6. Реакция на остаток аминокислоты в ампициллине.

а) 0,02 г ампициллина натриевой соли растворяют в 2 мл воды, прибавляют 1 мл свежеприготовленного 0,25% раствора нингидрина и кипятят в течение 2-3 минут. Появляется вишневое окрашивание.

Записывают уравнение реакции.

б) 0,02 г ампициллина растворяют в 2 мл воды и прибавляют несколько капель реактива Фелинга. Появляется фиолетовое окрашивание.

8

7. Реакция с реактивом Марки на феноксиметилпенициллин. К 0,01 г феноксиметилпенициллина добавляют 0,5 мл свежеприготовленного реактива Марки (2 капли раствора формальдегида в 0,5 мл концентрированной серной кислоты). Появляется красное окрашивание. При нагревании наблюдается углубление окраски.

Задание 2. Спектрофотометрический анализ

1. Определение спектра поглощения препаратов

Готовят 0,18% раствор бензилпенициллина натриевой (калиевой) соли в воде или 0,02% раствор феноксиметилпенициллина в 0,04% растворе натрия гидрокарбоната и снимают спектр поглощения в диапазоне длин волн 220-400 нм на спектрофотометре. На миллиметровой бумаге вычерчивают спектральную кривую в координатах оптическая плотность – длина волны и отмечают λ_max.

2. Определение разности или отношения оптических плотностей растворов пенициллинов. Для бензилпенициллина натриевой (калиевой) соли находят разность между оптической плотностью при длинах волн 263 и 280 нм (D₂₆₃ –D₂₈₀>>0,72). Для феноксиметилпенициллина находят отношение оптических плотностейпри 268 и 274 нм, которое должно быть равно 1,21-1,24.

Задание 3. Испытание на доброкачественность

1. Прозрачность и цветность раствора. Готовят 3% раствор бензилпенициллина натриевой (калиевой) соли в воде для инъекций. Раствор должен быть прозрачным и бесцветным в течение 24 часов при температуре не выше 10 °С.

2. Кислотность и щелочность. Готовят 2% водный раствор бензилпенициллина натриевой (калиевой) соли и измеряют рН полученного раствора при помощи рН-метра. Значение рН должно быть равно 5,5-7,5.

Задание 4. Количественное определение суммы пенициллинов на примере бензилпенициллина натриевой соли

Около 0,06-0,08 г препарата (точная навеска) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 5 мл раствора переносят (мерной пипеткой) в коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 250 мл, прибавляют 2 мл 1 н. раствора натрия гидроксида и оставляют на 20 мин. После этого к смеси прибавляют 2 мл 1 н. раствора кислоты хлористоводородной, 5 мл 0,3 М ацетатного буфера (рН 4,50 ± 0,05), 20 мл 0,01 н. раствора йода (берут мерной пипеткой) и оставляют на 20 минут в темном месте.

Титруют 0,01 н. раствором натрия тиосульфата до слабо-желтого цвета, затем прибавляют раствор крахмала (0,5-1,0 мл) и титруют до обесцвечивания.

В контрольной пробе в колбу вносят 5 мл раствора пенициллина (берут мерной пипеткой), прибавляют 5 мл 0,3 М ацетатного буферного раствора, 20 мл 0,01 н. раствора йода (берут мерной пипеткой) и оставляют на 20 минут в темном месте, после чего титруют 0,01 н. раствором натрия тиосульфата, как описано выше. Разность объемов, затраченных титрованных растворов, соответствует содержанию суммы пенициллинов в препарате.

Содержание (%) суммы пенициллинов в препарате вычисляют по формуле:

X = (V₁ – V₂) ^х K ^х T ^х 100 ^х 100 / m ^х 5

9

где V₁ – объем 0,01 н. раствора натрия тиосульфата, израсходованный при контрольном титровании; V₂ – объем 0,01 н. раствора натрия тиосульфата, израсходованный при опытном титровании; К – коэффициент поправки 0,01 н. раствора натрия тиосульфата; Т – коэффициент пересчета или масса стандартного образца натриевой соли бензилпенициллина или феноксиметилпенициллина с учетом температуры, прореагировавшая с 1 мл титранта (титр).