Самостоятельная работа студентов
Изучить схему бактериологического исследования крови больного брюшным тифом (схема №2).
Произвести посев крови больного брюшным тифом на желчный бульон или на среду Рапопорта.
Пересеять культуру со среды Рапопорта на среду Эндо.
Из бесцветных колоний на среде Эндо приготовить мазок, окрасить по Граму, промикроскопировать, зарисовать. Пересеять бесцветные колонии на среду Ресселя или скошенный МПА.
Изучить чистоту культуры на среде Ресселя или на скошенном МПА. Произвести посевы на МПА для определения чувствительности культуры к антибиотикам методом бумажных дисков, на среды Гисса или МТС-12Е, на МПБ для определения биохимических и протеолитических свойств.
Произвести реакцию агглютинации на стекле чистой культуры с поливалентными и монорецепторными сыворотками.
Произвести учет «пестрого ряда» или МТС-5 – 12Е (на демонстрационном материале). Учет антибиотикограммы.
Составить протокол бактериологического исследования крови больного с подозрением на брюшной тиф и дать заключение.
Составить схему бактериологического исследования испражнений больного с подозрением на брюшной тиф.
Указания к самостоятельной работе
Бактериологические исследования брюшного тифа на первой неделе заболевания проходят в несколько этапов.
1-й день – 5-10 мл крови, взятой стерильно из вены больного у постели посеять в 50-100 мл желчного бульона или в среду Рапопорта. Посевы поместить в термостат на сутки при температуре 37°С.
Среда Рапопорта состоит из мясо-пептонного бульона, 10% желчи, 2% глюкозы или 1% маннита и 1% индикатора Андреде. При росте S. typhi на среде Рапопорта отмечается помутнение, покраснение, газа нет. При росте . S.paratyphi А и В, среда покраснеет, в результате образования газа всплывает поплавок.
2-й день. Со среды Рапопорта пересевают на среду Эндо и помещают в термостат на сутки при температуре 37°.
3-й день. На среде Эндо вырастают бесцветные колонии (т.к. они лактозу не разлагают), которые пересевают на среду Ресселя для выделения чистой культуры.
4-й день. Производят учет посевов на среде Ресселя, определяют чистоту культуры. На среде Ресселя лактоза не разлагается (среда красная), глюкоза разлагается (среда синяя). Культура чистая. Готовят мазки, красят по Граму, микроскопируют, определяют подвижность. В мазках грамотрицательные палочки средней величины с закругленными концами, подвижные, перитрихи.
С чистой культурой ставят ориентировочную реакцию агглютинации с диагностическими агглютинирующими сыворотками брюшного тифа, паратифов А и В. С сывороткой, давшей положительную реакцию агглютинации, ставят развернутую. Чистую культуру высевают на среды Гисса или МТС-5У для определения биохимических свойств, на мясопептонный бульон – протеолитических свойств, на МПА – для определения чувствительности к антибиотикам и определения отношения к брюшнотифозному бактериофагу.
На средах Гисса разлагаются глюкоза, мальтоза и маннит до кислоты без газа. Лактоза и сахароза не разлагаются. На МПБ выделяется сероводород. Культура чувствительна к определенным антибиотикам и лизируется под действием брюшнотифозного бактериофага. Развернутая реакция агглютинации положительна с сывороткой брюшного тифа.
Таблица 4