- •Волгоградский государственный медицинский университет
- •Учёт успеваемости и посещаемости
- •Оглавление
- •Введение в частный курс микробиологии. Цели и задачи частной микробиологии. Материалы и методы исследования
- •Бактерии, имеющие медицинское значение
- •Материал для исследования
- •Работа над материалом
- •Документация
- •Показания к бактериологическим исследованиям различных биосубстратов человека
- •Методы микробиологической диагностики
- •Бактериальные инфекции, обусловленные энтеробактериями
- •Механизмы взаимодействия возбудителей острых кишечных инфекций с поверхностным кишечным эпителием
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа
- •Дизентерия (шигеллез)
- •Самостоятельная работа студентов
- •Дифференциация биоваров V.Cholerae 01
- •Методы ускоренной диагностики
- •Иммунологические исследования
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа студентов
- •Протокол бактериологического исследования
- •Эшерихиозы
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа
- •Протокол бактериологического исследования
- •Пищевые токсикоинфекции и токсикозы
- •Кишечные инфекции: возбудитель ботулизма, возбудитель стафилококковой интоксикации
- •Ботулизм
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа
- •Сальмонеллез
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа студентов
- •Протокол бактериологического исследования
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа
- •Протокол бактериологического исследования
- •Возбудители кишечных иерсиниозов
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа
- •Микробиологические методы идентификации микробов – возбудителей гнойной кокковой инфекции
- •Стафилококки
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа студентов
- •Протокол исследования гноя
- •Стрептококковые инфекции
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа студентов
- •Пневмококки
- •Видовая идентификация пневмококков Дифференциально-диагностические признаки пневмококков и зеленящих стрептококков
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа студентов
- •При пневмококковых инфекциях
- •Менингококковые инфекции
- •Культуральные и биохимические свойства патогенных видов
- •Гонококковые инфекции
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа студентов
- •Возбудители бактериальных воздушно-капельных инфекций
- •Дифтерия
- •Ускоренные методы микробиологической диагностики дифтерии
- •Препараты для специфической профилактики и терапии
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа студентов
- •Протокол бактериологического исследования материала при дифтерии
- •Туберкулез
- •Самостоятельная работа студентов. Микробиологический диагноз туберкулеза
- •Вопросы для обсуждения
- •Коклюш и Паракоклюш
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа студентов
- •Возбудители бактериальных зооантропонозных инфекций
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа студентов
- •Сибирская язва
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа студентов
- •Туляремия
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа студентов
- •Бруцеллез
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа
- •Постановка реакции Райта (схема)
- •Вопросы для обсуждения
- •Самостоятельная работа
- •Перечень экзаменационных вопросов
- •1.0. Общая часть
- •I. Морфология микробов
- •II. Физиология микробов
- •III. Экология микробов. Влияния на микробы факторов окружающей среды
- •IV. Генетика бактерий. Основы биотехнологии
- •V. Микробиологические основы химиотерапии
- •VI. Инфекция и иммунитет
- •VII. Реакции иммунитета
- •VIII. Медицинские иммунобиологические препараты
- •2. 0. Специальная часть
- •Частная микробиология
- •Санитарная микробиология
- •Дополнительный перечень вопросов для студентов педиатрического факультета
- •Дополнительный перечень вопросов для студентов стоматологического факультета
- •Дополнительный перечень вопросов для студентов фармацевтического факультета
- •Конечные цели обучения Студент должен знать:
- •Студент должен уметь:
- •Практические навыки
Видовая идентификация пневмококков Дифференциально-диагностические признаки пневмококков и зеленящих стрептококков
Вид |
Ферментация инулина |
Признак растворяющее действие 10-40% раствора желчи |
Ингибирующее действие оптохина 1:500 000 |
Пневмококки Стрептококки |
+ – |
+ – |
+ – |
Оптохиновый тест
Чистую культуру засевают на агар, содержащий 1:50000-1:100000 оптохина. На следующие сутки учитывают результат. Пневмококки не растут в присутствии оптохина. Можно использовать бумажные диски 6 мкг оптохина, которые накладываются после посева на поверхность среды (посев лучше производить секторами). У пневмококков вокруг диска образуется зона задержки роста не менее 5 мм.
