системные механизмы

191

свидетельствует об отсутствии подобия. Следовательно, изменения ЭКоГ в левых полушариях после правостороннего применения ТЛ и левостороннего НА были подобны, а в правых – не подобны.

В ЭКоГ левых полушарий после левостороннего применения ТЛ и НА статистически значимо положительно коррелировали при Р<0,05 изменения амплитуд бета-2 ритма, а изменения амплитуд тета, дельта и частоты тета ритма также коррелировали положительно, но при Р<0,1. В правом полушарии статистически значимо положительно коррелировали изменения амплитуды при Р<0,05 и частоты при 0,05<Р<0,1 бета-1 ритма и амплитуды дельта ритма при Р<0,05. Квадрат расстояния Маханолобиса между разностными матрицами показателей левых полушарий после левостороннего применения ТЛ и левостороннего НА составлял 1,161 при Р=0,21, а правых 1,41 при Р=0,27. Следовательно, изменения ЭКоГ в левых и правых полушариях после левостороннего применения ТЛ и левостороннего НА статистически значимо не различались.

На основании изложенного можно предположить участие норадренергических механизмов в механизмах действия ТЛ. Причем, по-видимому, учитывая наличие асимметричного действия ТЛ на электрогенез левого и правого полушарий, реализация тиролиберининдуцированных норадренергических механизмов, также, асимметрична и, возможно, более актуализована в левом полушарии.

192

Глава 6 Влияние препарата полифенольной природы «Вин-

Вита» на электрогенез.

6.1. Изучение влияния ПФв в условиях интактного мозга.

Для понимания механизмов электрогенеза определенный интерес представляет исследование влияния препаратов полифенольной природы на ЭКоГ. Нейроны черного вещества содержат пигмент меланин, препарат полифенольной природы, метаболизм которого тесно связан с катехоламинами (В.А. Отеллин, Э.Б. Арушанян, 1989).

Меланины – собирательное название группы высокомолекулярных черных и коричневых пигментов полиароматической природы, образующихся при окислительной полимеризации фенольных соединений. Они являются одним из древнейших соединений на Земле (Bayermann K., 1973) и встречаются среди организмов практически всех эволюционных уровней (Bell A.A., Wheeler M.H., 1986; Barr F.E., 1983). У

высших животных меланины – наиболее распространенная группа пигментов. По Г. Мейсону (Mason, 1959), меланины – это высокомолекулярные полимеры, образующиеся при энзиматическом окислении фенолов, главным образом пирокатехина, 3,4-диоксифенилаланина (ДОФА) и 5,6- диоксииндола.

Фенольные соединения (в т.ч. меланины) выделенные из различных источников (растительных и животных) близки по химической структуре, проявляют удивительное единство свойств и мало различаются по основным физико-химическим показателям, взаимодействуют с одними и теми же ферментами, имеют в своем составе пирокатехиновую конфигурацию атомов

(Hackman R.H., Goldbery M. 1978; Bilinska B., Wilczok T., Vucelic V., 1987. Finkle,1967). Это позволили предположить, что они воздействуют на периферии на одни и те же молекулярные рецепторы.

К числу фенольных соединений выявленных в животных организмах относят ароматические аминокислоты тирозин и триптофан, катехоламины адреналин и норадреналин, а также с определенными допущениями, серотонин и близкие к ним

структурно вещества (токоферол, убихинон, нафтохинон).193 Представителем класса конденсированных фенолов в животном организме является меланин (Барабой, Сутковой, 1997).

Поэтому исследование растительных полифенолов, в какой-то мере может быть полезным для выяснения роли животных полифенолов, например, меланина, являющегося структурным элементов черной субстанции.

Самым активным полифенолом найденном в красном вине является ресвератрол, который содержится в кожице и семенах винограда (Sato M, Ray PS, Maulik G, Maulik N, Engelman RM, Bertelli AA, Bertelli A, Das DK., 2000; Soleas GJ, Diamandis EP, Goldberg DM.,1997; Goldberg D, Tsang E, Karumanchiri A, Diamandis E, Soleas G, Ng E: 1996; Celotti E, Ferrarini R, Zironi R, Conte LS., 1996). Антиоксидантные свойства красного вина связаны в основном с ресвератролом и обусловлены выявленной у него способностью ингибировать свободнорадикальное окисление – ведущий патофизиологический механизм деструкции клеточных мембран

игибели клеток при разнообразной патологии, являющейся общим звеном самых разнообразных форм физиологических напряжений и заболеваний (Барабой В.А., 1989, 1990, 1991;

Барабой В.А., Орел В.Э., Карнаух И.М., 1991; Ames B.N., 1983;

Yeagle Ph.L., 1989).

