Самостоятельная работа

1. Разобрать схему микробиологической диагностики сальмонеллезов.

2. Произвести посев мясного фарша на накопительную среду Мюллера, среду Эндо, солевой агар, селективную среду для выделения протея, Китта-Тароцци.

3. Отобрать лактозонегативные колонии на среде Эндо. Из изолированных колоний приготовить мазок, окрасить по Граму, промикроскопировать.

4. Произвести пересев лактозонегативной изолированной колонии на среду Ресселя или скошенный МПА для выделения чистой культуры.

5. Поставить реакцию агглютинации с чистой культуры и с групповыми и монорецепторными диагностическими сыворотками по схеме Кауфмана – Уайта.

6. Отметить на демонстрационном материале (пестрый ряд) и МТС-12Е биохимические свойства выделенной чистой культуры, учет антибиотикограммы. Определить чувствительность к антибиотикам методом бумажных дисков.

7. Составить протокол и дать заключение.

Указания к самостоятельной работе

Первый этап.

Материал исследования – мясной фарш. Производим посев на элективные питательные среды для разных возбудителей, которые могут вызвать отравление: на среду Киллиана или Мюллера, на кровяной агар, на среду Рапопорта, на скошенный МПА по методу Шукевича в конденсационную воду, на среду Китта-Тароцци. Посевы помещают в термостат на сутки при температуре 37°С.

Второй этап.

На средах Киллиана и Мюллера отмечается помутнение, на среде Рапопорта – помутнение, покраснение; на среде Эндо, Плоскирева, кровяном агаре – выросли бесцветные колонии; на среде Китта-Тароцци и на МПА при посеве по методу Шукевича роста нет.

Поскольку среды Киллиана и Мюллера являются накопительными для сальмонелл, из них производят пересев на среду Ресселя для выделения чистой культуры. Посев помещают в термостат на сутки при температуре 37°С.

Третий этап.

На среде Ресселя лактоза не разлагается – скошенный агар не изменит окраску, глюкоза разлагается – среда синяя. С культурой на среде Ресселя:

а) определяем чистоту культуры – делаем мазки красим по Граму (в мазках грамотрицательные палочки с закругленными концами средней величины);

б) определяем подвижность в «висячей» и «раздавленной» капле;

в) ставим реакцию агглютинации чистой культуры на стекле с групповыми и монорецепторными сыворотками по определению О- и Н-антигенов (по схеме Кауфмана-Уайта).

г) чистую культуру сеем на среды Гисса или МТС-5У – для определения биохимических свойств и на МПБ – протеолитических свойств;

д) определяем чувствительность к антибиотикам;

е) патогенность культуры испытывается пероральным заражением белых мышей.

Бактерионосительство выявляют при профилактическом обследовании работников пищевых блоков и в очаге инфекции. При этом исследуют испражнения, мочу, желчь.

Серологический метод. Антитела в крови переболевших обнаруживаются в реакции агглютинации с соответствующими сальмонеллезными диагностикумами. Положительной считается реакция в титре сыворотки 1:400, ставится также РНГА с эритроцитарными сальмонеллезными диагностикумами.

Таблица 8

Препараты для специфической профилактики и терапии сальмонеллезных инфекций

Препарат	Состав	Назначение
Бактериофаг сальмонеллезный групп А, В, С, Д, Е	Фильтрат фаголизатов паратифа А, паратифа В, тифимуриум, гейдельберг, ньюпорт, инфантис, холера суис, ораниенбург, дублин, энтеритидис, галлинарум, анатум, ньюленд	Для лечения, экстренной профилактики