Культуральные свойства энтерококков при росте на селективно-диагностических средах

Питательная среда	Цвет среды до посева	Внешний вид колоний E. faecalis, E.faecium
Сланеца и Бертли (энтерококк-агар)
Канамицин-азидно-эскулиновый агар
Щелочно-полимиксиновая среда по Калине
Молочно-ингибиторная среда

Задание 8. Заполнить таблицу: Дифференциация энтерококков, стрептококков и пневмококков по биохимическим свойствам:

Признаки	Энтерококки	Стрептококки	Пневмо­кокки
Гемолиз_________________________ Лизис 10%-й желчью______________ Рост на среде с 40% желчи_________ Рост на среде с 6,5% NaCl__________ Редукция метиленового синего______ Терморезистентность при 60^0С 30 мин Ферментация: Раффинозы____________________ Сорбита_______________________ Маннита______________________	______________________________________________________________________________________________________________	________________________________________________________________________________________________________________________	________________________________________________________________________________________________________________________

Задание 9. Составить схему выявления гемолитических стрептококков при санитарно-микробиологических исследованиях:

Схема выявления гемолитических стрептококков при

санитарно-микробиологических исследованиях

1-й этап исследования

_________________________________________________________________

2-й этап исследования

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

3-й этап исследования:

При необходимости – дифференциация и идентификация стрептококков:

________________________________________________________________

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

Задание 10. Изучить демонстрацию определения плазмокоагулирующей активности S.aureus в реакции с цитратной плазмой кролика. Схематически зарисовать положительный и отрицательный результат.Реакция плазмокоагуляции S.aureus:

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Задание 11. Составить схему выявления коагулазоположительных стафилококков и Staphylococcus aureus при сан.итарно-микр.обиологических исследованиях:

Схема выявления коагулазоположительных стафилококков и

Staphylococcus aureus при санитарно-микробиологических

исследованиях (c обогащением)

1-й этап исследования:

Первичный посев в жидкую среду накопления _________________________________________________________________

_________________________________________________________________

_____________________________________________________________

2-й этап исследования:

Пересев на селективную агаризованную среду для стафилококков

________________________________________________________________

________________________________________________________________ ________________________________________________________________

________________________________________________________________

________________________________________________________________

3-й этап исследования:

Подтверждение принадлежности к коагулазоположительным стафилококкам

_______________________________________________________________ _______________________________________________________________ _____________________________________________________________

4-й этап исследования:

При необходимости – подтверждение принадлежности к виду S.aureus

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Задание 12. Дать характеристику колоний S.aureus на плотных селективно-

диагностических средах, заполнив таблицу:

Рост Staphylococcus aureus на плотных питательных средах

Питательная среда	Селективная добавка	Характеристика колоний S.aureus

Задание 15. Решить ситуационные задачи.

1. При санитарно-микробиологическом исследовании скорлупы яиц

выделены Гр+ микроорганизмы кокковидной формы, не обладающие ката

лазной активностью, обесцвечивающие метиленовое молоко и растущие на

среде с 40% желчи. Можно ли утверждать, что это энтерококки?

Ответ:______________________________________________________________________________________________________

2. При санитарно-микробиологическом исследовании воздуха помещения на кровяном агаре обнаружен рост мелких, блестящих, росинчатых колоний, вокруг которых появилась зона прозрачного гемолиза. Можно ли утверждать, что это гемолитические стрептококки?

Ответ:

__________________________________________________________________

3. При росте на ЖСА вокруг некоторых колоний микроорганизмов появились зоны помутнения с радужным блеском. Что это означает?

Ответ:____________________________________________________________

4. После длительного хранения в условиях лаборатории коагулазоположительная культура S.aureus была тестирована в реакции плазмокоагуляции. Результат – отрицательный. Почему это могло произойти?

Ответ:_________________________________________________________

5. При постановке реакции плазмокоагуляции спустя 18 ч инкубирования цитратная плазма кролика приобрела желеобразную консистенцию. Однако после встряхивания пробирки и её наклона наблюдается перемещение и вытекание плазмы. Можно ли считать реакцию плазмокоагуляции положительной?