Механизм действия растительных полифенолов изучен недостаточно и в настоящее время интенсивно исследуются. В течение последних 10 лет опубликовано 900 работ, в которых исследуются механизмы действия полифенолов и ресвератрола, в том числе. Наиболее удивительной является способность расверотрола оказывать полипрофильное действие на различные функциональные системы.

Вкрасных винах содержится около 7 мг/л расвератрола

(Ribeiro de Lima M.T., Waffo-Teguo P., Teissedre PL., Pujolas A., Vercauteren J., Cabanis J.C., Merillon J.M. 1999; Wallerath T., Deckert G., Ternes T., Anderson H., Li. H., Witte K., Forstermann U. 2002), что для нейтрализации сободных радикалов явно недостаточно. Согласно гипотезе Sylvain Doré (2004) гистопротективные свойства ресвератрола обусловлены его информационным действием, формирующим уникальный каскад внутриклеточных событий, ведущих к модуляции белков

игенов.

Наиболее вероятным кандидатом, в качестве вероятной194 цели для ресвератрол-модуляции является Heme-oxygenase (HO). Показано, что ресвератрол является мощным индуктором

HO и цитопротекции (Zhuang H, Kim YS, Koehler RC, Doré S.,

2003). Выявлены также нейропротективные эффекты НО (Doré S,. 2002). Кроме того, HO и его метаболиты обладают антиапаптотическим и вазодилататорным эффектами. Ресвератрол обладает уникальным эффектом протектировать гибель нервных клеток. Это, в свою очередь, обуславливает его терапевтическую эффективность при многих острых и/или хронических формах патологии ЦНС (Kiziltepe U., Turan N.N., Han U., Ulus A.T., Akar F., 2004; Wang Y.J, He F., Li X.L.: 2003; Virgili M., Contestabile A., 2000). Экспериментальными исследованиями в модельных экспериментах выявлено, что полифенолы повышают резистентность нервных клеток. В экспериментах на крысах выявлена способность ресвератрола уменьшать размер инфаркта вследствие мозговой ишемии

(Huang S.S., Tsai M.C., Chih C.L., Hung L.M., Tsai S.K., 2001; Sinha K., Chaudhary G., Gupta Y.K., 2002). Выявлено противоэдематозное действием в отношении головного мозга

(Wang Y.J., He F., Li X.L., 2003).

Достаточно подробно исследовано противосудорожные эффекты ресвератрола базирующиеся на его антиоксидантном действии. Его примененный в дозе 20, 50, 80 мг/кг интраперитенеально дозазависимо уменьшало судороги сформированные введением пентелентетразола (60 мг/кг интраперитонеально) у крыс. Также ресвератрол потенцировал противосудорожные эффекты натрия вальпроата (150 мг/кг) и диазепама (2 мг/кг) на модели генерализованной тоникоклонической эпилепсии сформированной введением пентелентетразола. Совместное с ресвератролом введение аденозина (500 мг/кг) потенцировало противосудорожное действие ресвератрола. Кроме того, неспецифический антагонист рецептора аденозина теофиллин (50 мг/кг интраперитонеально) значительно подавлял противосудорожный эффект ресвератрола. Специфический антагонист рецептора аденозина 3,7-диметил-1- пропаргилксантин (1 мг/кг интраперитонеально) не полностью подавлял противосудорожный эффект ресвератрола. Полученные результаты свидетельствуют о наличии

противоэпилептического эффекта у ресвератрола, который195 возможно, реализуется использованием аденозинэргического механизма. (Gupta Y.K,Chaudhary G, Srivastava A.K. 2002).

6.1.1. Изучение влияния ПФв на показатели ЭКоГ.

Влияние ПФв исследовали в 7 опытах. Водный раствор вводили в дозе 10 мг антоцианов на кг массы тела животного. ЭКоГ регистрировали непрерывно в течении тридцати минут до и после введения.

До введения ПФв в ЭКоГ крысы (рис. 6.1., А,) эпизоды

1

2

3

4

А

Б

В	Г
Рис. 6.1. Влияние ПФв	на ЭКоГ крысы.

