Рис. 4. Этиологическая структура ОРВИ