2. Иммунный статус человека

Иммунный статус - это совокупность показателей, отражающих функциональное состояние иммунной системы в момент обследования.

Иммунный статус всегда относителен, но является условной основой для клинической интерпретации иммунопатогенеза, построения иммунологического диагноза и прогноза, а также проведения иммунотерапии, иммунопрофилактики и иммунореабилитации.

Поскольку иммунная система многокомпонентна и чутко реагирует на изменение антигенного гомеостаза, то естественно ожидать, что в различных ситуациях у одного и того же человека могут отмечаться значительные колебания иммунологических параметров. Таких ситуаций четыре:

1. Функциональный “покой”, фон.

2. Функциональная дозированная нагрузка.

3. Адаптация к действию известных факторов.

4. Патологический процесс (с учетом формы, фазы, тяжести).

Для каждой ситуации существуют или разрабатываются свои “нормы”, без учета которых оценка иммунного статуса становится бессмысленной. Для интерпретации фонового иммунного статуса наиболее важны следующие “нормы”:

1.Фено-генотипическая (индивидуальная).

2. Половая.

3. Возрастная.

4. Этническая.

5. Географическая.

6. Экологическая.

7. Ритмологическая (суточная-циркадная, недельная, месячная, сезонная, годовая).

Исследование параметров иммунной системы имеет важное значение для уточнения диагноза, разрешения вопросов патогенеза заболевания, выявления нарушений иммунного ответа, коррекции получаемого лечения, разработки программ реабилитации воспалительного процесса.

Утвержден комплекс лабораторных иммунологических тестов для использования в клинической практике врачей разных специальностей.

Иммунологические тесты разделены на 2 уровня согласно технической сложности, времени исполнения, значения в интерпретации иммунологических нарушений.

2.1. Уровни оценки иммунного статуса

Оценка иммунного статуса предполагает двухэтапное (или двухуровневое) обследование.

I уровень- иммунологический скрининг (мониторинг) - включает в себя определние общего количества лейкоцитов, относительного и абсолютного количества лимфоцитов и других форменных элементов крови, общего количества (относительного и абсолютного) Т- и В-лимфоцитов, концентрации IgM, IgG, IgA и проведение теста на фагоцитоз (например, НСТ-тест с нейтрофилами или оценку поглотительной активности нейтрофилов).

II уровень- аналитический, включает определение мембраных маркеров тех или иных субпопуляций лимфоцитов и лейкоцитов, оценку функциональной активности иммунокомпетентных клеток в связи с воздействием митогенов, антигенов; исследование продукции цитокинов в культуре клеток; оценку рецепторного аппарата клеток; субклассов иммуноглобулинов; анализ общего и антигенспецифического IgE; анализ на наличие тех или иных антител; проведение кожных проб с антигенами и др.

Тесты I уровня просты, экономичны, не требуют сложного лабораторного оборудования, отражают неспецифические закономерности реакций иммунной системы, позволяют выявлять достаточно грубые дефекты иммунной системы и судить о типичных иммунопатологических процессах. Тесты II уровня - это более детальное и углубленное исследование параметров иммунной системы. II уровень иммунологических исследований требует развертывания специальной лаборатории, предполагает высокую квалификацию врача-лаборанта и наличие материальной базы. Аналитические тесты II уровня назначаются избирательно в зависимости от клинических симптомов конкретного пациента.

Двухуровненвое исследование иммунного статуса предполагает оценку следующих параметров -

I уровень:

- абсолютное и относительное количество лейкоцитов;

• абсолютное и относительное количество лимфоцитов;

• абсолютное и относительное количество Т-лимфоцитов (CD3+, проточная цитометрия);

• абсолютное и относительное количество В-лимфоцитов (СD19+, CD22+-, проточная цитометрия);

• концентрация IgG, IgM, IgA (радиальная иммунодиффузия);

• фагоцитоз частиц латекса (фагоцитарный показатель, поглотительная активность);

• микробицидная активность кислородозависимых систем нейтрофилов (НСТ -тест);

• уровень циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК, преципитация с ПЭГ-6000);

• общая активность комплемента (по 50% гемолизу сенсибилизированных БЭР).

II уровень:

• Т-лимфоциты (CD3+, проточная цитометрия);

• Т-хелперы (CD4+, проточная цитометрия);

• Т-цитотоксические (СD8+, проточная цитометрия);

• В-лимфоциты (СD19+, CD22+-, СD72+, проточная цитометрия);

• NK- лимфоциты (СD16+, CD56+, проточная цитометрия);

• моноциты (CD14+, проточная цитометрия);

• Ig E (ИФА);

• антитела к тиреоглобулину (ИФА);

• ревматоидный фактор (ИФА);

• пролиферативный ответ Т- и В- лимфоцитов на митогены

• компоненты комплемента (С1, С3 и др., ИФА)

• цитокины (IL1,IL4, IL5 и др., ИФА).

2.2. Методы оценки параметров иммунного статуса.

Т-лимфоциты (CD3+-клетки).

