36.Валидация аналитических методик,используемых в фармацевтическом анализе

Валидация аналитической методики — это экспериментальное доказательство того, что методика пригодна для решения предполагаемых задач. При проведении валидации необходимо использовать только стандартные образцы с известными характеристиками, подтвержденными документально. Необходимая степень их чистоты зависит от задач, которые решаются при их использовании.

Аналитические испытания и методики, подлежащие валидации

В статье рассматривается проведение валидации для таких испытаний:

Испытания на идентификацию предназначены для подтверждения наличия анализируемого вещества в образце. Обычно это достигается путем сравнения каких-либо свойств (например, спектральных характеристик, хроматографического поведения, химической реакционной способности и т.д.) испытуемого и стандартного образцов.

Испытания, предназначенные для контроля примесей могут быть как количественными, так и предельными. Назначение обоих испытаний — характеризовать чистоту образца. Для валидации количественных и предельных испытаний необходимы различные валидационные характеристики.

Количественное определение предназначено для определения анализируемого вещества в образце. Такая же валидационная процедура может быть применена к методике количественного определения, связанной с другим испытанием (например, в испытании «Растворение»).

Набор исследуемых валидационных характеристик зависит от назначения аналитической методики. Типичные валидационные характеристики:

— правильность;

— точность;

— сходимость;

— внутрилабораторная точность;

— специфичность;

— предел обнаружения;

— предел количественного определения;

— линейность;

— диапазон применения.

37. Гравиметрия. Кислотно-основное титрование в водных…

Гравиметрией называется совокупность методов количественного анализа, основанных на измерении массы определяемого вещества или его составных частей, выделенных в чистом виде или в виде соединений точно известного состава. Гравиметрия является безэталонным методом анализа. Её используют в качестве метода сравнения при проверке правильности определений, выполненных другими методами; в качестве арбитражного метода анализа; для проверки стандартных образцов и т.п. Неопределённость результатов гравиметрических определений зависит, главным образом, от неопределённости измерения массы и составляет, в среднем, 0,1%.

(ГФ)Метод кислотно-основного титрования в неводных растворителях применяется для количественного определения веществ, представляющих собой кислоты, основания или соли, титрование которых в воде затруднено или невозможно из-за слабых кислотно-основных свойств или малой растворимости.

В неводных растворителях резко изменяются кислотно-основные свойства различных веществ. В зависимости от растворителя одно и то же вещество может быть кислотой, основанием или вообще не проявлять кислотно-основных свойств. Применение различных растворителей позволяет управлять кислотно-основными свойствами веществ.

Выбор растворителя осуществляется на основании величин констант титрования К_Т или их отрицательных логарифмов рК_Т. Величина рК_т является критерием возможности и точности титрования. Чем больше эта величина, тем лучше условия титрования. Константа титрования определяется двумя основными величинами: константой кислотности титруемой кислоты (К_а), или константой кислотности кислоты, сопряженной с титруемым основанием (К_ВН⁺), и константой автопротолиза растворителя (К_SH).

При титровании кислот: pK_T = pK_SH – рК_a;

При титровании оснований: рК_T = pK_BH⁺;

При титровании смеси двух кислот: рКт = рКа₍₂₎ – рКа₍₁₎;

При титрования смеси двух оснований: pK_{T =} pK_BH+(1) – pK_BH+(2)

Индекс 1 относится к более сильной кислоте (основанию), а индекс 2 - к более слабой кислоте (основанию).

Как кислоты можно титровать: карбоновые кислоты, фенолы, барбитураты, сульфамиды, аминокислоты и другие.

Как основания можно титровать: амины, азотсодержащие гетероциклические соединения, амиды, четвертичные аммониевые основания и другие.

Оптимальные условия титрования для слабых кислот достигаются в основных неводных растворителях, таких как пиридин, диметилформамид; для слабых оснований - в кислотных неводных растворителях, таких как уксусная кислота и уксусный ангидрид.

Соли некоторых органических и минеральных кислот могут быть оттитрованы как основания в кислотных растворителях.

