Литература

1. Maddineni, S. B. Identifying the needs of penile cancer sufferers: A systematic review of the quality of life, psychosexual and psychosocial literature in penile cancer / S. B. Maddineni, M. M. Lau, V. K. Sangar // BMC Urol. — 2009. — Vol. 9. — P. 8–12.

2. European Association of Urology Guidelines on Penile Cancer / E. Solsona [et al.] // Eur Urol. — 2004. — Vol. 46. — P. 1–8.

3. Приказ № 80 от 9 февраля 2007 г. Об утверждении клинических протоколов «Алгоритмы диагностики и лечения больных злокачественными новообразованиями». — Минск, 2007.

4. Epidemiology and natural history of penile cancer / M. R. Pow-Sang [et al.] // Urology. — 2010. — Vol. 76 (2 Suppl. 1). — P. 2–6.

5. Penile cancer: epidemiology, pathogenesis and prevention / M. C. Bleeker [et al.] // World J urol. — 2009. — Vol. 27(2). — P. 141–150.

УДК 612.014.4

Изучение индукции синтеза металлотионеина в печени крыс при внутрижелудочном введении ацетата цинка и хлорида кадмия

Пыхтеева Е. Д.

Научные руководители: к.м.н., доцент Л. Г. Коваленко

д.м.н., профессор Л. М. Шафран

«Одесский национальный медицинский университет»,

«Украинский НИИ медицины транспорта»

г. Одесса, Украина

Введение

Металлотионеин, более 50 лет тому назад обнаруженный и охарактеризованный B. L.Vallee с сотрудниками (1957) транспортер Cd и Zn, оказался представителем уникального семейства многофункциональных белков, которые играют центральную роль в обмене и детоксикации тяжелых металлов и в управлении различными формами стресса. МТН был выделен как белок, связывающий Cd и Zn, и получил свое название в связи с высоким содержанием в нём металлов и серы.

Металлотионеины (МТН) относятся к многофункциональным низкомолекулярным белкам, индукция синтеза которых вызывается многими агентами химической (тяжелые металлы (ТМ), некоторые органические растворители) и физической (переохлаждение, перегревание) природы, а также голодом, психо-эмоциональным стрессом и др. Основная физиологическая роль МТН состоит в обеспечении гомеостаза цинка, транспорта его к местам синтеза цинксодержащих ферментов и регуляции практически всех цинк-зависимых процессов в организме, а также в участии его в атиоксидантной системе в роли регулятора активных форм кислорода и свободно-радикальных процессов за счет согласованного действия окисленных и восстановленных цистеиновых SH-групп (которых в МТН до 30) [1].

Материалы и методы

Работа выполнялась на базе Украинского НИИ медицины транспорта (отдел токсикологии). Эксперимент проведен на белых нелинейных крысах массой 300–350 г, содержавшихся на общевиварном рационе, которые были разделены на 3 группы по 3 животных. Животным первой группы ввели однократно внутрижелудочно ацетат цинка в дозе 50 мг/кг (по металлу), второй — хлорид кадмия в дозе 3,7 мг/кг (по металлу, 1/10 ЛД50). Животным контрольной группы вводили воду, чтобы нивелировать влияние психо-эмоционального стресса на синтез МТН. Животных декапитировали под эфирным наркозом через 48 часов после введения, отбирали печень, в которой определяли интегральное содержание МТН методом замещения кадмием с АЭС-детектированием. Все манипуляции с животными проводили в соответствии с требованиями биоэтики по работе с позвоночными животными.

В литературе описано несколько способов определения содержания металлотионеинов в биологических объектах [2]. Они основаны на том, что в организме МТН всегда стехиометрически связаны с ионами металлов [3]. Группа методов, основанная на полном замещении эссенциальных металлов в МТН другим металлом с более прочным и быстрым связыванием в условиях in vitro (обычно, кадмием или ртутью) с последующим удалением избытка несвязанного металла и количественным высокоточным определением связанного, получила название «заместительных» методов. На первом этапе анализа необходимо удалить из гомогената ткани высокомолекулярные белки, что достаточно легко сделать осаждением 30 % трихлоруксусной кислотой (ТХУ). В дальнейшем осажденные белки удаляются, а вся работа проводится с надосадочной жидкостью, которая содержит низкомолекулярные белки. Используемый метод количественного определения МТН подробно описан в монографии Л. М. Шафрана с соавт. [1]. Время экспозиции низкомолекулярнойфракции гомогената тканей избытком кадмия — 1 час при комнатной температуре.

Результаты исследования

Результаты эксперимента приведены в таблице. При определении концентрации кадмия методом АЭС в спектрах образцов были обнаружены интенсивные пики цинка, что свидетельствует о неполном замещении его кадмием в МТН за 1 час. Были рассчитаны концентрации МТН по кадмию и цинку, исходя из литературных данных о связывании 7 моль металлов на 1 моль МТН.

Таблица 1 — Среднее интегральное содержание МТН (мкмоль/кг) в печени крыс

Введенное вещество	МТН, мкмоль/кг (нмоль/г)
	по кадмию	по цинку	всего
Контроль	1,7	2,4	4,1
Zn(CH3COO)2	3,7	25,4	29,1
CdCl2	10,7	8,1	18,7

Анализ данных, приведенных в таблице, позволяет сделать выводы:

1. Однократное внутрижелудочное введение солей кадмия и цинка в дозе 1/10 ЛД50 вызывает индукцию синтеза металлотионеина в печени для обеспечения активного связывания и элиминирования избытка тяжелых металлов.

2. Соли цинка являются более сильными индукторами синтеза металлотионеинов в условиях эксперимента.