Ускоренные методы микробиологической диагностики дифтерии

В качестве ускоренного метода диагностики применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Препараты для специфической профилактики и терапии

Плановая профилактика проводится дифтерийным анатоксином, который входит в состав вакцины АКДС.

Для экстренной профилактики и лечения используют противодифтерийную антитоксическую сыворотку.

Антибиотики: эритромицин, олеандомицин, тетрациклин.

Вопросы для обсуждения

1. Общая характеристика и классификация коринебактерий.

2. Источник заражения, пути передачи инфекции, патогенез заболевания.

3. Материал для исследования, методы лабораторной диагностики.

4. Бактериологический метод исследования дифтерии.

5. Характеристика экзотоксина и метод определения токсикогенности дифтерийной палочки.

6. Специфическая профилактика и терапия дифтерии.

Самостоятельная работа студентов

1. Микроскопия демонстрационного препарата дифтерийной палочки в чистой культуре, окрашенного по Нейссеру.

2. Окраска готовых микропрепаратов уксуснокислым метилвиолетом, микроскопия.

3. Изучение бактериологического метода исследования при дифтерии с последующей идентификацией возбудителя:

а) характер роста на сывороточных и теллуритовых средах;

б) определение токсигенности методом диффузной преципитации в агаре по Оухтерлони;

в) реакции на цистиназу (проба Пизу);

г) реакция на уреазу (проба Закса);

д) ферментация моно- и полисахаридов.

4. Изучение препаратов, применяющихся для диагностики, специфической профилактики и лечения дифтерии.

5. Выполненную работу оформить протоколом по следующей схеме, отметить полученные результаты.

Протокол бактериологического исследования материала при дифтерии

Дата	Ход исследования	Результаты
1 день	Посев пленок из зева на сывороточный агар, среду Клауберга, хинозоловый агар.
2 день	Изучение подозрительных на дифтерию колоний. Пресев на сывороточный скошенный агар для выделения чистой культуры.
3 день	Изучение и идентификация чистой культуры: а) мазок, окраска по Нейссеру; б) изучение токсикогенности; в) изучение цистиназы; г) посев в столбики с глюкозой, мальтозой, сахарозой, крахмалом, гликогеном.
Вывод:

Зарисовать микропрепарат дифтерийной палочки, окрашенной по Нейссеру и уксуснокислым метилвиолетом. Зарисовать на чашке Петри с методом определения токсигенности дифтерийной палочки.

Туберкулез

Туберкулез - инфекционное заболевание человека и животных с наклонностью к хроническому течению, характеризующееся образованием специфических воспалительных изменений (бугорков) с преимущественной локализацией в легких.

Цель занятия: овладеть навыком оценки микробиологической диагностики туберкулеза.

Знать:

- биологию возбудителей;

- патогенез заболевания;

- эпидемиологию туберкулеза;

- лабораторную диагностику заболевания.

Уметь:

- интерпретировать результаты лабораторных исследований;

- подобрать препараты для специфической профилактики и терапии туберкулеза.

Раздел	Вопросы для изучения
Таксономия	Семейство Mycobacteriaceae род Mycobacterium. Виды микобактерий – возбудители туберкулеза человека: M.tuberculesis, M.bovis, M.avium, M.muris.
Биологические свойства	Морфологические свойства – палочки. Тинкториальные свойства. Окраска по Цилю-Нильсену. Особенность строения стенки – большое количество липидов, что придает кислотоустойчивость. Культуральные свойства – растут очень медленно: M.tuberculesis 28 дней, M.bovis и M.avium до 35 дней и M.muris – 26 дней. Возбудители туберкулеза дают преимущественно R-формы колонии (шероховатые, приподнимающиеся, с неровным краем, беспигментные) Биохимические тесты: пероксидазная активность, каталазная активность, ниациновый тест, редукция нитратов, никотинамидная активность.
Факторы вирулентности	Токсические компоненты клетки возбудителей туберкулеза: (воск Д, мураминопептид, тригалозодимиколат, фтионовые кислоты, сульфатиды) и протеин имеют значение в развитии специфических поражений тканей, гликопептид (корд-фактор) разрушает митохондрии клеток.
Патогенез, клиника. Что такое первичный туберкулезный комплекс и когда он образуется? Что такое вторичный туберкулез?	Клинические формы туберкулеза: а) по локализации – туберкулез легких, туберкулез почек, костно-суставной туберкулез, туберкулезный менингит; б) по характеру поражения: миллиарный, инфильтративный, лобарная пневмония, диссеминированный, кавернозный, фиброзно-кавернозный туберкулез.
Иммунитеты	Типы иммунного ответа при туберкулезе: а) клеточный – основной механизм защиты; б) гуморальный – выработка АТ не коррелирует с напряженностью иммунитета; Особенности иммунитета при туберкулезе: а) нестерильный; б) неустойчивый; в) клеточный; г) аллергический. Большое значение имеет антимикробная резистентность при туберкулезе: активность фагоцитов и система комплемента.
Микробиоло-гическая диагностика	Методы микробиологической диагностики туберкулеза: Бактериоскопический: а) иммерсионная микроскопия мазков, окрашенных по Цилю-Нильсену; б) люминесцентная микроскопия мазков, обработанных флюорохромами. Бактериологический: Посев на питательные среды (Петрова, Павловского, Сотона, Гельбера). Метод микрокультур Прайса. Серологический. Аллергический (проба Манту с туберкулином). Какой из методов используют для широкого обследования населения? Аллергический. Какой из методов наиболее прост в условиях лаборатории? Бактериоскопический, но имеет ориентировочное значение. Ускоренным методом является метод Прайса (метод микрокультур). Серодиагностика. Используются: а) непрямая РИФ; б) РПГА с эритроцитарным диагностикумом из фосфатидных антигенов микобактерий; в) РПГА с протеиновыми эритроцитарными диагностикумами. У кого может быть положительная проба Манту? У больных, у вакцинированных, при бытовом инфицировании.
Специфическая профилактика	Специфическая профилактика туберкулеза проводится живой вакциной БЦЖ. Ранние сроки первичной вакцинации необходимы, чтобы авирулентный штамм живой вакцины прижился в организме и создал нестерильный иммунитет. Ревакцинацию проводят лицам с отрицательной реакцией Манту.
Этиотропная терапия	Средства противотуберкулезной терапии: а) ПАСК; б) ГИНК; в) тубазид и фтивазид; г) антибиотики резерва (рифампицин и др.).