Допустимые уровни микробной обсемененности воздуха помещений некоторых отделений стационара

Место отбора проб	Время отбора проб	Результаты исследований
		Общее количество микробов (КОЕ/м^3)	1 м^3
			На золотистый стафилококк	На грамотри-цательные
Операционный блок	До работы	Не более 100	отсутствие	отсутствие
	После работы	1000	отсутствие	отсутствие
Реанимационное отделение (палаты)	Подготовленные к работе	Не более 1000	Не более 4	отсутствие
Процедурная	До работы	Не более 50	отсутствие	отсутствие
	Во время работы	1000	Не более 1–2	Не более 1–2

После инкубации посева производят расчет микробного числа по формуле:

Количество колоний, выросших на чашке х1000*

Микробное=

число воздуха объем пропущенного воздуха (л)

где * - искомый объем воздуха

ЗАНЯТИЕ 11

ТЕМА. Действие факторов внешней среды на микроорганизмы. Дезинфекция. Стерилизация.

Методические указания к самостоятельной работе

1. Вопросы по теме занятия 11 для самостоятельного изучения их студентами:

1. Что такое стерилизация?

2. Что такое дезинфекция?

3. Чем отличается стерилизация от дезинфекции?

4. Какие методы используются для стерилизации?

5. Какие предметы лучше подвергать стерилизации сухим жаром?

6. Что такое дробная стерилизация? Когда она применяется?

7. Что такое пастеризация и тиндализация, и в каких случаях они применяются?

8. Что такое автоклав?

9. Какой порядок работы с автоклавом?

10.Какие методы контроля качества стерилизации Вам известны?

11.Какова методика бактериологического контроля эффективности стерилизации?

2. Дома студенту необходимо письменно ответить на следующие вопросы (домашняя работа сдается преподавателю на занятии):

1. Понятие дезинфекция (определение)

2. Понятие стерилизация (определение)

3. Практическое использование антимикробных химических веществ (заполнить таблицу 25):

Таблица 25

Вещество	С какой целью используется	Результат действия на микроорганизм	Результат действия на макроорганизм
Фурациллин
Хлорамин
Тетрациклин
Йод

2. Методы стерилизации (заполнить таблицу 26):

Таблица 26

Метод стерилизации	Действующий фактор	Режим стерилизации
Автоклавирование
Сухожаровой шкаф
УФЛ

Справочные и теоретические материалы

Дезинфекция – комплекс мероприятий, направленных на уничтожение патогенных возбудителей на объектах внешней среды и предупреждающих передачу возбудителя от зараженного организма к здоровому. Дезинфекция осуществляется различными методами: физическими, химическими и др. Чаще всего используются химические методы дезинфекции. Химические вещества, используемые для дезинфекции, называются дезинфицирующими. Они должны растворяться в воде, в низких концентрациях уничтожать микробы в короткие сроки, не повреждать обеззараживаемые материалы, не обладать резким неприятным запахом, не оказывать побочного действия на организм человека и животных, не терять активности при хранении и соприкосновении с дезинфицированными материалами.

Дезинфицирующие средства

По механизму действия дезинфицирующие средства делятся на несколько групп:

1) Поверхностно-активные вещества, которые вызывают снижение поверхностного натяжения, что приводит к нарушению функции клеточной стенки и цитоплазматической мембраны, к ним относятся жирные кислоты, мыла, различные детергенты.

2) Фенол, крезол и их производные вызывают коагуляцию микробных белков. Фенол или карболовая кислота представляет собой бесцветные кристаллы, под действием влаги и воздуха приобретающие малиново-красный цвет, с резким характерным запахом. Фенол растворим в воде, спирте, эфире, жирных кислотах. Применяют 3–5% водные растворы карболовой кислоты. Для повышения растворимости фенола в воде готовят эмульсии в присутствии мыла (мыльно-фенольные растворы). Мыло в мыльно-фенольных растворах является средой, подготавливающей почву для действия фенола. На организм человека фенол оказывает выраженное раздражающее действие, хорошо всасывается в кровь, что может привести к общей интоксикации. Используются растворы фенола для дезинфекции стен, предметов обихода, белья, но нельзя дезинфицировать лакированные и полированные поверхности, т.к. от фенола они портятся.

