Указания к оформлению лабораторной работы

В тетради для лабораторных работ запишите ход работы, принцип метода, составьте таблицу для записи реакций окрашивания содержимого всех пробирок с йодом и рассчитайте амилокластическую силу слюны исследуемого.

№ п/п	Количество 0,1% раствора крахмала, мл	Разведение слюны	Температура	Время течения реакции	Окрашивание с йодом	Амилокластическая сила слюны

Контрольные вопросы

1. Назовите субстрат α-амилазы слюны и продукты, образующиеся под ее действием.

2. В чем выражается амилазная активность слюны?

3. Напишите уравнение реакции гидролиза крахмала под действием ферментов слюны.

Лабораторная работа №7 Специфичность действия амилазы слюны

Одно из наиболее характерных свойств ферментов – их высокая специфичность. Ферменты специфичны в отношении как типа катализируемых реакций, так и субстратов, на которые они воздействуют. По специфичности действия ферменты делят на 4 группы: обладающие абсолютной (субстратной) специфичностью, относительной (групповой) специфичностью, стереоспецифичностью и специфичностью путей превращения.

Принцип метода. Амилаза слюны обладает групповой специфичностью, т.е. ускоряет гидролиз только полисахаридов, не оказывая действия на дисахариды. При гидролизе крахмала под действием амилазы слюны до промежуточных или конечных продуктов в них открывается свободная альдегидная группа, которой нет в дисахаре сахарозе. Поэтому сахароза в отличие от мальтозы не дает положительной реакции Троммера. Реакция Троммера может быть положительной только в том случае если сахароза расщепиться на свои составляющие – глюкозу и фруктозу.

Исследуемый материал и реактивы

1. Слюна в разведении 1:5. 2. Раствор крахмала (1%). 3. Раствор сахарозы (1%). 4. Гидроксид натрия (10%). 5. Сернокислая медь (II) (1%). 6. 0,1%раствор йода в 0,2% йодистом калии.

Ход работы

В две пробирки наливают по 1 мл раствора амилазы слюны (разведенной в 5 раз) и в первую добавляют 1 мл крахмала, а во вторую – 1 мл раствора сахарозы. Пробы выдерживают в термостате 15 мин при 37-40⁰С. Затем с пробами проделывают две качественные реакции: на крахмал и на продукты гидролиза.

А. Реакция на крахмал. К 5 каплям исследуемого раствора приливают 1 каплю раствора йода в йодистом калии. В присутствии крахмала появляется синее окрашивание.

Б. Реакция Троммера. К 5 каплям исследуемой жидкости добавляют 0,5 мл раствора сульфата меди (II) и прибавляют по каплям (до появления темно-голубого осадка) раствор гидроксида натрия. Далее пробирку с содержимым нагревают и наблюдают за появлением окраски. Наличие кирпично-красного окрашивания (оксид меди I) указывает на присутствие глюкозы (свободного гликозидного гидроксила).

Указания к оформлению лабораторной работы

В тетради для лабораторных работ запишите ход работы, принцип метода, зарисуйте полученные результаты (окрашивание проб) и сделайте вывод о специфичности действия амилазы слюны.