Определение группы крови системы ab0 человека по стандартным гемагглютинирующим сывороткам

Цоликлоны анти-А и анти-В предназначены для определения группы крови системы AB0 человека вместо стандартных гемагглютинирующих сывороток.

Определение групп крови системы ab0 с использованием стандартных эритроцитов

Наличие антител (агглютини­нов) и β определяется в плазме исследуемой крови стандартны­ми эритроцитами.

Определение резус-принадлежности

Определение резус-принадлежности заключается в выявлении в эритроцитах крови человека наличия или отсутствия особого белка (антигена), названного резус-фактором.

Выделяют три разновидности резус‑антигена: D, С, Е. Наи­большей активностью обладает антиген D, поэтому именно его определение имеет важное значение. Группы крови, в которых содержится антиген Rh(D), условно принято считать резус-поло­жительными (Rh+), а группы крови, не содержащие антигена Rh(D), — резус-отрицательными (Rh-).

Для определения резус-фактора в настоящее время использу­ют стандартную сыворотку, содержащую определенный титр аг­глютининов или цоликлон анти-D.

Действующим началом цоликлона анти-Dявляются антитела, принадлежащие к классу иммуноглобулинов М. Они вызываютпрямую агглютинацию эритроцитов, содержащих резус-фактор.

На пластину со смачиваемой поверхностью нано­сится большая капля (около 0,1 мл) реагента, рядом помещается маленькая капля (0,01—0,05 мл) исследуемой крови. Затем кровь смешивается с реагентом. Реакция агглютинации начинается через 10 — 15 с, четко выраженная агглютинация наступает через 30 — 60 с.

Использование подогретой до температуры 37 ‑ 40 °С пластинки со­кращает время наступления агглютинации. Результаты реакции учи­тывайте через 3 мин. Пластинку после смешивания реагента с кро­вью покачивают не сразу, а через 20 — 30 с, что позволяет за это время развиться более полной крупнолепестковой агглютинации.

Определение индивидуальной совместимостикрови

Переливание крови — серьезная операция по трансплантации живой ткани человека. Перед переливанием крови помимо опре­деления групповой и резус-принадлежности крови донора и ре­ципиента определяют индивидуальную совместимость, учитываяне только агглютиногены донора и реципиента, но и агглютини­ны крови донора.

Для работы необходимы: микроцентрифуга с пробирками; пред­метное стекло; две глазные пипетки; стеклянная палочка; 5 % ра­створ цитрата натрия; изотонический раствор натрия хлорида; кровь донора; стерильный скарификатор; спирт; эфир; йод; вата.

Из пальца реципиента берут кровь в количестве 1 — 2 мл, помещают в центрифужную пробирку, добавляют одну каплю 5 % раствора натрия цитрата и центрифугируют 10 ‑ 15 мин, для отделения сыворотки от форменных элементов.

На предметное стекло помещают каплю сыворотки реципиен­та и рядом каплю крови донора в соотношении 10 : 1, перемешивают капли стеклянной палочкой в течение 5 мин, после чего до­бавьте каплю изотонического раствора натрия хлорида. Оценивают результат — наличие или отсутствие агглютинации.

40. Гемостаз. Современные представления об основных факторах, участвующих в свер­тывании крови (тканевые, плазменные, тромбоцитарные, эритроцитарные, лейкоцитарные).

Процесс остановки кровотечения как за счёт внутренних, так и внешних механизмов называется гемостазом.

В организме есть собственные механизмы остановки кровотечений и структуры, обеспечивающие этот процесс, объединённые в систему гемостаза.

Основным физиологическим механизмом остановки кровотечения является образование тромбовпри повреждениях сосудистой стенки (тромбирование).

Система гемостаза включает три компонента:

Стенки кровеносных сосудов.

Форменные элементы крови (в первую очередь тромбоциты).

Плазменные ферментные системы.

Различают два основных механизма остановки кровотечения при повреждении сосудов:

1. Первичный, или сосудисто-тромбоцитарный гемостаз

2. Вторичный, или коагуляционный гемостаз.

Первичный, или сосудисто-тромбоцитарный гемостаз, обусловленный спазмом сосудов и их механической закупоркой агрегатами тромбоцитов с образованием так называемого “белого тромба”.

Вторичный, или коагуляционный гемостаз, протекающий с использованием многочисленных факторов свертывания крови и обеспечивающий плотную закупорку поврежденных сосудов фибриновым тромбом(красным кровяным сгустком).

Следует помнить, что оба механизма могут функционировать одновременно и сопряженно.

Способность крови осуществлять гемостаз должна быть уравновешена механизмами, обеспечивающими жидкое состояние крови, если необходимость образования тромба отсутствует.

Тромбообразование в физиологических условиях является локальнымпроцессом.

Механизмы изменения агрегатного состояния крови и структуры, обеспечивающие этот процесс, объединяются в систему регуляции агрегатного состояния крови (РАСК).

Система РАСК включает следующие системы крови:

1. свёртывающую (коагуляционный гемостаз)

2. противосвёртывающую

3. фибринолитическую