Калибровочный график для определения билирубина крови
Указания к оформлению лабораторной работы
В таблицу показателей норм основных клинико-биохимических исследований впишите нормальные значения концентрации билирубина в крови.
В тетради для лабораторных работ запишите ход работы, полученные результаты – концентрации общего и конъюгированного билирубина и сделайте выводы о причинах возможного отклонения этих показателей от нормы в исследуемом материале.
Контрольные вопросы
Назовите нормальную концентрацию билирубина в крови человека.
Перечислите причины гипербилирубинемии.
Для каких целей в клинике определяют количественное содержание билирубина в крови человека?
Лабораторная работа №29 Тимоловая проба (проба коллоидоустойчивости)
В клинико-диагностических лабораториях широко используют методы, при которых простыми коллоидными реакциями косвенно обнаруживаются изменения в составе белков сыворотки крови (диспротеинемические тесты). Все эти методы основываются на изменениях, наступающих в коллоидной устойчивости сыворотки, поэтому получили известность под названием проб коллоидной устойчивости (или проб на лабильность белков сыворотки). Поскольку нарушение коллоидной устойчивости сыворотки под действием какого-либо реактива выражается сначала коагуляцией (склеиванием), а затем флокуляцией (осаждением), коллоидно-устойчивые пробы именуются нередко коагуляционными или флокуляционными (коллоидно-осадочными).
Лабильность сывороточных белков во многом зависит от соотношения между альбуминами (гидрофильными, защитными коллоидами) и глобулинами. Установлено, что положительный результат коллоидно-химических проб чаще всего вызывается количественными изменениями в глобулиновых фракциях (, , ), или изменением соотношения альбумины/глобулины, т.е. он связан с увеличением содержания глобулинов. Либо с уменьшением уровня альбуминов.
Тимоловая проба более пригодна для функционального исследования печени, чем другие коллоидно-устойчивые пробы. Считают, что она положительна в 90-100% случаев болезни Боткина (уже в преджелтушной ее стадии и при безжелтушной форме) и при токсическом гепатите. Реакция положительна при послегепатитном и постнекротическом, особенно желтушном циррозе. В отличие от других форм циррозов, при коллагеновых заболеваниях, малярии и вирусных инфекциях. При механической желтухе она (в 75% случаев) отрицательна, что имеет дифференциально-диагностическое значение.
Принцип метода. Сывороточные β-глобулины, γ-глобулины и липопротеиды осаждаются при рН=7,55 тимоловым реактивом. В зависимости от количества и взаимного соотношения отдельных белковых фракций при реакции возникает помутнение, интенсивность которого измеряют турбодинамически.
Считают, что причиной помутнения тимоловой пробы является взаимодействие коллоидных частиц тимола и некоторых крупнодисперсных белков: -глобулинов и -липопротеидов. По представлению Маклагана, который предложил эту пробу в 1944 году, эта реакция связана с образованием глобулин-тимол-липидного комплекса (содержащего 40% глобулинов, 32% тимола, 18% холестерина и 10 % фосфолипидов).