- •Федеральное агенство по образованИю
- •Оглавление
- •Биохимия простых белков
- •Лабораторная работа №1 Качественные цветные реакции на функциональные группы белков и аминокислот
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №2 Реакции осаждения белков
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия Сложных белков (протеинов)
- •Лабораторная работа №3 Геминовая проба Тейхмана
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №4 Выделение казеиногена из молока и открытие в нем фосфата
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №5 Выделение муцина из слюны и открытие в нем углеводного компонента
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия ферменТов
- •Лабораторная работа №6 Количественное определение активности амилазы (по Вольгемуту)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №7 Специфичность действия амилазы слюны
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №8 Влияние температуры на активность α-амилазы слюны
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №9 Определение оптимума рН для действия α-амилазы слюны
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №10 Влияние активаторов и ингибиторов на активность α-амилазы слюны
- •Биохимия нуклеиновых кислот
- •Лабораторная работа №11 Кислотный гидролиз нуклеопротеинов дрожжей и определение состава нуклеиновых кислот
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Изучение реакций окисления
- •Лабораторная работа №12 Открытие альдегиддегидрогеназы в молоке
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №13 Обнаружение каталазы крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №14 Открытие пероксидазы
- •Лабораторная работа №15 Получение тирозиназы и окисление тирозина в присутствии кислорода
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Обмен углеводов
- •Лабораторная работа №16 Определение глюкозы в крови (набором реактивов «Глюкоза-фкд»)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия липидов
- •Лабораторная работа №17 Эмульгирование триацилглицеридов желчными кислотами
- •Лабораторная работа №18 Качественная реакция Петтенкоффера на желчные кислоты
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №19 Определение содержания β-липопротеинов (липопротеинов низкой плотности) в плазме крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №20 Качественные реакции на холестерол
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Биохимия белков
- •Лабораторная работа №21 Качественный анализ желудочного сока
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №22 Определение активности аспартатаминотрансферазы( аланинаминотрансферазы) по методу Райтмана-Френкеля(набором реагентов)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Построение калибровочного графика
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №23 Определение мочевины в крови по реакции с диацетилмонооксимом (набором реагентов)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия гормонов
- •Лабораторная работа №24 Качественная реакция на адреналин
- •Лабораторная работа №25 Обнаружение йодтиронинов
- •Витамины
- •Лабораторная работа №27 Качественные реакции на витамины Жирорастворимые витамины
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Водорастворимые витамины
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Биохимия печени
- •Лабораторная работа №27 Качественное определение «прямого» и «непрямого» билирубина в сыворотке крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №28 Количественное определение содержания билирубина и его фракций в сыворотке крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Калибровочный график для определения билирубина крови
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №29 Тимоловая проба (проба коллоидоустойчивости)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Построение калибровочной кривой
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия крови
- •Лабораторная работа №30 Определение общего белка в сыворотке крови биуретовым методом (набором реагентов)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Построение калибровочного графика.
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия мочи
- •Лабораторная работа №31 Патологические компоненты мочи Качественные реакции на белок в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Определение глюкозы в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественные реакции на кровяные пигменты в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественная реакция на желчные пигменты в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественные реакции на ацетон и ацетоуксусную кислоту в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественная реакция на индикан в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Приложение Техника безопасности при работе в биохимических лабораториях
- •Способы взятия крови
- •Множители и приставки, применяемые для обозначений кратных и дольных единиц
- •Фотоколориметрия
- •Построение калибровочных кривых.
- •Подготовка фотоколориметра к работе.
- •Измерение коэффициента пропускания.
- •Разделение белков сыворотки методом электрофореза на бумаге
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •1. Электрофоретическое разделение белков сыворотки крови.
- •2. Окраска электрофореграмм.
- •3. Количественная оценка электрофореграмм.
- •Метод сахарной нагрузки
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Анализ гликемических кривых
- •Kлинико-диагностическое значение оценки гликемических кривых
- •Количественное определение кислотности желудочного сока
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Экспресс-методы обнаружения патологических компонентов мочи с помощью комбинированных тест-полосок
- •Xод работы
Лабораторная работа №25 Обнаружение йодтиронинов
Йодтиронины (тироксин, 3,5,31-трийодтиронин, а также нейодированный гормон-полипептид – кальцитонин) синтезируются и секретируются щитовидной железой. Все йодтиронины, за исключение кальцитонина являются производными аминокислоты тирозина.
Принцип метода. Метод основан на отщеплении при кислотном гидролизе тиреоидных гормонов (йодтиронины) йодистоводородной кислоты, при взаимодействии которой с йодатом калия выделяется свободный йод:
В хлороформе йод имеет фиолетовую окраску.
Исследуемый материал и реактивы
1. Тиреоидин (кристаллический). 2. Азотная кислота (концентрированная). 3. Раствор йодата калия (10%). 4. Хлороформ.
Ход работы
В пробирку помещают несколько кристаллов тиреоидина, добавляют 10 капель концентрированной азотной кислоты и нагревают 3-5 минут в кипящей водяной бане. Затем приливают 20 капель раствора йодата калия. Содержимое пробирки перемешивают и охлаждают. Далее прибавляют 15 капель хлороформа, встряхивают и наблюдают за изменением окраски.
Указания к оформлению лабораторной работы
В тетради для лабораторных работ запишите ход работы, полученный результат (окраска раствора) и сделайте вывод.
Контрольные вопросы
Какова химическая природа гормонов щитовидной железы?
Назовите механизм действия йодтиронинов в организме человека.
Назовите основные виды нарушений функции щитовидной железы.
Витамины
Витамины – жизненно необходимые низкомолекулярные органические вещества. Они требуются организму в очень малых количествах, поступают с пищей, частично синтезируются микрофлорой кишечника или клетками. Все витамины делят на жирорастворимые и водорастворимые. Активно вмешиваясь в обмен веществ в качестве коферментов в составе сложных ферментов, витамины могут оказывать положительный эффект при различных нарушениях метаболических процессов. Дефицит любого витамина ведет к появлению специфических нарушений реакций обмена с характерными клиническими проявлениями. Знание коферментных функций витаминов в организме позволяет понять механизмы развития и профилактики гипо- и авитаминозов и использовать витамины с профилактической и лечебной целью.
Качественные реакции на витамины позволяют обнаружить их наличие в лекарственных препаратах, продуктах питания, в лекарственных растениях. Принципы, положенные в основу качественных реакций на витамины, используются и при разработке количественного их определения. Определение концентрации витаминов в различных органах и тканях имеет практическое значение при установлении гипервитаминозов.
Лабораторная работа №27 Качественные реакции на витамины Жирорастворимые витамины
Качественная реакция на ретинолы (реакция с хлоридом сурьмы (III)).
Ретинол – циклический непредельный спирт, состоящий из шестичленного кольца и боковой цепочки, состоящее из двух остатков изопрена и первичной спиртовой группы в конце.
Ретинолы включают витамины группы А (антиксерофтальмические): А1 получен из печени морских рыб, А2 – из печени пресноводных рыб, а также их каротина, содержащегося в овощах и фруктах – предшественника витамина А2. Витамин А входит в состав зрительного пурпура – родопсина, накапливается в печени.
Принцип метода. Реакция основана на водоотнимающем действии хлорида сурьмы (III). При добавлении к ретинолу раствора хлорида сурьмы (III) образуется продукт присоединения, окрашенный в интенсивно синий цвет с максимумом поглощения света в области 620 нм. Эту реакцию используют для количественного определения ретинола спектрофотометрическим или фотоколориметрическим методом.