Методические указания к самостоятельной работе

1. Вопросы по теме занятия 4 для самостоятельного изучения их студентами:

1. Какое место занимают спирохеты в системе микроорганизмов?

2. Какова классификация спирохет?

3. Каково строение спирохет?

5. Какие методы микроскопии существуют для изучения морфологии спирохет?

6. Каков принцип микроскопии в темном поле?

2. Дома студенту необходимо письменно ответить на следующие вопросы (домашняя работа сдается преподавателю на занятии):

1. Особенности метаболизма у бактерий

2. Перечислить виды брожения

3. Отличительные признаки основных групп микроорганизмов (заполнить таблицу 6):

Таблица 6

Группа	Место в системе организмов	Ядро	Оболочка
Простейшие
Спирохеты
Бактерии

4. Микробиология спирохет (заполнить таблицу 7):

Таблица 7

Возбудитель (по латыни)	Инфекция	Источник (переносчик)

В результате самостоятельной работы студент должен знать:

1. Классификацию, морфологию и физиологию спирохет

2. Роль и свойства

3. Распространение и влияние на здоровье человека

4. Темное поле

5. Правила противоэпидемических режимов и техники безопасности

Уметь:

1. Дифференцировать микроорганизмы при микроскопии

2. Микроскопировать окрашенные препараты

3. Обеззараживать материал, обрабатывать руки дезинфирую-

щими препаратами

Справочные и теоретические материалы

Схема 5

КЛАССИФИКАЦИЯ СПИРОХЕТ (Берги 1994)

ЦарствоProcariotae

ОтделGracilicutes

КлассScotobacteriae

ПорядокSpirochetales

СемействоSpirochetaceae

Роды Spirocheta Cristispira Treponema Borrelia Leptospira

Виды T. pallidum B. recurrentis L.interrogans

Согласно геносистематики спирохеты относят к В ХIX типу (схема 6):

Схема 6

ТИП BXIX Spirochaetes

Класс I Spirochaetes

Порядок I Spirochaetales

СЕМЕЙСТВО I Spirochaetaceae

РОД Borrelia, Treponema

СЕМЕЙСТВО III Leptospiraceae

РОД Leptospira

Для выявления спирохеты используют разные методы окраски.

1. Окраска по Романовскому-Гимзе: краска состоит из смеси азура, эозина и метиленовой сини, перед использованием краску растворяют в воде (к 10 мл дистиллированной воды прибавляют 10 капель продажной краски Романовского-Гимзы). На фиксированный мазок наливают раствор краски на 1 час или погружают мазок в стакан с краской, промывают водой, высушивают на воздухе. Микроскопируют с иммерсией.

Бледная спирохета окрашивается по Романовскому-Гимзе в бледно-розовый цвет, представляет собой тонкие спиралевидные клетки с 8–12 равномерными завитками, длина их 6–20 мкм, ширина 0,09–0,18 мкм.

Боррелия рекуррентис по Романовскому-Гимзе окрашивается в сине-фиолетовый цвет, имеют форму тонкой спирали с 3–8 крупными неравномерными завитками, с одним или обоими заостренными концами, длиной 8–18 мкм и шириной 0,3–0,6 мкм.

Лептоспира окрашивается по Романовскому-Гимзе в бледно-розовый цвет, в препарате видны спиралевидные микроорганизмы с 12–18 плотно прилегающими друг к другу первичными завиткими, напоминают плотную пружину или «четки» с загнутыми или утолщенными концами. Имеют вторичные завитки, придающие телу S- или С-образную форму. Длина лептоспиры 7–14 мкм, толщина 0,06–0,15 мкм.

2. Микроскопия в темном поле: ее производят при боковом освещении. Чтобы получить яркое боковое освещение, обычный конденсор заменяют специальным параболоид-конденсором, в котором центральная часть нижней линзы затемнена, а боковая поверхность зеркальная. Конденсор задерживает центральную часть параллельного пучка лучей, образуя темное поле зрения. Краевые лучи проходят через кольцевую щель, отражаются от боковой зеркальной поверхности конденсора, собираются в фокусе, и, выходя из конденсора, встречают микробные клетки в препарате «раздавленная» капля, свет от них отражается, меняет направление и попадает в объектив. Микробные клетки при этом ярко светятся. В темном поле наблюдают живые объекты величиной 0,06–0,2 мкм, используя сухую систему (объектив х40). Иммерсионное масло наносят на верхнюю линзу конденсора, оно заполняет пространство между конденсором и предметным стеклом, на котором готовится препарат «раздавленная» капля. При этом у спирохет выявляют особенности морфологии, характер движения, количество и особенности первичных завитков, наличие вторичных завитков.

ЗАНЯТИЕ 5

ТЕМА. Риккетсии, хламидии, вирусы. Классификация, морфология, ультраструктура. Физиология риккетсии, хламидии, вирусов. Типы культуры ткани.