А - до ПФв. Б – 2, 5 минуты после введения ПФв, В – 7 минут после введения ПФв, Г – 30 минут после введения ПФв.

Обозначения: 1 – отведение лоб-затылок левого полушария, 2 – отведение лоб-затылок правого полушария, 3 – отведение левый лоб-правый ло, 4 – отведение левый затылокправый затылок. Калибровка 435 мкВ. Отметка времени 2 с.

синхронизации сменялись эпизодами десинхронизации, т.е. тип ЭКоГ являлся синхронизированно-десинхронизированным. После введения ПФв (рис. 6.1, Б, В, Г) произошла реорганизация ЭКоГ во всех отведениях, эпизоды синхронизации были редки и недлительны, и в основном, регистрировались эпизоды десинхронизации.

Цифровой анализ ЭКоГ производили в двух вариантах: в

условиях несегментированной и сегментированной ЭКоГ.196 Данная схема исследований была избрана для того чтобы оценить эффективность применения сегментации в выявлении биологического действия ПФв.

Цифровой анализ несегментированной ЭКоГ левого и правого полушарий до и после введения ПФв.

Физиологическое действие ПФв на показатели ЭКоГ состояло в уменьшении амплитуд ритмов, как левого, так и правого полушарий (табл. 6.1, рис. 6.2, 6.3), которое сохранялось в течение тридцатиминутного периода наблюдения. Следует отметить, что уменьшение бета – 1, альфа, тета и дельта ритмов в обоих полушариях наблюдалось практически сразу после применения ПФв, а изменения амплитуды бета – 2 ритма возникли только через 25 минут после внутрибрюшинного введения ПФв. При этом амплитуда бета – 2 ритма левого полушария уменьшилась, а правого – увеличилась. К 10 минуте наблюдения в левом полушарии статистически значимо уменьшенной определялась только амплитуда альфа ритма. Изменения частоты генерации ритмов ЭКоГ, ее уменьшение, отмечались только в первый пятиминутный период после применения ПФв и к 25 и 30 минутам наблюдения.

За тридцатиминутный период наблюдения после введения ПФв наиболее часто определялось уменьшение индекса длительности альфа ритма. Только в первую пятиминутку наблюдения уменьшения длительности индексов длительности альфа ритма определялось в обоих полушариях. В остальные периоды наблюдения - попеременно то в левом, то правом полушарии. Индекс длительности бета – 1 ритма после применения ПФв определялся увеличенным (к 10, 25 и 30 минутам наблюдения).

Цифровой анализ сегментированной ЭКоГ левого и правого полушарий до и после введения ПФв. До введения ПФв в левом полушарии ЭКоГ крысы периоды синхронизации составляли 20,53% от общего времени регистрации, а в правом полушарии - 14,9%.

В ЭКоГ левого полушария во фрагментах синхронизации до введения ПФв (таб. 6.2., рис. 6.4) амплитуды бета-1, альфа, тета и дельта ритмов определялись большими, а частоты альфа и тета ритмов ЭКоГ меньшим, чем во фрагментах десинхронизации. Частота дельта ритма определялась большей

во фрагментах синхронизации, чем десинхронизации.197 Индексы длительности бета-2, альфа и тета ритмов определялась меньшими, а индекс длительности дельта ритма – большим во фрагментах синхронизации, чем десинхронизации.

300
250
200
мкВ 150
100
50
0
5	10	15	20	25	30	35	40	45	50	55	60
					время (мин)
SB2A		SB2Ak		SB1A			SB1Ak		SAA
SAAk		STA		STAk			SDA		SDAk

Рис. 6.2. Динамика амплитуд ритмов ЭКоГ левого полушария до (5-30 мин) и после (35-60 мин) введения ПФв.

Обозначения: SB2A – амплитуда бета-2-ритма, SB1Aамплитуда бета-1 ритма, SAA – амплитуда альфа ритма, STA – амплитуда тета ритма, SDA – амплитуда дельта ритма. обозначения амплитуд с буквой k отражают базовую величину сравнения – среднюю величину за 30-ти минутный период до введения препарата.