Ответ:_____________________________________________________________

Дата_____________________________________________________________

Подпись преподавателя______________________________________________

Лабораторно-практическое занятие № 5

ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ СПМО: СLOSTRIDIUM РERFRINGENS И БАКТЕРИОФАГОВ

Ц е л ь з а н я т и я:

Изучить биологические свойства СПМО: Cl.perfringens и бактериофагов; освоить методы выделения, идентификации и учета Cl.perfringens и бактериофагов при санитарно-микробиологических исследованиях.

Задание 1. Индикатором какого загрязнения являются Cl.perfringens?

Задание 2. Что означает понятие – «сульфитредуцирующие клостридии»?

________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Задание 3. Составить схему выявления сульфитредуцирующих клостридий и Clostrisium perfringens при санитарно-микробиологических исследованиях:

Схема выявления сульфитредуцирующих клостридий и Clostrisium perfringens при санитарно-микробиологических исследованиях 1-й этап исследования: Первичный посев в вязкую элективную среду _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ 2-й этап исследования: Пересев на плотную селективно-диагностическую агаризованную среду ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ ________________________________________________________________ Условия культивирования !_______________________________________ 3-й этап исследования: Подтверждение принадлежности к сульфитредуцирующим клостридиям _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ 4-й этап исследования: При необходимости – подтверждение принадлежности к виду Cl.perfringens ___________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Задание 4. Изучить рост сульфитредуцирующих клостридий в глубине вязкой элективной среды и при глубинном посеве в агаризованной среде. Изучить характер роста Cl.perfringens в лакмусовом молоке и на среде Китта-Тароцци. Сделать рисунки.

______________ ______________ _______________ ____________________

______________ ______________ _______________ ____________________

______________ ______________ _______________ ____________________

______________ ______________ _______________ ____________________

З адание 5.Изготовить мазок из культуры сульфитредуцирующих клостридий с вязкой железосульфитной среды или со среды Китта-Тароцци с помощью пастеровской пипетки. Необходимо учесть особенности работы с культурой, полученной на среде под вазелиновым маслом или голодным агаром. Изучить морфологические свойства культуры Сl.perfringens в мазках, окрашенных по Граму. Сделать рисунки.

Задание 6. Индикатором какого загрязнения являются коли-фаги?

__________________________________________________________________

БОЕ-это______________________________________________________

__________________________________________________________________

«негативные колонии» - это _______________________________________

__________________________________________________________________

Задание 7. Для освоения методики выявления коли-фагов произвести смыв авирулентной культуры E.coli со скошенного агара 5 см³ 0,9%-м раствором хлорида натрия. По стандарту мутности приготовить взвесь E.coli в концентрации 10⁹ бактериальных клеток в 1 см³.

Задание 8. Произвести глубинный посев полученной суспензии E.coli в расплавленный МПА.

Задание 9. Решить ситуационные задачи.

1. Студент приготовил на стекле мазок из культуры Cl.perfringens со среды Китта-Тароцци. Однако при окраске мазка возникли трудности, так как на поверхности стекла оказалось много вазелинового масла. Какую ошибку допустил студент?

Ответ:

____________________________________________________________

2. Студент приготовил мазок из чёрной колонии с плотной железосульфит

ной среды и окрасил его по Граму и по Трухильо (на спору). При микроскопии были обнаружены крупные толстые грамположительные палочки с закруглёнными концами, расположенные одиночно или штакетообразно, но эндоспоры не выявлены. Есть ли основания предполагать, что культура не принадлежит к сульфитредуцирующим клостридиям?

Ответ:

______________________________________________________________

3. При исследовании почвы на наличие Cl.perfringens посев проб сделали на молоко без добавления лакмуса. Можно ли выявить рост Cl.perfringens? если соблюдать все остальные условия постановки «энтеритного» теста?

Ответ:

______________________________________________________________

4. При исследовании сточной воды на коли-фаги после инкубации МПА со смесью пробы исследуемой воды и эталонной культуры E.coli микробного роста на поверхности и в глубине МПА не выявлено, хотя в контрольной чашке Петри наблюдается сплошной рост культуры кишечной палочки. С чем это может быть связано?

Ответ:

5. При исследовании пробы воды на коли-фаги в опытной чашке Петри со смесью пробы воды и эталонной культуры E.coli, и в контроле (без пробы воды) наблюдается сплошной сливной рост культуры кишечной палочки? Что это означает?

Ответ:

__________________________________________________________________

Дата_____________________________________________________________

Подпись преподавателя_____________________________________________