Cодержание гемоглобина в эритроцитах Цветовой показатель

О содержании в эритроцитах гемоглобина судят по так называемому цветовому показателю, или фарб-индексу (Fi, от farb — цвет, index — по­казатель), — относительной величине, характеризующей насыщение в среднем одного эритроцита гемоглобином.

Fi — это процентное соотно­шение гемоглобина и эритроцитов; при этом за 100 % (или единиц) гемо­глобина условно принимают величину, равную 166,7 г/л, а за 100 % эрит­роцитов 510¹²/л. Если у человека содержание гемоглобина и эритроцитов равно 100 %, то цветовой показатель равен 1.

В норме Fi колеблется в пре­делах от 0,75 до 1,0 и очень редко может достигать 1,1. В этом случае эрит­роциты носят название нормохромных. Если Fi менее 0,7, то такие эритро­циты недонасыщены гемоглобином и называются гипохромными. При Fi больше 1,1 эритроциты именуют гиперхромными. В этом случае объем эритроцита значительно увеличивается, что позволяет ему содержать боль­шую концентрацию гемоглобина.

Среднее содержание гемоглобина в эритроците

В последние годы определяют не цветовой по­казатель, а среднее содержание гемоглобина в одном эритроците (СГЭ).

Значение СГЭ находят путем деления содержания гемоглобина в определенном объеме крови на число эритроцитов в том же объеме. В среднем СГЭ у муж­чин и женщин практически одинаково и колеблется в пределах 28—33 пг.

Гемолиз эритроцитов.

Гемолизом называется выход гемоглобина в плазму в результате разры­ва оболочки эритроцитов. В искусственных условиях гемолиз может быть вызван помещением эритроцитов в гипотонический раствор.

Определение осмотической резистентности эритроцитов

Степень устойчивости эритроцитов в гипотоническом растворе оценивается как их осмотическая резистентность (устойчивость). Различают минимальную и максимальную границы осмотической резистентности. Для здоровых лю­дей минимальная граница соответствует раствору, содержащему 0,42 — 0,48 % NaCl, полный же гемолиз (максимальная граница) происходит при концентрации 0,30—0,34 % NaCl.

Причины гемолиза. Гемолиз может быть вызван химическими агентами (хлороформ, эфир, сапонин и др.), разрушающими мембрану эритроцитов. В клинике нередко встречается гемолиз при отравлении уксусной кисло­той. Гемолизирующими свойствами обладают яды некоторых змей {биоло­гический гемолиз).

При сильном встряхивании ампулы с кровью также наблюдается разру­шение мембраны эритроцитов — механический гемолиз. Механический ге­молиз иногда возникает при длительной ходьбе из-за травмирования эрит­роцитов в капиллярах стоп.

Если эритроциты заморозить, а потом отогреть, то возникает термиче­ский гемолиз. Наконец, при переливании несовместимой крови и наличии аутоантител к эритроцитам развивается иммунный гемолиз. Последний яв­ляется причиной возникновения анемий и нередко сопровождается выде­лением гемоглобина и его производных с мочой (гемоглобинурия).

37. Лейкоциты. Лейкоцитарная фор­мула. Лейкон. Лейкопоэз.

38.Тромбоциты: строение, количество, формы, функции.Система мегакариоцит-тромбоцит.

39. Группы крови. Резус-принадлежность. Переливание крови. Кровезамещающие растворы.

Определение групп крови системы ab0 с использованием цоликлонов

Определение группы крови при по­мощи цоликлонов анти-А и анти-В позволяет выявить наличие антигенов (агглютиногенов) А и В.

Цоликлоны анти-А и анти-В являются продуктом гибридомных клеточных линий, полученных в результате слияния мышиных антителообразующих В‑лимфоцитов с клетками мышиной миеломы. Цоликлоны не содержат антител иной специфичности и поэтому не вызывают неспецифической полиагглютинации эритроцитов. Время наступления реакции агглютинации и ее выраженность у цоликлонов выше, чем у гемагглютинирующих АВ0-сывороток.

На планшет или пластину индивидуаль­ными пипетками наносятся цоликлоны анти-А и анти-В по одной большой капле (0,1 мл) под соответствующими надписями. Рядом с каплями антител наносится по одной маленькой капле (0,01 — 0,03 мл) исследуемой крови, смешивают кровь с реагентом.

Наблю­дайте за ходом реакции с цоликлонами визуально при легком покачивании пластины или планшета в течение 3 мин.

Агглюти­нация эритроцитов с цоликлонами обычно наступает в первые 3 – 6 с, однако наблюдение следует вести 3 мин ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.

Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в аг­глютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты видны не­вооруженным взглядом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции кап­ля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.

Интерпретация результатов реакции агглютинации исследуемой крови с цоликлонами представлена в табл. 3.2.

Таблица 3.2

Интерпретация результатов определения группы крови системы AB0 с использованием цоликлонов

Результат реакции с цоликлоном			Группа исследуемой крови
анти-А	анти-В
-	-	0 (I)
+	-	А (II)
-	+	В(III)
+	+	AB(IV)

Примечание: знаком (+) обозначено наличие агглютинации, знаком (-) отсутствие агглютинации

В составе цоликлонов нет высокомолекулярных добавок, спо­собных вызвать неспецифическую полиагглютинацию эритроци­тов, поэтому не требуется проведения контроля с растворителем.

При положительном результате реакции агглютинации со всеми цоликлонами необходимо исключить спонтанную неспецифическую агглютинацию исследуемых эритроцитов. Для этого смешайте на плоскости одну каплю исследуемой крови (эритроцитов) с каплей изотонического раствора хлорида на­трия. Кровь можно отнести к группе АВ (IV) только при отсут­ствии агглютинации эритроцитов в изотоническом растворе на­трия хлорида.