Акт об отборе пробы воды для микробиологического исследования

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

______________________________________________________________

Задание 4. . Приготовить 10-кратные разведения исследуемой водопроводной воды. С целью определения ОМЧ произвести посев исследуемых проб воды и полученных разведений в расплавленный МПА.

Задание 5. Изучить метод определения общих и термотолерантных колиформных бактерий в воде и почве методом мембранных фильтров.

Этапы определения окб и ткб воды методом мембранной фильтрации:

1. Подготовка фильтровального аппарата Зейтца: стерилизация; закрепление стерильного мембранного фильтра; присоединение фильтровального аппарата к вакуум-насосу (разрежение 0,5-1,0 атм.).

2. выбор рекомендуемого для посева объёма исследуемой воды :

Рекомендуемые посевные объёмы воды для определения ОКБ и ТКБ методом мембранной фильтрации

Тип исследуемой воды	Рекомендуемый для посева объём исследуемой воды.мл	Примечания
Питьевая вода	100	Анализируют три объема по 100 мл; при получении стабильных отрицательных результатов допустима фильтрация зоо мл воды через 1 фильтр
Чистая вода водоёмов, не загрязняемых сточными жидкостями	100; 50; 10; 1
Вода водоёмов, загрязняемых сточными жидкостями	10; 1; 0,1; 0,01

3. фильтрация; (при посевах объёмов 1 мл и меньше их разводят в 10 мл стерильной водопроводной воды, а затем фильтруют);

4. перенос мембранных фильтров на поверхность среды Эндо в чашках Петри;

5. инкубация 24 ч при 37-38^оС;

6. учёт микробного роста на мембранных фильтрах в чашках Петри.

7. проведение оксидазного теста подозрительных колоний;

8. окраска по Граму мазков из подозрительных колоний и микроскопирование;

9. пересев колоний ОКБ на 2 пробирки с лактозопептонной средой;

10. инкубация пересевов при двух режимах: 1 пробирка – при 44^оС (для подтверждения наличия ТКБ); 2-я пробирка – при 37^оС (для подтверждения наличия ОКБ).

11. Ответ.

Задание 6. Дорисовать графическую схему исследования воды на ОКБ и ТКБ методом мембранных фильтров, сделать подписи.

Задание 7. Изучить метод определения общих и термотолерантных колиформных бактерий в воде и почве титрационным (бродильным) методом.

Перечислить этапы определения ОКБ и ТКБ воды этим методом:

1.__________________________________________________________________________________________________________________________________

2.__________________________________________________________________________________________________________________________________3.__________________________________________________________________________________________________________________________________

4.__________________________________________________________________________________________________________________________________

5.__________________________________________________________________________________________________________________________________

6.__________________________________________________________________________________________________________________________________

7._________________________________________________________________________________________________________________________________

8.__________________________________________________________________________________________________________________________________9.__________________________________________________________________________________________________________________________________

10._________________________________________________________________________________________________________________________________

Задание 8. Произвести посев 100,0 и 10,0 мл исследуемой воды во флаконы и пробирки соответственно в 10,0 и 1,0 мл концентрированной лактозопептонной среды; посев 1,0 мл исследуемой воды – в пробирку с 10,0 мл лактозопептонной среды нормальной концентрации.

100,0 мл 10,0 мл 1,0 мл

10 мл конц.ЛКП 1,0 мл конц. ЛКП 10,0 мл ЛКП

Б) Посевы поставить в термостат для инкубации при 37-38^оС в течение 24 ч.

В) Из подготовленных пробирок с забродившей ЛКП (с помутнением и газом) сделать пересевы бактериологической петлёй на поверхность среды Эндо, разделенной на 3-4 сектора. Поставить посевы в термостат для инкубации.

Задание 9. Дополнить фразы:

А)общепринятый дополнительный показатель фекального загрязнения воды: __________________________________________________________________

Б) Показатель степени опасности воды в отношении развития заболеваний кожных покровов и верхних дыхательных путей в плавательных бассейнах - _________________________________________________________________

В).Косвенный показатель возможного присутствия энтеровирусов в исследуемой пробе воды _________________________________________________________________

Г) Чаще всего по эпидемиологическим показаниям воду исследуют на наличие патогенных микроорганизмов – возбудителей кишечных инфекций: ____________________________________________________________________________________________________________________________________

Задание 10. Решить ситуационные задачи.

1. Студент отбирает пробу воды из городского водопровода. Он обжёг кран при помощи тампона, смоченного в спирте, снял пробку с флакона вместе с бумажным колпачком. Затем он открыл кран, заполнил водой флакон и закупорил его стерильной корковой пробкой. Найдите ошибку.

Ответ: __________________________________________________________________

2. Студент отобрал пробы питьевой водопроводной воды в 11 ч. В лабораторию пробы были доставлены в 13 ч. Можно ли проводить исследование этих проб?

Ответ:

__________________________________________________________________

3. Необходимо отобрать пробы хлорированной водопроводной воды и нехлорированной воды из артезианской скважины. Чем будет отличаться подготовка к отбору этих проб?

Ответ:

4. При исследовании питьевой воды на ОКБ и ТКБ титрационным методом в среде ЛПС не было выявлено ни помутнения, ни газообразования. Ход Ваших дальнейших действий?

Ответ: _________________________________________________________________

5. На ЛПС через сутки после посева пробы воды отмечалось кислото- и газообразование. При пересеве на среде Эндо через 24 ч образовались лактозонегативные колонии. Как можно объяснить это противоречие? Относятся ли выросшие колонии к БГКП? ОКБ? ТКБ?

Ответ: ___________________________________________________________

Дата_____________________________________________________________

Подпись преподавателя_____________________________________________