Титрование в неводных средах может быть проведено как с индикаторами, так и потенциометрически с использованием в качестве индикаторного стеклянного или других, обратимых к протону электродов. В качестве электрода сравнения обычно используют хлоридсеребряный электрод.

При проведении потенциометрического титрования в неводных средах электролитический мост или электрод сравнения заполняют растворами калия хлорида или лития хлорида в соответствующих неводных растворителях.

При титровании в основных растворителях следует принимать меры для защиты испытуемого раствора и титрованного раствора от углерода диоксида, содержащегося в воздухе. Титрование лучше проводить в атмосфере инертного газа (азота, гелия).

А теперь по Беликову(!!!!!!!!):

В водной среде:

Ацидиметрия исп для определения натриевых (калиевых) солей неорганических и органич кислот и органич оснований (R₃N). Титрант – HCl:

RCOONa + HCl = RCOOH + NaCl

R₃N + HCl = [R₃N*H⁺]Cl^-

Алкалиметрия исп для определения неорганич и органич кислот, солей органич оснований

HCl + NaOH = NaCl + H₂O

RCOOH + NaOH = RCOONa + H₂O

[R₃N*H⁺]A^- + NaOH = R₃N + NaA + H₂O

Косвенная (заместительная) нейтрализация основана на р-ции осаждения ионами серебра органич оснований, сод в молекуле вторичн аминогруппу или меркаптогруппу:

>NH + AgNO₃ = >N-Ag + HNO₃

RSH + AgNO₃ = RSAg + HNO₃ Кислоту титруют алкалиметрич методом.

Есть ещё оксимный метод, метод этерификации, гидролиз сложных эфиров.

Титрование в смешанных растворителях исп в тех случаях, когда ЛВ плохо р-ся в воде или водные р-ры имеют слабо выраженные кислотные (щелочные) св-ва. Они усиливаются в присутствии этанола (ацетона).

Титрование в воде в прис несмешиваюшихся с ней эфира или хлороформа исп для извлечения органич основания или кислоты из водной фазы, что исключает их влияние на результаты титрования.

Индикаторы. Общая ха-ка.Классификация индикаторов. Индикатором называют вещество, видимо изменяющее свои свойства (окраску, люминесценцию, растворимость) при изменении концентрации какого либо компонента в растворе.

В зависимости от способа применения различают внутренние (вводят в титруемый р-р) и внешние (отбирают каплю титруемого раствора и помещают ее на индикаторную бумагу) индикаторы. Индикатор может представ¬лять собой обратимую систему, изменяющуюся в ту или иную сторону по мере изменения концентрации опре-деляемого вещества, рН раствора, окислительно-восстановительного потенциала и т.д. – обратимый( ок инд-ры). Имеются также и необратимые индикаторы, с помощью которых возможно наблюдать конечную точку титрования только один раз, что обуславливается необратимым изменением химического состава и строения индикатора (ов инд-ры)

В зависимости от процесса, вызывающего изменение свойств индикатора, различают: кислотно-основные, окислительно-восстановительные, адсорбционные, осадительные и металлоиндикаторы.

Также можно разделить индикаторы по числу окрашенных форм: одноцветные (фенолфталеин), двухцветные (метиловый оранжевый), трехцветные (феноловый красный).

Смешанный индикатор состоит из двух индикаторов, имеющих примерно одинаковый интервал перехода окраски, причём окраска одного из индикаторов является дополнительной для другого. Один индикатор поглощает электромагнитное излучение видимого диапазона с такими длинами волн, которые не поглощает другой индикатор. В результате смесь поглощает часть проходящего через неё светового излучения во всём видимом диапазоне и поэтому кажется серой.

Контрастный индикатор «работает» по такому же принципу, что и смешанный, однако, вместо второго индикатора используется вещество, окраска которого не зависит от рН.

Смеси из трёх и более индикаторов называются универсальными индикаторами. Универсальные индикаторы обычно используют для количественного определения рН.