43. Спектрофотометрия ядерно-магнитного резонанса.

ЯМР – метод, основанный на регистрации индуцированных радиочастотным полем переходов между ядерными магнитными энергетич уровнями молекул вещества, помещённого в магнитное поле. Метод позволяет изучить магнитные переходы ядер со спиновыми квантовыми числами больше нуля ( ядра ¹Н, ¹³С, ¹⁹F, ³¹Р) . Совокупность сигналов переходов между энергетич уровнями ядер молекул составляет спектр ЯМР. Каждый спектр ЯМР регистрируется для одного типа ядер и специфичен для каждого вещества. Чаще всего используют спектроскопию на протонах (ПМР) и ЯМР ¹³С.

Спектры регистрируются при помощи ЯМР-спектрометров. Каждый спектр является отражением числа ядер, порядка их связи и геометрии расположения ядер в молекуле. Спектр представляет собой совокупность пиков с различной шириной, площадью и интенсивностью сигналов. По характеру протонных сигналов можно сделать заключение о наличии в молекуле тех или иных групп атомов. Величина химич сдвига имеет порядок 10^-6 или млн^-1 (миллионная доля). Она зависит от наличия в молекуле тех или иных групп атомов. Используют для объективной идентификации органич ЛВ и для колич определения относительного содержания в-в или примеси, подлинность по мравнению со стандартным образцом.

44.Флуориметрия. Применение в фарм анализе.

Флуориметрия – метод анализа, основанный на измерении интенсивности флуоресценции, излучаемой испытуемым веществом относительно флуоресценции, излучаемой стандартным веществом.

Методика. Испытуемое вещесто растворяют в растворителе или смеси растворителей, указанных в частной статье. Раствор помещают в кювету или камеру флуориметра и облучают возбуждающим светом, имеющим как можно большую монохроматичность при длине волны, указанной в частной статье. Измеряют интенсивность излучаемого света. При проведении колич определений в прибор помещают растворитель или смесь растворителей, используемых для растворения анализ образца, и устанавливают прибор на нулевое значение. Затем помещают раствор стандартного образца и устанавливаю чувствительность прибора таким образом, чтобы отклик показаний был не более 50% от размера шкалы. Затем в прибор помещают испытуемый раствор с неизвестной конц и регистрируют показания прибора. Расчёт концентрации: С_x =I_xCs/I_s

Где С_x – конц в испытуемом растворе С_s – конц стандартного образца в растворе

I_x – интенсивность флуоресценции в испыт р-ре

I_s – интенсивность флуо в стандартном р-ре.

Флуориметрия используется не только для установления подлинности, но и определения малых количеств веществ, т.к. их интенсивность флуоресценции имеет линейную зависимость от концентрации. Линейная зависимость сохраняется при постоянстве квантового выхода и интенсивности возбуждающего света для низких концентраций. При высоких концентрациях эта зависимость нарушается. Идентификацию проводят по цвету излучаемого света, специфичного дня флуоресцирующих веществ. Спеутр даёт широкие полосы излучения (от 100 до 200 нм). Метод отличается очень высокой чувствительностью. Колич определение выполняют на спектрофлуориметрах. Расчёт концентрации проводят с помощью калибровочного графика или шкалы стандартных растворов.