Контрольные вопросы
Чем обусловлены реакции осаждения белков?
При каких температурных условиях возможно осаждение белков?
Что такое денатурация белков? Чем она может быть вызвана?
Каковы должны быть Ваши действия при отравлении человека солями тяжелых металлов, основанные на необратимых реакциях осаждения белков?
Биохимия Сложных белков (протеинов)
Сложные белки относятся к смешанным макромолекулам – белок-небелковым комплексам, которые содержат два компонента – простой беок и небелковый компонент, соединенные между собой ковалентными или слабыми (ионными, водородными, вандервальсовыми, фосфоэфирными и др.) связями. Небелковый компонент называется – простетическая группа. К сложным белкам относятся: нуклеопротеины, хромопротеины, фосфопротеины, гликопротеины, липопротеины, сложные белки-ферменты, металлопротеины.
Лабораторная работа №3 Геминовая проба Тейхмана
Качественные реакции на небелковую часть гемопротеинов позволяют выявить структурные компоненты (геминовую группировку и входящее в ее состав железо) в биологическом материале. Пробой Тейхмана пользуются в судебно-медицинской экспертизе для доказательства наличия кровяных пятен. Эта проба заключается в образовании кристаллического солянокислого гемина при действии на кровь уксусной кислоты и хлорида натрия. Гемин отличается от гема наличием трехвалентного железа, соединенного с атомом хлора.
Принцип метода. При нагревании крови с ледяной уксусной кислотой гемоглобин распадается на гем и глобин. Если гидролиз крови проводить в присутствии уксусной кислоты и хлорида натрия, гемм превращается в солянокислую соль – гемин. Образуются характерные кристаллы солянокислого гемина.
Исследуемый материал и реактивы
1. Кровь. 2. Спирт 3. Вата. 4. Скарификаторы. 5. Предметные и покровные стекла. 6. Раствор хлорида натрия (0,9%). 7. Концентрированная уксусная кислота.
Ход работы
К
аплю
свежей крови помещают на предметное
стекло и дают ей высохнуть на воздухе.
К подсушенной крови добавляют 1-2 капли
0,9% раствора хлорида натрия; тщательно
перемешивают стеклянной палочкой,
далее, туда добавляют 1-2 капли
концентрированной уксусной кислоты и
еще раз тщательно перемешивают стеклянной
палочкой, покрывают покровным стеклом
и осторожно нагревают до начала кипения
(не кипятить!). При этом предметное стекло
следует держать высоко над пламенем
горелки, чтобы избежать выкипания
жидкости. Затем препарат охлаждают и
рассматривают под микроскопом
образовавшиеся при разрушении гемоглобина
кристаллы солянокислого гемина, имеющие
форму ромбоидальных палочек (смотри
рисунок).
Если обнаружить кристаллы не удается, то приподнимают покровное стекло, добавляют 2-3 капли концентрированной уксусной кислоты, нагревают и после охлаждения вновь исследуют под микроскопом.
Указания к оформлению лабораторной работы
В тетради для лабораторных работ запишите ход работы, зарисуйте наблюдаемую картину в поле зрения и сделайте выводы об исследуемом веществе.
Контрольные вопросы
Что является простетической группой молекулы гемоглобина?
Какова степень окисления железа в геме и гемине?
Может ли геминовое железо присоединять кислород?