Фізіолого-біохімічні ознаки

По відношеню до кисню E.coli М17/рColap є факультативний аероб, тобто може переключатися з дихання (у присутності кисню) та бродіння (за його відсутності).

E.coli не розріджують желатину, згортають молоко, вуглеводи розщеплюють до кистот і газу, ацетоїн не утворюють, утворюють індол, відновлюють нітрати до нітритів.Мають високу ферментативну активність відносно лактози, глюкози й інших цукрів, а такожспиртів. Володіють оксидазною активністю [12].

По відношенню до температури – мезофіл, тобто мікроорганізм для якого температурний оптимум в межах 20-42 °С. Оптимальна температура для росту E.сoli є 37 °С. Ця бактерія має широкі температурні межі, тобто є евритермним мікроорганізмом [12].

Найкраще росте в середовищах, де значення рН близьке до нейтрального 6,8 - 7,2.

За типом живлення є хемоорганогетеротроф. Тобто як джерело енергії – хімічне, донор електронів – органічна речовина, а як джерело вуглецю використовує органічні сполуки.

E.coli є дуже невибагливою культурою і не потребує додаткових факторів росту [12].

Таксономічний статус біологічного агента

• домен Bactria;

• відділ Proteobacteria;

• клас Gammaproteobacteria;

• порядок Enterobacteriales;

• родина Enterobacteriaceae;

• рід Escherichia;

вид Escherichia coli 12.

Розділ 5. Обґрунтування вибору поживного середовища і його перевірочний розрахунок

Для одержання Колібактерину використовують штам E.coli M-17/рColap, якому властива антагоністична активність щодо широкого спектра патогенних та умовно патогенних мікроорганізмів.

Поживні середовища, на яких вирощують мікроорганізми, повинні відповідати таким мінімальним вимогам: у них мають бути всі елементи, з яких будується клітина, причому в такій формі, в якій мікроорганізми здатні їх засвоювати [12].

Існує 3 поживні середовища для культивування Е. coli М 17/рColap наведені в табл.5.1.

Таблиця 5.1

Порівняльна таблиця вартості компонентів поживного середовища

№	Компонент середовища		Кількість компонента г/л		Вартість компонента грн./кг		Вартість компонента ПС грн.г/л
1	2		3		4		5
Казеїновий бульйон [10].
1	пептон		15		300		4,50
2	K2HPO4		0,5		100		0,05
3	NaH2PO4		0,5		25		25
4	NaCl		0,5		100		0,05
Рідкі компоненти мл/л
5	казеїновий гідролізат		600,0		413		247,8
6	дріжджовий автолізат		200,0		30		6
7	Вода очищена		До 1 л		0,30		0,30
Загальна кількість витрат за 1 л поживного середовища 283,7
Казеїново-дріжджове середовище [10].
1		Дріжджовий автолізат		25		30		0,75
2		Панкреатичний гідролізат казеїну		21		489,6		10

Продовж. табл.3.1
1		2		3		4		5
3		Вода очищена		До 1 л		0,30		0,30
Загальна кількість витрат за 1 л поживного середовища 11,05
Поживне середовище [13].
1	(NH4)2SO4		5		1,98		0,007
2	КН2РO4		13		150		1,95
3	Na2HPO4		13		25		0,4
4	MgCl2		3		5,20		0,02
5	CaCl2		0,3		7		0,002
6	Дріжджі		10		15		0,15
7	Соя		10		7		0,07
8	Глюкоза		5		8		0,04
9	Вода очищена		до 1 л		0,30		0,30
Загальна кількість витрат за 1 л поживного середовища 2,95

Розрахунок коштів 1л поживного середовища казеїнового бульйону:

1. Пептон 15 г – Х грн.

1000 г – 300 грн

Х = 15 * 300 / 1000 =4,50 грн

2. К₂НРО₄ 0,5 г – Х грн.

1000 г – 100 грн

Х = 0,5 * 100 / 1000 = 0,05 грн

3. NaH₂PO₄ 0,5 г – Х грн

1000 г – 25 грн

Х = 0,5 * 25 / 1000 = 0,0125 грн

4. NaС1 0,5 г – Х грн

1000 г – 100 грн

Х = 0,5 * 100 / 1000 = 0,05 грн

5. Казеїновий гідролізат 600 мл – Х грн.

1000 мл – 413 грн

Х = 600 * 413 / 1000 = 247,8 грн

6. Дріжджовий автолізат 200 мл – Х грн.

1000 мл – 30 грн

Х = 200 * 30 / 1000 = 6 грн

Отже, для приготування 1 л даного середовища підприємство затратить 283,7 грн.

Розрахунок коштів 1л поживного середовища казеїново-дріжджового середовища:

1. Дріжджовий автолізат

25 г – Х грн.

1000 мл – 30 грн

Х = 25 * 30 / 1000 = 0,75 грн

2. Панкреатичний гідролізат казеїну

21 г – Х грн.

1000 г – 489,6 грн

Х = 21 * 489,6 / 1000 = 10 грн

Отже, для приготування 1 л даного середовища підприємство затратить 11,05 грн.

Також, можливо запропонувати для штаму Е. coli М-17 поживне середовище такого складу:

1. (NH₄)₂SO₄  5 г – Х грн.

1000 г – 1,98

Х = 5 * 1,98 / 1000 = 0,007 грн

2. КН₂РO₄ 13 г – Х грн.

1000 г – 150 грн

Х = 13 * 150 / 1000 = 1,95 грн

3. Na₂HPO₄ 13 г – Х грн.

1000 г – 25 грн

Х = 13 * 25 / 1000 = 0,325 грн

4. MgCl₂ 3 г – Х грн.

1000 г – 5,20 грн

Х = 13 * 5,20 / 1000 = 0,0156 грн

5. CaCl₂ 0,3 г – Х грн.

1000 г – 7 грн

Х = 0,3 * 7 / 1000 = 0,0021 грн

6. Дріжджі 10 г – Х грн.

1000 г – 15 грн

Х = 10 * 15 / 1000 = 0,15 грн

7. Соя 10 г – Х грн.

1000 г – 7 грн

Х = 10 * 7 / 1000 = 0,07 грн

8. Глюкоза 5 г – Х грн.

1000 г – 8 грн

Х = 13 * 150 / 1000 = 0,04 грн

Отже, для приготування 1 л даного середовища підприємство затратить 2,95 грн.

Порівнявши дані три середовища, можемо зробити висновок, що поживне середовище є економічно доцільнішим, та задовільняє всі потреби біологічного агенту.

В наведеному середовищі джерело вуглецю є глюкоза, амонійні солі використовуються як джерело азоту. Додатково використовується солі магнію, соєвий відвар та дріжджі.

Отже, обране середовище є оптимальним для вирощування E.coli.