- •Федеральное агенство по образованИю
- •Оглавление
- •Биохимия простых белков
- •Лабораторная работа №1 Качественные цветные реакции на функциональные группы белков и аминокислот
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №2 Реакции осаждения белков
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия Сложных белков (протеинов)
- •Лабораторная работа №3 Геминовая проба Тейхмана
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №4 Выделение казеиногена из молока и открытие в нем фосфата
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №5 Выделение муцина из слюны и открытие в нем углеводного компонента
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия ферменТов
- •Лабораторная работа №6 Количественное определение активности амилазы (по Вольгемуту)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №7 Специфичность действия амилазы слюны
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №8 Влияние температуры на активность α-амилазы слюны
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №9 Определение оптимума рН для действия α-амилазы слюны
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №10 Влияние активаторов и ингибиторов на активность α-амилазы слюны
- •Биохимия нуклеиновых кислот
- •Лабораторная работа №11 Кислотный гидролиз нуклеопротеинов дрожжей и определение состава нуклеиновых кислот
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Изучение реакций окисления
- •Лабораторная работа №12 Открытие альдегиддегидрогеназы в молоке
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №13 Обнаружение каталазы крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №14 Открытие пероксидазы
- •Лабораторная работа №15 Получение тирозиназы и окисление тирозина в присутствии кислорода
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Обмен углеводов
- •Лабораторная работа №16 Определение глюкозы в крови (набором реактивов «Глюкоза-фкд»)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия липидов
- •Лабораторная работа №17 Эмульгирование триацилглицеридов желчными кислотами
- •Лабораторная работа №18 Качественная реакция Петтенкоффера на желчные кислоты
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №19 Определение содержания β-липопротеинов (липопротеинов низкой плотности) в плазме крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №20 Качественные реакции на холестерол
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Биохимия белков
- •Лабораторная работа №21 Качественный анализ желудочного сока
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №22 Определение активности аспартатаминотрансферазы( аланинаминотрансферазы) по методу Райтмана-Френкеля(набором реагентов)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Построение калибровочного графика
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №23 Определение мочевины в крови по реакции с диацетилмонооксимом (набором реагентов)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия гормонов
- •Лабораторная работа №24 Качественная реакция на адреналин
- •Лабораторная работа №25 Обнаружение йодтиронинов
- •Витамины
- •Лабораторная работа №27 Качественные реакции на витамины Жирорастворимые витамины
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Водорастворимые витамины
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Биохимия печени
- •Лабораторная работа №27 Качественное определение «прямого» и «непрямого» билирубина в сыворотке крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №28 Количественное определение содержания билирубина и его фракций в сыворотке крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Калибровочный график для определения билирубина крови
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №29 Тимоловая проба (проба коллоидоустойчивости)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Построение калибровочной кривой
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия крови
- •Лабораторная работа №30 Определение общего белка в сыворотке крови биуретовым методом (набором реагентов)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Построение калибровочного графика.
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия мочи
- •Лабораторная работа №31 Патологические компоненты мочи Качественные реакции на белок в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Определение глюкозы в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественные реакции на кровяные пигменты в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественная реакция на желчные пигменты в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественные реакции на ацетон и ацетоуксусную кислоту в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественная реакция на индикан в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Приложение Техника безопасности при работе в биохимических лабораториях
- •Способы взятия крови
- •Множители и приставки, применяемые для обозначений кратных и дольных единиц
- •Фотоколориметрия
- •Построение калибровочных кривых.
- •Подготовка фотоколориметра к работе.
- •Измерение коэффициента пропускания.
- •Разделение белков сыворотки методом электрофореза на бумаге
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •1. Электрофоретическое разделение белков сыворотки крови.
- •2. Окраска электрофореграмм.
- •3. Количественная оценка электрофореграмм.
- •Метод сахарной нагрузки
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Анализ гликемических кривых
- •Kлинико-диагностическое значение оценки гликемических кривых
- •Количественное определение кислотности желудочного сока
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Экспресс-методы обнаружения патологических компонентов мочи с помощью комбинированных тест-полосок
- •Xод работы
Федеральное агенство по образованИю
Белгородский государственный университет
Медицинский факультет
Лабораторный практикум по биологической химии
учебные указания к проведению лабораторных работ
по биологической химии для студентов второго курса
медицинского факультета
по специальностям: 060101 - Лечебное дело и 060103 - Педиатрия
БЕЛГОРОД 2006г
«___»___________20 г.
Напечатаны по решению редакционно-издательского совета университета
Составители:
Е.А.Шенцева, кандидат биологических наук,
Л.Р.Закирова, кандидат биологических наук.
Предисловие
Настоящие методические указания к проведению лабораторных работ по биологической химии написано сотрудниками кафедры биохимии и фармакологии Белгородского государственного университета доцентом Е.А.Шенцевой и старшим преподавателем Л.Р.Закировой. Методические указания составлены в полном соответствии с программой курса биологической химии, рекомендованной для студентов медицинских ВУЗов (Москва, 2000г.)
