Литература

1. Брильман, Дж. Неврология / Дж. Брильман. — М., 2007. — 222 с.

2. Герасимова, М. М. Нервные болезни / М. М. Герасимова. — Тверь-Москва, 2003. — 512 с.

УДК 612.014.464-092.4:577.126

ИЗМЕНЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ОКСИДАНТНО-АНТИОКСИДАНТНОГО

РАВНОВЕСИЯ У НОВОРОЖДЕННЫХ ЖИВОТНЫХ В УСЛОВИЯХ ГИПЕРОКСИИ

Благочинная К. В., Каленик Д. П.

Научный руководитель: к.м.н., доцент Ж. А. Рутковская

Учреждение образования

«Белорусский государственный медицинский университет»

г. Минск, Республика Беларусь

Введение

Развитие перинатальной медицины, совершенствование методов интенсивной терапии и респираторной коррекции у новорожденных позволило повысить выживаемость недоношенных детей с экстремально низкой массой тела, но с другой стороны, вследствие этого стала актуальной проблема формирования хронических заболеваний легких. Среди них на первое место по частоте и клинической значимости выходит бронхолегочная дисплазия (БЛД), которая формируется у детей, находящихся на длительной искусственной вентиляции легких [1]. Патогенез данного заболевания остается до конца не изученным, однако, большинство авторов указывают, что решающим фактором в развитии данной патологии является воздействие высоких концентраций кислорода, которые провоцируют увеличение продукции активных форм кислорода и развитие оксидативного стресса.

Цель исследования

Изучить содержание продуктов перекисного окисления липидов и неферментативных антиоксидантов в плазме крови новорожденных морских свинок в условиях гипероксии.

Материалы и методы исследования

В работе использовались новорожденные морские свинки. Эксперимент проводили с соблюдением этических норм и правил проведения работ с лабораторными животными. После рождения животных опытной группы (n = 4-7) помещали в камеру, в которой в течение всего времени инкубации поддерживали концентрацию кислорода не менее 75 % (температура 20–25 °С, относительная влажность 50–80 %). Длительность инкубации в условиях гипероксии составляла 1, 3, 7 и 14 суток. Контрольные животные (n = 4–7) в течение такого же периода времени дышали обычным воздухом.

Для получения плазмы кровь собирали в пробирки с 5 %-ным раствором ЭДТА и центрифугировали 10 мин при 3000 об/мин для осаждения эритроцитов.

В плазме крови определяли содержание диеновых коньюгатов (ДК), сопряженных триенов (СТ), оснований Шиффа (ОШ) и витамина Е.

Для определения содержания диеновых коньюгатов, сопряженных триенов и оснований Шиффа использовали метод, основанный на экстракции этих соединений смесью равных объемов гептана и изопропанола [2]. Для исследования использовали изопропанольную фазу, в которую экстрагируются продукты пероксидации фосфолипидов. Оптическую плотность измеряли на спектрофотометре против соответствующего контроля при 220 нм (в этом диапазоне поглощают ультрафиолетовые лучи соединения с изолированными двойными связями), 232 нм (содержание ДК), 278 нм (содержание СТ и кетодиенов — КД), 400 нм (содержание ОШ). О количественных изменениях продуктов ПОЛ судили по величине отношений оптической плотности (Е): Е232/Е220 (для ДК), Е278/Е220 (для СТ), Е400/Е220 (для ОШ). Результат выражали в единицах индекса окисления (е. и. о.).

Определение содержание витамина Е проводили спектрофлуориметрическим методом [3] и выражали в в нмоль/мл плазмы.

Статистическую обработку результатов проводили с использованием пакета программ «Statistica» 6.0. Для оценки достоверности различий между группами использовали непараметрический тест Манна-Уитни для независимых выборок. Данные представлены в виде медиан и интерквартильных размахов (медиана: 25 процентиль — 75 процентиль). Отличия считали достоверными при уровне значимости р < 0,05.

Результаты и их обсуждение

При кратковременном воздействии гипероксии (в течение 1 и 3-х суток) в плазме крови опытных животных не изменяется содержание продуктов перекисного окисления липидов.

С увеличением сроков гипероксии до 7 сут в плазме крови возрастает на 88,8 % (р < 0,05) содержание коечных продуктов ПОЛ–ОШ. Это можно расценивать не только как стимуляцию процессов перекисного окисления липидов, но и как повреждение других макромолекул клетки, поскольку ОШ представляют собой продукты коньюгации липидных пероксидов (в основном, альдегидов) с белками и углеводами.

При длительной гипероксии в течении 14 суток в плазме крови резко возрастает содержание всех продуктов ПОЛ: ДК — в 3,3 раза; СТ — в 12 раз, а ОШ — в 6,2 раза, что свидетельствует о резкой стимуляции процессов перекисного окисления в организме. Важно, что в эти же сроки нами выявлено снижение содержания витамина Е в плазме крови, что свидетельствует об истощении запаса этого важного неферментативного антиоксиданта в организме животных, подвергшихся длительной гипероксии.

Выводы:

— у новорожденных морских свинок, которые находились в условиях гипероксии в течение 7 суток, увеличивается содержание конечных продуктов перекисного окисления липидов — оснований Шиффа;

— воздействие высокой концентрации кислорода в течение двух недель ведет к накоплению диеновых коньюгатов, сопряженных триенов и оснований Шиффа;

— под влиянием длительной гипероксии (14 суток) в плазме крови резко снижается содержание витамина Е;

— с увеличением сроков гипероксии в организме новорожденных животных наблюдается дисбаланс в системе оксидантно-антиоксидантного равновесия.