Тест с желчью
Основан на способности 10% желчи и 2% раствора оксидолатов лизировать пневмококк.
Вопросы для обсуждения
1. Морфология, тинкториальные и культуральные свойства пневмококков.
2. Заболевания человека, вызываемые пневмококками.
3. Антигенная структура пневмококков.
4. Лабораторная диагностика пневмококковых заболеваний.
5. Специфическая профилактика пневмококковых инфекций.
Самостоятельная работа студентов
1. Познакомиться со схемой исследования при пневмококковых инфекциях.
2. Микробиологический диагноз пневмококковых инфекций:
а. изучить демонстрационный препарат из чистой культуры пневмококка, зарисовать;
б. изучить рост пневмококка на кровяном агаре и МПБ;
в. сделать посев мокроты на чашку с кровяным МПА;
г. приготовить мазок из мокроты, окрасить его по Граму, зарисовать;
д. определить чувствительность к антибиотикам по демонстрационным посевам.
Схема микробиологических исследований
При пневмококковых инфекциях
Материал |
Метод исследования |
Результат |
Мокрота, гной, эксудат из плевраль-ной полости, слизь из гортани, носоглот-ки |
1. Микроскопический 2. Бактериологический посев на 5% кровяной агар
А. Микроскопия мазков из колоний Б. Выделение чистой культуры 1. Микроскопический Культуралъное определение
2. Биохимическая активность тест с желчью ферментация глюкозы, сахарозы инулина
3. Биологический
А. Заражение белых мышей с последующим вскрытием и приготовлением мазков-отпечатков. Б. Реакция агглютинации 4. Серологический Определение типа пневмококка в РА с противопневмококковыми сыворотками |
Гр+ кокки Мелкие, округлые, кусочные колонии с гемолизом Гр+ кокки
Гр+ кокки Гемолитические колонии
+ Ферментация до кислоты, без образования газа
Гр+ кокки
+РА
+РА |
Заключение: в материале обнаружен S. pneumoniae.
Менингококковые инфекции
Цель занятия: выработать навыки лабораторного анализа менингококковых инфекций.
Задачи:
1. Изучить биологические свойства возбудителя менингококковых инфекций.
2. Знать патогенетические факторы микроорганизмов.
3. Освоить методы лабораторной диагностики.
Уметь:
интерпретировать полученные результаты лабораторной диагностики менингококковых заболеваний;
оценить результаты антибиотикограммы и факторов персистенции;
подобрать препараты для профилактики и лечения заболеваний.
Семейство Neisseriaceae объединяет группу аэробных парных кокков и парных палочек, семейство включает 4 рода: Neisseria, Moraxella, Branhamella, Acinetobacter.
В род нейссерия включено 6 видов, которые выделяются от человека: патогенные виды N. meningitidis, N. gonorrhaeae и непатогенные N. mucosa, N. sicea, N. subflava, N. flavescens. Непатогенные нейссерии являются кoмвeнcaлaми. У ослабленных больных признана их роль в развитии менингитов, эндокардитов, сепсиса, пневмоний, отитов и синуситов, бронхиальной астмы.