Лизол – жидкость красно-бурого цвета, со специфическим запахом, в воде растворяется в любых пропорциях. Растворы лизола темные, но прозрачные, имеют резко щелочную реакцию, не оставляют пятен и не изменяют цвета ткани. Получают лизол из чистых крезолов обработкой зеленым мылом. В практике применяют 3–10% растворы для дезинфекции помещений, белья, однако лизол и фенол недостаточно эффективны для обеззараживания выделений больных, содержащих значительное количество белковых веществ. К недостаткам лизола относится также его неприятный запах, который долго сохраняется в помещении, одежда и белье также длительно сохраняют запах лизола.

3) Окислители нарушают деятельность ферментов, взаимодействуя с белками. Активными окислителями является хлор, озон. Окисляющими свойствами обладают перекись водорода, йод, марганцевокислый калий. Широко применяются в дезинфекции хлорсодержащие вещества: хлорная известь, хлорамин.

Хлорная известь – белый аморфный порошок с резким запахом хлора, в воде растворяется не полностью. Бактерицидное действие хлорной извести связано с содержанием активного хлора. Хлорная известь, содержащая менее 25% активного хлора, для дезинфекции непригодна. Хлорная известь теряет активный хлор при неправильном хранении в тепле, влажности, на солнечном свету. Хлорную известь применяют в виде сухого порошка для обеззараживания выделений человека и животных или в виде осветленного раствора для орошения, мытья, протирания таких объектов, которые не портятся от раствора хлорной извести. Недостатком хлорной извести является то, что она обесцвечивает ткани и вызывает коррозию металлов. Хлорамин представляет собой кристаллическое вещество белого или желтоватого цвета, содержит 24-28% активного хлора. Хорошо растворяется в воде при комнатной температуре. Для усиления дезинфицирующих свойств к хлорамину добавляют активаторы, в качестве таковых используют аммонийные соединения. Добавление активатора ускоряет выделение активного хлора, поэтому погибают не только вегетативные формы микроорганизмов, но и их споры. В микробиологической практике используют 1–5% растворы хлорамина для обеззараживания неметаллического инструментария, рук, слизистых оболочек. Разрушающее действие хлорамина на ткани выражено слабее, поэтому его применяют для дезинфекции белья.

4) Формалин убивает вегетативные и споровые формы бактерий, блокирует аминогруппы белков микробной клетки и вызывает их денатурацию. Формалин представляет собой 40% водный раствор формальдегида, прозрачная жидкость с резким раздражающим действием. Это действие препятствует широкому применению формалина в практике, растворы формалина применяются для дезинфекции парикмахерских кистей и шерсти.

5) Соли тяжелых металлов (ртути, серебра, золота, свинца и др.) коагулируют белки или оказывают олигодинамическое воздействие. В практике используется сулема (раствор бихлорида ртути 1:1000), азотнокислые хромовокислые соли серебра, коллоидные растворы органических соединений серебра (колларгол, протаргол).

6) Красители (бриллиантовый зеленый, риванол) обладают выраженными бактерицидными свойствами и используются в качестве антисептических средств, а также входят в состав питательных сред для угнетения роста сопутствующей флоры.

В микробиологической практике дезинфекции подвергают отработанный материал (гной, кал, мочу и т.д.) перед сливом его в канализацию, загрязненные материалом или культурами микробов градуированные и пастеровские пипетки, шпатели, предметные и покровные стекла, погружая их в 3% раствор лизола или перекиси водорода. После окончания работы с загрязненным материалом обрабатываются поверхность стола и руки. Поверхность стола обрабатывают 3% раствором лизола. Руки дезинфицируют 1% раствором хлорамина. Для этого ватный шарик или марлевую салфетку смачивают раствором хлорамина, протирают сначала левую кисть, потом правую, а затем моют руки теплой водой с мылом.

Выбор дезинфицирующего средства, его концентрация и экспозиция зависят от свойств микроба и среды, в которой находятся микробы.

Губительное действие ряда физических и химических факторов на микроорганизмы составляют основу асептических и антисептических методов.

Асептика – комплекс мероприятий, направленных на предупреждение заноса в рабочую зону, рану посторонних микробов с тела человека, из воздуха, инструментов и других объектов внешней среды, основанных на физических методах (очистка, герметизация, изоляция).

