- •Федеральное агенство по образованИю
- •Оглавление
- •Биохимия простых белков
- •Лабораторная работа №1 Качественные цветные реакции на функциональные группы белков и аминокислот
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №2 Реакции осаждения белков
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия Сложных белков (протеинов)
- •Лабораторная работа №3 Геминовая проба Тейхмана
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №4 Выделение казеиногена из молока и открытие в нем фосфата
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №5 Выделение муцина из слюны и открытие в нем углеводного компонента
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия ферменТов
- •Лабораторная работа №6 Количественное определение активности амилазы (по Вольгемуту)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №7 Специфичность действия амилазы слюны
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №8 Влияние температуры на активность α-амилазы слюны
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №9 Определение оптимума рН для действия α-амилазы слюны
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №10 Влияние активаторов и ингибиторов на активность α-амилазы слюны
- •Биохимия нуклеиновых кислот
- •Лабораторная работа №11 Кислотный гидролиз нуклеопротеинов дрожжей и определение состава нуклеиновых кислот
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Изучение реакций окисления
- •Лабораторная работа №12 Открытие альдегиддегидрогеназы в молоке
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №13 Обнаружение каталазы крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №14 Открытие пероксидазы
- •Лабораторная работа №15 Получение тирозиназы и окисление тирозина в присутствии кислорода
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Обмен углеводов
- •Лабораторная работа №16 Определение глюкозы в крови (набором реактивов «Глюкоза-фкд»)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия липидов
- •Лабораторная работа №17 Эмульгирование триацилглицеридов желчными кислотами
- •Лабораторная работа №18 Качественная реакция Петтенкоффера на желчные кислоты
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №19 Определение содержания β-липопротеинов (липопротеинов низкой плотности) в плазме крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №20 Качественные реакции на холестерол
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Биохимия белков
- •Лабораторная работа №21 Качественный анализ желудочного сока
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №22 Определение активности аспартатаминотрансферазы( аланинаминотрансферазы) по методу Райтмана-Френкеля(набором реагентов)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Построение калибровочного графика
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №23 Определение мочевины в крови по реакции с диацетилмонооксимом (набором реагентов)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия гормонов
- •Лабораторная работа №24 Качественная реакция на адреналин
- •Лабораторная работа №25 Обнаружение йодтиронинов
- •Витамины
- •Лабораторная работа №27 Качественные реакции на витамины Жирорастворимые витамины
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Водорастворимые витамины
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Биохимия печени
- •Лабораторная работа №27 Качественное определение «прямого» и «непрямого» билирубина в сыворотке крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №28 Количественное определение содержания билирубина и его фракций в сыворотке крови
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Калибровочный график для определения билирубина крови
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Лабораторная работа №29 Тимоловая проба (проба коллоидоустойчивости)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Построение калибровочной кривой
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия крови
- •Лабораторная работа №30 Определение общего белка в сыворотке крови биуретовым методом (набором реагентов)
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Построение калибровочного графика.
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Биохимия мочи
- •Лабораторная работа №31 Патологические компоненты мочи Качественные реакции на белок в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Определение глюкозы в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественные реакции на кровяные пигменты в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественная реакция на желчные пигменты в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественные реакции на ацетон и ацетоуксусную кислоту в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Качественная реакция на индикан в моче
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Указания к оформлению лабораторной работы
- •Контрольные вопросы
- •Приложение Техника безопасности при работе в биохимических лабораториях
- •Способы взятия крови
- •Множители и приставки, применяемые для обозначений кратных и дольных единиц
- •Фотоколориметрия
- •Построение калибровочных кривых.
- •Подготовка фотоколориметра к работе.
- •Измерение коэффициента пропускания.
- •Разделение белков сыворотки методом электрофореза на бумаге
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •1. Электрофоретическое разделение белков сыворотки крови.
- •2. Окраска электрофореграмм.
- •3. Количественная оценка электрофореграмм.
