Обнаружение молочной кислоты в желудочном соке по реакции Уффельмана
Принцип работы. Молочная кислота в присутствии фенолята железа (реактив Уффельмана), окрашеного в фиолетовый цвет, образует лактат железа желто-зеленого цвета.
Материальное обеспечение: патологический желудочный сок; 1% раствор фенола; 3% раствор хлорида железа (III), пипетки, пробирки, штативы.
Ход работы
-
Приготовление реактива Уффельмана: в пробирку необходимо налить 2 мл 1% раст-вора фенола и добавить к нему 2 капли 1% раствора хлорного железа до появления фиолетового цвета.
-
К этому реактиву добавьте 5 капель желудочного сока с нулевой кислотностью. При
наличии молочной кислоты окраска изменится на желто-зеленую в результате
образования лактата железа.
ВІВОДЫ
Подпись преподавателя:
Приложение 1
Граф логической структуры
ПОСТУПЛЕНИЕ БЕЛКОВ В СОСТАВЕ ПРОДУКТОВ ПИТАНИЯ
ПЕРЕВАРИВАНИЕ БЕЛКОВ В ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОМ ТРАКТЕ
ГИДРОЛИЗ БЕЛКОВ В ЖЕЛУДКЕ
ПЕПТИДЫ ОЛИГОПЕПТИДЫ
МЕХАНИЗМ АКТИВАЦИИ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ
ПОСЛЕДУЮЩЕЕ РАСЩЕПЛЕНИЕ ПЕПТИДОВ В ТОНКОМ КИШЕЧНИКЕ
ТРИПЕПТИДЫ ДИПЕПТИДЫ
ПАТОЛОГИЧЕСКИЕ СОСТОЯНИЯ, СВЯЗАННЫЕ С НАРУШЕНИЕМ ПЕРЕВАРИВАНИЯ БЕЛКОВ
КВАШИОРКОР
Тема 1.16. Исследование преобразований аминокислот (дезаминирование, трансаминирование, декарбоксилирование)
Актуальность темы
В живом организме все обменные процессы идут при участии ферментов, которые являются биологическими катализаторами. Активность ферментов зависит от ряда факторов и является определенным показателем состояния организма.
Для аминокислот характерны реакции трех типов: реакции дезаминирования, реакции трансаминирования и реакции декарбоксилирования.
Большое значение в клинической практике имеет определение активности аминотрансфераз и, в частности, аспарагиновой (АсАТ) и аланиновой (АлАТ) аминотрансфераз. Эти ферменты являются органоспецифическими. Так, АсАТ преобладает в сердечной мышще, а АлАТ – в печени. При нарушении целостности клеточных мембран органоспецифические ферменты в больших количествах попадают в кровь, что проявляется в их повышенной активности в крови. Поэтому при инфаркте миокарда используется, среди прочих методов диагностики, определение активности АсАТ, а при остром гепатите – преимущественно АлАТ. При хронических поражениях печени повышена активность обоих ферментов.
Теперь ознакомьтесь с целями занятия.
Общая цель
Уметь интерпретировать общие пути обмена аминокислот и результаты определения активности аминотрансфераз в сывортке крови с целью дальнейшего использования на клинических кафедрах для диагностики патологии внутренних органов.
Конкретные цели: Цели исходного уровня:
Уметь:
|
1. Интерпретировать биологическую роль реакций дезаминирования, трансами-нирования и декарбоксилирования в обмене аминокислот |
|
|
2. Интерпретировать изменения актив-ности АсАТ |
Интерпретировать качественные реакции на a-кетокислоты с 2,4 ДНФГ (кафедра медицинской и фармацевтической химии) |
|
3. Интерпретировать изменения актив-ности АлАТ |
Интерпретировать определение концент-рации вещества в растворе по его оптиче-ской плотности (кафедра медицинской и фармацевтической химии) |
|
4.Интерпретировать биологическую роль реакций окислительного дезаминирования и альфа-декарбоксилирования в обмене аминокислот |
|
Для проверки исходного уровня предлагается выполнить ряд заданий.
Задания для самопроверки и самокоррекции исходного уровня.
Задание 1. В биохимической лаборатории лаборант строила калибровочную кривую зависимости концентрации вещества от оптической плотности. Были получены приводимые ниже результаты.
Концентрация 15 мг/л - экстинкция 0,015;
Концентрация 25 мг/л – экстинкция 0,025;
Концентрация 50 мг/л – экстинкция 0,05;
Концентрация 75 мг/л – экстинкция 0,075;
Концентрация 100 мг/л - экстинкция 0,1 (оптических единиц).
Как выглядит данная калибровочная кривая?
А. Синусоида
В. Гипербола
С. Прямая, отражающая обратнопропорциональную зависимость
D. Парабола
Е. Прямая, отражающая прямопропорциональную зависимость
Задание 2. Во время практической работы студент на ФЭКе определял экстинкцию раствора сульфата меди в пяти пробирках с различными концетрациями данного вещества. В какой пробирке концентрация сульфата меди была самая низкая, если экстинкция растворов составила:
А. 0,01 оптических единиц
В. 0,02 оптических единиц
С. 0,05 оптических единиц
D. 0,07 оптических единиц
Е. 0,1 оптических единиц
Задание 3. Для определения активности АлАТ студент использовал 2,4-ДНФГ. По количеству какой образовавшейся кислоты можно судить об активности фермента?
А. Лактата
В. Пирувата
С. Цитрата
D. Малата
Е. Фолиевой кислоты
Задание 4. Для определения активности АсАТ студент использовал 2,4-ДНФГ. По количеству какой образовавшейся кислоты можно судить об активности фермента?
А. Малата
В. Пирувата
С. Оксалоацетата
D. Глутамата
Е. Цитрата
Правильность решений проверьте, сопоставив их с эталонами ответов.
Эталоны ответов к решению заданий для самопроверки и самоконтроля исходного уровня:
1 – Е; 3 – В; 4 – В.
Информацию для восполнения исходного уровня можно найти в следующей литературе:
1.Тюкавкина Н.А.,Бауков Ю.И. Биоорганическая химия. -М.: Медицина, 1991. – С.252-256
2.Рево А.Я.,Зеленкова В.В. Руководство к лабораторным занятиям по биоорганической химии.- М.: Медицина, 1980. –С.27-29
3.Лекции по биоорганической химии
Содержание обучения
Содержание обучения должно обеспечивать достижение целей обучения, чему способствует граф логической структуры изучаемой темы (Приложение 1).