Антисептика – комплекс мероприятий, направленных на подавление роста и размножения, потенциально опасных для здоровья, микроорганизмов в ране, организма или объектах внешней среды с применением различных обеззараживающих химических веществ. Антисептические вещества должны обладать длительным действием, хорошо переноситься слизистыми оболочками и кожей, хорошо растворяться в липидах и плохо в воде, что препятствует их поступлению внутрь организма. Антисептики относятся к различным классам химических веществ, соединений и могут быть представлены: галоидами – препараты йода, хлора; окислителями – перекись водорода, перманганат калия; щелочами – аммиак, бура; спиртами – этиловый 70%; производными нитрофурана – фурациллин, фуразолидон и другими химическими соединениями. Этими веществами пропитывают материалы медицинского назначения (перевязочные средства, лейкопластыри, материалы для пломбирования зубов), некоторые из них применяются для консервирования пищевых продуктов; борную кислоту, мертиолят, глицерин, фенол используют как консерванты при приготовлении лечебных и диагностических сывороток, вакцин и других препаратов.

Стерилизация – это комплекс мероприятий, направленных на полное уничтожение вегетативных форм микробов и их спор в объектах внешней среды. Стерилизации подвергают инструменты, аппараты, лекарственные препараты, перевязочный материал и белье, питательные среды, растворы, лабораторную посуду. Стерилизацию проводят физическими и химическими методами, а также механическим путем.

Физические методы стерилизации основаны на действии ультрафиолетовых лучей, применении высокой температуры. Летальное действие высокой температуры обусловлено денатурацией белков, деградацией нуклеиновых кислот, липидов, мембран. Существуют различные способы стерилизации при помощи высокой температуры.

Прокаливание в пламени спиртовки – самый быстрый и достаточно надежный метод стерилизации. Метод имеет ограниченное применение, т.к. при его использовании портятся стерилизуемые предметы. Прокаливанием стерилизуют бактериальные петли и иглы, мелкий инструментарий.

Кипячение – это простой метод, но он не обеспечивает полного обеспложивания, т.к. споры бактерий не погибают. Стерилизуют кипячением в воде с добавлением 1% бикарбоната натрия в течение 45 мин иглы, шприцы, инструменты.

Стерилизация сухим жаром – проводится в особых аппаратах-печах Пастера или сухожаровых печах. Метод основан на бактерицидном действии нагретого до 165–180°С воздуха. Стерилизуют сухим жаром только сухие предметы, размещая их так, чтобы они не касались стенок шкафа и между ними свободно проникал нагретый воздух. Сухим жаром стерилизуют всю стеклянную посуду, градуированные и пастеровские пипетки, вату, марлю, обернутые в бумагу в течение 1 часа при 160–170°С. Применение температуры выше 170°С приводит к выгонке жирных и смолистых веществ из ваты и некоторых сортов оберточной бумаги, что может вызвать подавление роста микробов, поэтому при использовании температуры выше 170°С посуду стерилизуют в металлических пеналах.

Стерилизация паром не требует такой высокой температуры, как стерилизация сухим жаром, т.к. пар из-за большой теплопроводности действует на микробы эффективнее. Обеспложивание паром проводится при температуре 100–120°С. Существуют два способа стерилизации паром:

1. Стерилизация насыщенным паром под давлением

1. Стерилизация текучим паром

Стерилизация паром под давлением – самый эффективный метод в микробиологической практике способ стерилизации, т.к. с его помощью быстро и надежно достигается стерилизация. Этот способ основан на том, что пар, образующийся при кипячении воды, не выходит наружу, а скапливается в замкнутом пространстве и повышает давление. Соответственно с повышением давления увеличивается температура кипячения воды:

Давление Температура

(атмосферы) °С

0 100

0,5 111,8

0,7 115,0

1,0 119,8

Стерилизация паром под давлением производится в автоклаве (стерилизаторе), обычно стерилизуют до 1 избыточной атмосферы, что соответствует температуре 119–120°С. Таким способом в течение 15–20 минут стерилизуют: 1) заразные материалы и зараженную посуду; 2) приборы с резиновыми деталями; 3) питательные среды, не содержащие нативного белка и углеводов. Некоторые питательные среды (сахара) стерилизуют при 0,5–0,7 ат., что соответствует 112–115°С.

Для контроля стерилизации среди стерилизуемого материала помещают ампулы с химическими веществами, плавящимися при определенной температуре, смешанные с красителем. При достижении в камере определенной температуры порошок плавится, образуя сплав, окрашенный в цвет добавленного красителя.

Таблица 27