Современными методами оценки содержания Т-лимфоцитов и других субпопуляций иммунокомпетентных клеток являются методы, основанные на использовании моноклональных антител к CD-маркерам (лимфоцитотоксический тест, иммунофлуоресцентный тест, проточная цитометрия). Общим Т-клеточным маркером является CD3-антиген, популяцию хелперных клеток определяют с использованием CD4-моноклональных антител, цитотоксические Т-клетки маркируют CD8-моноклональными антителами. Норма:

- относительное содержание CD3+- (65-79) %, - абсолютное содержание (1100 – 1700) кл/мкл или (1,1 – 1,7)  10 ⁹/л Причины повышения содержания Т-лимфоцитов: 1. Лимфопролиферативные заболевания. 2. Реакции гиперчувствительности замедленного типа - ГЗТ.

3. Реконвалесценция (выздоровление). Причины снижения содержания Т-лимфоцитов: 1. Вирусные, грибковые, паразитарные хронические инфекции 2.Опухоли 3. Стресс 4. Травма 5. Ожоги 6. Кровоизлияния 7. Некоторые формы аллергии.

Норма CD4+-клеток (Т-хелперы):

- относительное содержание 39 - 50 %, - абсолютное содержание 600 - 1000 кл/мкл или 0,6 - 1,0 ∙ 10 ⁹/л Причины повышения содержания Т-хелперов: 1. Инфекция. 2. Аллергия. 3. Аутоиммунные заболевания (системная красная волчанка, ревматоидный артрит, васкулиты, гемолитическая анемия, аутоиммунные гломерулонефриты и др.). Причины снижения содержания Т-хелперов:

1. Иммунодефицитные состояния. 2. СПИД. 3. Цитомегаловирусная инфекция.

В-лимфоциты (CD19+-клетки). Для выделения В-лимфоцитов из общей популяции лимфоцитов используют моноклональные антитела CD19, 21, 22, 23, 72, 79. Норма:

- относительное содержание 3 - 15 %; - абсолютное содержание 40 - 400 кл/мкл или 0,04 - 0,4 ∙ 10 ⁹/л. Причины повышения содержания В-лимфоцитов: 1. Бактериальные инфекции. 2. Аутоиммунные заболевания. 3. Аллергические заболевания. 4. Лимфолейкозы. 5. Миеломная болезнь. Причины снижения содержания В-лимфоцитов: 1.Недостаточность гуморального иммунитета. 2. Опухоли.

Исследование функционального состояния лимфоцитов.

Для определения функционального состояния лимфоцитов исследуют способность этих клеток размножаться в ответ на введение митогенов (веществ, стимулирующих размножение) в реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) с ФГА – митогеном для Т-клеток. Снижение пролиферативного ответа на ФГА свидетельствует о наличии иммунодефицита, однако причины его могут быть различными. Повышение пролиферативного ответа на ФГА может свидетельствовать о наличии инфекции или какой-либо аутоиммунной патологии.

Оценка функционального состояния фагоцитов.

Фагоцитарную активность оценивают с помощью методов, позволяющих определить долю клеток, способных формировать внутри себя "пищеварительный пузырек" - фагосому. Антигенный материал - частицы латекса, эритроциты, тест-культуры бактерий (например, кишечной палочки). Под понятием "фагоцитарный индекс" (норма- 40-80 %) подразумевается процент нейтрофилов с поглощенным антигенным материалом. Для оценки кислородозависимой микробицидной способности нейтрофилов используют НСТ-тест (НСТ - краситель нитросиний тетразолий). Поглощение фагоцитами микробов сопровождается повышением потребления кислорода этими клетками и образованием перекиси водорода и свободных радикалов кислорода (те и другие можно объединить под названием - активные формы кислорода - АФК). Суть реакции состоит в том, что НСТ в присутствии АФК окрашивается в синий цвет, а в отсутствии АФК остается бесцветным (норма- 5-12%).

Причины повышения фагоцитарной активности лейкоцитов: - острые бактериальные инфекции;

- постоперационный период. Причины снижения фагоцитарной активности лейкоцитов: - иммунодефициты врожденные; - хронические инфекции; - аутоиммунные заболевания; - аллергические заболевания; - вирусные инфекции; - СПИД.

Сывороточные антитела определяют методом радиальной иммунодиффузии.

Норма для IgA: 0,7 – 3.1 г/л Причины повышения содержания IgA: - острые инфекции на слизистых верхних дыхательных путей; - гепатиты, холециститы, билиарный цирроз;

- саркоидоз; - аутоиммунные заболевания с локализацией процесса в легких или в кишечнике; - IgA нефропатия. Причины снижения содержания IgA: - хронические заболевания (особенно респираторного и желудочно-кишечного тракта, мочеполовой системы);

- иммунодефициты; - туберкулез; - опухоли. Норма для IgM: 0,8 - 2,56 г/л Причины повышения содержания IgM:

- активация первичного иммунного ответа на антиген в первые 5 дней; - инфекции (острые или обострения хронических); - аутоиммунные заболевания, особенно ревматоидный артрит. Причины снижения содержания IgM: - иммунодефициты первичные и вторичные.

Норма для IgG: 8,0 - 16,8 г/л Причины повышения содержания IgG: - специфические антитела в иммунном ответе с 5-7 до 21 дня;

- иммунопатологические реакции на основе II и III типа повреждения тканей; - аутоиммунные заболевания.

Причины снижения содержания IgG: - иммунодефициты первичные и вторичные. Норма для IgE: 20 - 100 Ке/л Содержание Ig E повышается при различных видах аллергии, паразитозах.