- •Метод сахарной нагрузки
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Анализ гликемических кривых
- •Kлинико-диагностическое значение оценки гликемических кривых
- •Количественное определение кислотности желудочного сока
- •Исследуемый материал и реактивы
- •Ход работы
- •Экспресс-методы обнаружения патологических компонентов мочи с помощью комбинированных тест-полосок
- •Xод работы
Исследуемый материал и реактивы
1. Клубень сырого картофеля. 2. Вода. 3. Раствор тирозина (0,1%) или раствор адреналина (0,1%). 4. Марля.
Ход работы
А. Получение тирозиназы из картофеля. 1г картофеля растирают в ступке с 3 мл воды и процеживают через двойной слой марли.
Б. Окисление тирозина кислородом воздуха в присутствии тирозиназы. В две пробирки наливают по 1 мл вытяжки из картофеля, содержащей фермент тирозиназу. Содержимое одной пробирки кипятят 1-2 мин и охлаждают в стакане с холодной водой. В обе пробирки добавляют по 5-10 капель 0,1% раствора тирозина, перемешивают и обе пробирки помещают в баню при 40-450С. Каждые 5 мин пробирки вынимают и содержимое их сильно встряхивают. Жидкость в пробирке с активной вытяжкой постепенно принимает сначала розовую, затем бурую и черную окраску. В контрольной пробе с прокипяченной вытяжкой цвет жидкости не изменяется.
Аналогичную работу можно проделать, взяв вместо тирозина 0,1% раствор адреналина.
Указания к оформлению лабораторной работы
В тетради для лабораторных работ запишите ход работы, зарисуйте полученные окраски проб, запишите химизм реакции и сделайте выводы.
Контрольные вопросы
К какому классу ферментов относится тирозиназа?
Какова биологическая роль фермента тирозиназы у человека?
Обмен углеводов
Углеводы наряду с белками – наиболее распространенные соединения, участвующие в построении клетки и используемые в процессе её жизнедеятельности. Углеводами называют полигидроксикарбонильные соединения, содержащие альдегидную или кетонную группу либо образующие их при гидролизе.
Углеводам в организме принадлежат разнообразные функции: энергетическая, структурная, опорная, защитно-механическая, гидроосмотическая, кофакторная.
С углеводами связаны многие эффекты лекарственной терапии. В медицинской практике углеводы и их производные широко используют как фармпрепараты, как вспомогательные вещества при приготовлении различных лекарственных форм (глюкоза, фруктоза, сахароза, лактоза, крахмал, пектины, целлюлоза и др.) и как плазмозаменяющие растворы на основе декстрана (полиглюкин, реополиглюкин, реоглюман, рондекс и др.).
Лабораторная работа №16 Определение глюкозы в крови (набором реактивов «Глюкоза-фкд»)
Содержание глюкозы в крови – основной биохимический показатель состояния углеводного обмена. Нормальная концентрация глюкозы в крови – 3,5-5,5 (6,4)ммоль/л. Отклонение его от нормы происходит при ряде заболеваний.
Увеличение содержания глюкозы в крови (гипергликемия) наблюдается при сахарном диабете, остром панкреатите, панкреатических циррозах, эмоциональных стрессах, после эфирного наркоза, обильного приема углеводов с пищей, а также при повышении гормональной активности ряда желез (щитовидной, гипофиза, коркового и мозгового слоя надпочечников).
Снижение уровня глюкозы в крови (гипогликемия) встречается при поражении паренхимы печени, нарушении ферментативной активности при распаде гликогена; недостаточной функции щитовидной железы, надпочечников, гипофиза; передозировке инсулина при лечении сахарного диабета, нарушении всасывания углеводов, отравлениях фосфором, бензолом, хлороформом, при недостатке приема с пищей углеводов, после больших потерь крови.
Принцип метода. В основе метода лежит ферментативное окисление глюкозы кислородом воздуха при участии фермента глюкозооксидазы. При этой реакции образуется перекись водорода в количестве эквимолярном окисленной глюкозе. Перекись водорода в присутствии пероксидазы крови окисляет добавленный σ-толуидин, который приобретает синее окрашивание. Интенсивность возникшей окраски прямо пропорциональна концентрации глюкозы и определяется на фотоэлектроколориметре. Метод специфичен для глюкозы.