Исследуемый материал и реактивы

1. Сыворотка крови. 2. Тимоловый реактив. 3. Физиологический раствор натрия хлористого. 4. Раствор сравнения 1: серная кислота 0,01 моль/л. 5. Раствор сравнения 2: барий хлористый 0,3 ммоль/л, серная кислота 0,097 моль/л.

Ход работы

В трех пробирках готовят растворы в соответствии с таблицей:

Отмерить (мл)	Проба, мл	Контрольный раствор I, мл	Контрольный раствор II, мл
Сыворотка крови	0,05	-	0,05
Тимоловый реактив	3,00	3,00	-
Физиологический раствор	-	0,05	3,00

Растворы перемешивают и оставляют стоять точно 30 мин при (+15-+25^оС). Потом снова перемешивают и измеряют экстинкцию пробы и контрольного раствора I против контрольного раствора II (длина волны 620-660нм) в кювете с толщиной слоя 10мм.

Построение калибровочной кривой

Из раствора сравнения 1 и 2 разбавлением приготавливают растворы с помутнением, соответствующим (5-20) единицам помутнения по Shank-Hoagland (ед. S-H) в соответствии с таблицей:

Раствор №	Раствор сравнения 1, мл	Раствор сравнения 2, мл	Единицы помутнения
1	4,50	1,50	5
2	3,00	3,00	10
3	1,50	4,50	15
4	-	6,00	20

В четырех пробирках смешивают раствор сравнения 1 с раствором сравнения 2 и точно через 30 мин содержимое пробирок тщательно перемешивают, после чего измеряют экстинкцию растворов против дистиллированной воды. Измерение проводят при такой же длине волны, как и при измерении пробы.

Строят график, на оси абсцисс откладывая единицы помутнения, а на оси ординат соответствующие им значения экстинкции. Выводят кривые зависимости величины экстинкции от единиц помутнения. Определив экстинкцию исследуемой пробы и контрольного раствора I, находим по графику каким единицам помутнения соответствуют их оптические плотности.

Рассчитываем результат по формуле:

Т=Е_д1–Е_д2, где

Т – единицы тимоловой пробы; Е_д1 – единицы помутнения, соответствующие оптической плотности пробы; Е_д2 – единицы помутнения, соответствующие оптической плотности контрольного раствора I.

Указания к оформлению лабораторной работы

В таблицу показателей норм основных клинико-биохимических исследований впишите нормальные значения единиц тимоловой пробы.

В тетради для лабораторных работ запишите ход работы, полученные результаты (единицы помутнения) и сделайте выводы.

Контрольные вопросы

1. Назовите известные Вам белки крови человека.

2. Назовите автора, который предложил тимоловую пробу.

3. Для характеристики функционирования какого органа наиболее пригодна Тимоловая проба?