В правом полушарии до введения ПФв амплитуды бета-1, альфа, тета и дельта ритмов ЭКоГ определялись большими, во

198

	350
	300
	250
мкВ	200
	150
	100
	50
	0
	5	10	15	20	25	30	35	40	45	50	55	60
					время (мин)

DB2A	DB2Ak	DB1A	DB1Ak	DAA
DAAk	DTA	DTAk	DDA	DDAk

Рис.6.3. Динамика амплитуд ритмов ЭКоГ правого полушария до (5-30 мин) и после (35-60 мин) введения ПФв.

Обозначения: DB2A – амплитуда бета-2-ритма, DB1Aамплитуда бета-1 ритма, DAA – амплитуда альфа ритма, DTA – амплитуда тета ритма, DDA – амплитуда дельта ритма. обозначения амплитуд с буквой k отражают базовую величину сравнения – среднюю величину за 30-ти минутный период до введения препарата.

бета-1 и дельта ритмов ЭКоГ большими во фрагментах синхронизации.

После введения ПФв в левом полушарии ЭКоГ крысы периоды синхронизации составляли 19,42% от общего времени регистрации, а в правом полушарии - 14,43%, т.е. уменьшилось на 4,99%, по сравнению с периодом до введения препарата.

Во фрагментах синхронизации ЭКоГ левого полушария после введения ПФв амплитуды бета-2, тета и дельта ритмов ЭКоГ определялись большими, а амплитуда альфа ритма

																	А																				199
300
							мкВ
250
200
																																										δ
150																															θ
100
																						α
50					β2								β1
0

1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4

Б

300
						мкВ
250
200
150
																						α												θ												δ
100					β2								β1
50
0
		1 2 3 4							1 2 3 4									1 2 3 4								1 2 3 4												1 2 3 4

Рис. 6.4. Диаграммы средних амплитуд ритмов 2-, 1-, -, -, и-ЭКоГ, отводимой от левого (А) и правого (Б) полушарий до (1, 2) и после внутрибрюшинного введения ПФр (3, 4), в пределах сегментов десинхронизации (1, 3) и синхронизации (2, 4).

меньшей, чем во фрагментах десинхронизации. Частоты альфа и тета ритмов определялись меньшими, а бета-2 ритма большей во фрагментах синхронизации, чем десинхронизации. Индексы длительности бета-1, альфа и тета ритмов определялись

меньшими, а дельта ритма большим во фрагментах200 синхронизации, чем десинхронизации.

Во фрагментах синхронизации ЭКоГ правого полушария после введения ПФв амплитуды бета-1, альфа, тета дельта ритмов ЭКоГ определялись большими, чем во фрагментах десинхронизации. Частоты бета-2, альфа, тета и дельта ритмов ЭКоГ во фрагментах синхронизации определялась меньшей, чем во фрагментах десинхронизации. Индексы длительности бета-2, альфа и тета ритмов ЭКоГ определялись меньшими, а дельта ритма – большим во фрагментах синхронизации, чем десинхронизации.

Во фрагментах десинхронизации левого полушария после введения ПФв, по сравнению с аналогичными фрагментами, до введения препарата амплитуды бета-1, альфа, тета и дельта ритмов ЭКоГ определялись меньшими. После введения ПФв частоты бета-2, бета-1 и дельта ритмов определялись большими, а частота тета ритма – меньшей. Индексы длительности бета-2, бета-1 и дельта ритмов после введения ПФв определялись большими.

Во фрагментах десинхронизации правого полушария после введения ПФв, по сравнению с аналогичными фрагментами, до введения препарата амплитуды бета-1, альфа, тета и дельта ритмов ЭКоГ определялись меньшими, а амплитуда бета-2 ритма – большей. Частоты бета-2 и дельта ритмов ЭКоГ после введения препарата определялись большими, чем до введения. Индексы длительности бета-2 и дельта ритмов определялись большими, а индекс длительности тета ритма – меньшим, после введения препарата.

Во фрагментах синхронизации левого полушария после введения ПФв, амплитуды бета-1, альфа, тета и дельта ритма определялись меньшими, чем в аналогичных фрагментах до введения препарата. Частоты альфа и тета ритмов ЭКоГ после введения препарата определялись меньшими, а частота бета-2 определялась большей после введения препарата. Индексы длительности альфа и тета ритмов ЭКоГ определялись меньшими, а бета-2 и дельта ритма – большими, во фрагментах синхронизации после введения препарата.

Во фрагментах синхронизации правого полушария после введения ПФв амплитуды бета-1, альфа, тета и дельта ритмов ЭКоГ определялись меньшими, чем в аналогичных фрагментах