Методические указания содержат описание лабораторных работ по курсу биологической химии, выполняемых студентами II курса медицинского факультета на лабораторно-практических занятиях. В каждой лабораторной работе излагается краткая информация по изучаемой теме, принцип метода, ход эксперимента, советы по оформлению результатов и контрольные вопросы для закрепления изученного материала. Методические указания призваны помочь студенту овладеть на лабораторно-практических занятиях современными методами экспериментальных исследований, закрепить теоретические знания, приобретенные на лекциях, анализировать полученные результаты.
В основу методических указаний положен многолетний опыт проведения курса биологической химии на лабораторно-практических занятиях на кафедре биохимии и фармакологии Белгородского государственного университета.
Сотрудники кафедры будут признательны всем, кто пожелает высказать свои замечания, полезные советы и пожелания относительно содержания методических указаний.
Оглавление
биохимия простых белков 8
Лабораторная работа №1 8
Качественные цветные реакции на функциональные группы белков и аминокислот 8
Лабораторная работа №2 13
Реакции осаждения белков 13
биохимия Сложных белков (протеинов) 17
Лабораторная работа №3 18
Геминовая проба Тейхмана 18
Лабораторная работа №4 19
Выделение казеиногена из молока и открытие в нем фосфата 19
Лабораторная работа №5 20
Выделение муцина из слюны и открытие в нем углеводного компонента 20
биохимия ФЕРМЕНТов 21
Лабораторная работа №6 22
Количественное определение активности амилазы (по Вольгемуту) 22
Лабораторная работа №7 23
Специфичность действия амилазы слюны 23
Лабораторная работа №8 24
Влияние температуры на активность α-амилазы слюны 24
Лабораторная работа №9 25
Определение оптимума рН для действия α-амилазы слюны 25
Лабораторная работа №10 26
Влияние активаторов и ингибиторов на активность α-амилазы слюны 26
биохимия нуклеиновых кислот 27
Лабораторная работа №11 27
Кислотный гидролиз нуклеопротеинов дрожжей и определение состава нуклеиновых кислот 27
Изучение реакций окисления 28
Лабораторная работа №12 29
Открытие альдегиддегидрогеназы в молоке 29
Лабораторная работа №13 29
Обнаружение каталазы крови 29
Лабораторная работа №14 30
Открытие пероксидазы 30
Лабораторная работа №15 31
Получение тирозиназы и окисление тирозина в присутствии кислорода 31
Обмен углеводов 32
Лабораторная работа №16 32
Определение глюкозы в крови (набором реактивов «Глюкоза-ФКД») 32
Биохимия липидов 34
Лабораторная работа №17 34
Эмульгирование триацилглицеридов желчными кислотами 34
Лабораторная работа №18 35
Качественная реакция Петтенкоффера на желчные кислоты 35
Лабораторная работа №19 35
Определение содержания β-липопротеинов (липопротеинов низкой плотности) в плазме крови 35
Лабораторная работа №20 36
Качественные реакции на холестерол 36
биохимия белков 38
Лабораторная работа №21 38
Качественный анализ желудочного сока 38
Лабораторная работа №22 39
Определение активности аспартатаминотрансферазы( аланинаминотрансферазы) по методу Райтмана-Френкеля(набором реагентов) 39
Лабораторная работа №23 41
Определение мочевины в крови по реакции с диацетилмонооксимом (набором реагентов) 41
биохимия гормонов 43
Лабораторная работа №24 43
Качественная реакция на адреналин 43
Лабораторная работа №25 44
Обнаружение йодтиронинов 44
Витамины 45
Лабораторная работа №27 45
Качественные реакции на витамины 45
Биохимия печени 51
Лабораторная работа №27 52
Качественное определение «прямого» и «непрямого» билирубина в сыворотке крови 52
Лабораторная работа №28 52
Количественное определение содержания билирубина и его фракций в сыворотке крови 52
Лабораторная работа №29 54
Тимоловая проба (проба коллоидоустойчивости) 54
Биохимия крови 56
Лабораторная работа №30 56
Определение общего белка в сыворотке крови биуретовым методом (набором реагентов) 56
БИОХИМИЯ мочи 58
Лабораторная работа №31 58
Качественные реакции на белок в моче 58
Определение глюкозы в моче 60
Качественные реакции на кровяные пигменты в моче 60
Качественная реакция на желчные пигменты в моче 61
Качественные реакции на ацетон и ацетоуксусную кислоту в моче 62
Качественная реакция на индикан в моче 63
Приложение 65
Техника безопасности при работе в биохимических лабораториях 65
Способы взятия крови 65
Множители и приставки, применяемые для обозначений кратных и дольных единиц 66
Фотоколориметрия 66
Разделение белков сыворотки методом электрофореза на бумаге 67
Метод сахарной нагрузки 68
Количественное определение кислотности желудочного сока 70
Экспресс-методы обнаружения патологических компонентов мочи с помощью комбинированных тест-полосок 71