Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
методичка стом.гистология.doc
Скачиваний:
161
Добавлен:
13.05.2015
Размер:
5.16 Mб
Скачать

Ориентировочная карта действия

№ п/п

Вопросы, подлежащие изучению

Последовательность работы, способ оформления результатов

1.

Обнаружение в тканях зуба кальция, фосфатов, сульфатов

Для исследования минерального состава зуба проводят растворение его солей в кислоте.

В колбу помещают зуб, приливают 10 мл 2N соляной кислоты, закрывают пробкой с обратным холодильником и нагревают до полного растворения зуба. После охлаждения нейтрализуют содержимое колбы 10 мл 2N раствора едкого натра.

Открытие кальция: к 10 каплям минерализата прибавить 10 капель оксалата аммония. В присутствии кальция выпадает осадок

Открытие фосфатов: к 10 каплям минерализата прибавить 10 капель молибденового реактива, нагреть. В присутствии фосфатов появляется осадок желтого цвета.

Открытие сульфатов: к 10 каплям минерализата прибавить 3 капли уксусной кислоты и 5 капель хлористого бария. В присутствии сульфатов выпадает белый осадок

2.

Определение содержания кальция

Принцип метода: ионы кальция взаимодействуют с индикаторным реактивом с образованием окрашенного комплекса, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию кальция. кислоты, эквивалентно количеству кальция.

Ход работы.

Отмерить, (мл)

Опытная проба

Стандартная проба

Реагент

2,0

2,0

Проба

0,05

-

Калибратор

-

0,05

Перемешать, измерить оптическую плотность опытной и калибровочной проб против контроля (реагент) при длине волны 650 нм.

Расчет содежания кальция:

С=Еоп/Ест*2,5ммоль/л,

где Еоп-экстинкия опытной пробы, Ест- экстинкция стандартной пробы, 2,5 –концентрация стандартного раствора

3.

Определение содержания фосфатов.

Принцип метода: при взаимодействии фосфатов с молибдатом аммония образуется фосфорномолибденовокислый аммоний, который восстанавливается аскорбиновой кислотой в молибденовую синь.

Порядок выполнения работы. В пробирку вносят 0,5 мл минерализата, 5,0 дистиллированной воды, 1 мл 2,5% молибдата аммония,0,4 мл 0,25% раствора аскорбиновой кислоты. Перемешивают, через 15 минут колориметрируют при длине волны 540 нм против контроля (в контроль вместо надосадочной жидкости добавить 1,0 мл воды). Расчет производят по калибровочному графику.

4.

Расчет коэффициента Са/Р.

Рассчитать коэффициент Са/Р. Сравнить его с нормальной величиной.

Оформить протокол. Сделать вывод о химическом составе зуба.

5.

Обнаружение белка

в зубе.

Небольшой кусочек зуба поместить в пробирку, добавить 10 капель 10% раствора едкого натра, нагреть до кипения. Белки зуба при этом переходят в раствор. Содержимое пробирки охладить и провести биуретовую реакцию.