Раздел |
Вопросы для изучения |
Биология возбудителя |
1. Таксономия Возбудитель менингококковых инфекций относится к семейству Neisseriaceae, роду Neisseria, включающему 6 видов. 2. Основные биологические свойства: Морфологические – бобовидные клетки диаметром 0,6-0,8 мкм, располагающиеся парами или тетрадами, нередко внутри лейкоцитов – незавершенный фагоцитоз. Спор не образуют, способны образовывать капсулу. Тинкториальные – грамотрицательные клетки. Культуральные: строгие аэробы. Температурный oптимyм –370C, оптимальная реакция среда pH = 7,2-7,4. На обычных питательных средах не растут, для роста необходимо добавление сыворотки. Колонии на плотных питательных средах нежные, прозрачные, размером 2-3 мм. На сывороточном бульоне образуют помутнение и небольшой осадок на дне. Биохимические свойства. Ферментируют глюкозу, мальтозу с образованием кислоты без газа. Не разжижают желатин, оксидазоположительны. Патогенность 1. Факторы адгезии и колонизации: пили, белки наружной мембраны, капсула, которая является главным фактором патогенности менингококков. 2. Токсины и ферменты агрессии, гиалуронидаза, нейраминидаза, протеазы, плазмокоагулаза, фибринолизин, гемолизин, антилизоцимная активность. Антигенные свойства: У менингококков имеются 4 антигенные системы: 1. Капсульные полисахаридные антигены; 2. Белковые антигены наружной мембраны; 3. Белковый антиген, общий для всего рода; 4. Липополисахаридный антиген, включающий 8 серотипов. В соответствии с этим антигенная формула менингококков имеет следующий вид: серогруппа: серотип по белку: субтип по белку: серотип по ЛПС. |
Эпидемиология |
Источником инфекции может быть только человек: больной, реконвалесцент или бактерионоситель. Распространение инфекции происходит воздушно-капельным путем. |
Патогенез |
Входными воротами инфекции является носоглотка, откуда менингококкоки проникают в лимфатические сосуды и кровь, развивается бактериемия. Затем микроорганизмы внедряются в мозговые оболочки. Менингококки могут вызывать следующие формы болезни: нозофарингит, менингококцемия (менингококковый сепсис), эпидемический цереброспинальный менингит (гнойное воспаление мозговых оболочек головного и спинного мозга) |
Постинфекци-онный иммунитет |
После перенесенной болезни формируется прочный длительный антимикробный иммунитет против всех серогрупп менингококков. Видоспецифический. |
Этиотропная терапия менингококковой инфекции проводится сульфа-ниламидами или пенициллином G, а у людей с аллергией к пенициллину - хлорамфениколом.
Если быстрые методы диагностики не позволяют предварительно идентифицировать возбудителя или по каким-либо причинам происходит задержка с выполнением люмбальной пункции, то антибактериальная терапия назначается эмпирически, не позднее 2-3 часов с момента установления диагноза. Выбор антибиотиков в данной ситуации диктуется необходимостью перекрыть весь спектр возможных возбудителей.
Специфическая профилактика проводится по эпидемиологическим показаниям или военнослужащим – химической менингококковой вакциной, содержащей полисахаридные антигены серогрупп А и С (активный антимикробный иммунитет), или человеческим нормальным иммуноглобулином (пассивный антимикробный иммунитет).
В отношении инфекционных заболеваний менингококковой этиологии в настоящее время действует приказ М3 РФ № 375 от 23.12.98 г., «О мерах по усилению эпидемиологического надзора и профилактики менингококковой инфекции и гнойными бактериальными менингитами», в соответствии с которым и осуществляется специфическая профилактика менингококковой инфекции.
Схема лабораторной диагностики при менингококковой инфекции
Материал |
Метод исследования |
Результат |
Ликвор, слизь из зева, носа, гной, экссудат, СМ-жидкость |
1. Микроскопический
2. Бактериологический А. Посев на сывороточный МПА с ристомицином (для подавления сопутствующей флоры) Б. Пересев на скошенные сывороточные среды и МПА В. Микроскопия мазка из колоний Г. Посев на «пестрый ряд»
3. Серологический А. Типирование менингококков в РА с типоспецифическими сыворотками А, В, С Б. Реакция преципитации для обнаружения менингококкового антигена в материале |
Гр–диплококки бобовидной формы
Бесцветные, мелкие колонии (через 1 день, на 2 день) Рост Роста нет Гр–диплококки Ферментация глюкозы и мальтозы до кислоты Реакция положительная с одной из типоспецифических сывороток
Положительная |
Сыворотка крови |
РПГА |
Положительная |