Тема 6. Назначение и классификация питательных сред для бактерий (6.1) и их приготовление (6.2)

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Дать представление о назначении питательных сред и их классификации. Ознакомить с методами приготовления питательных сред. Освоить методы определения рН питательных сред.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Компоненты для приготовления питательных сред: мясная вода, пептон, поваренная соль, агар-агар, желатин, воронки, колбы, марля, вата, пипетки, дистиллированная вода, пробирки с ватными пробками. Набор готовых питательных сред. Оборудование для определения рН – потенциометр, готовый МПБ, 0,1 н. и 10%-ный раствор едкого натра. Таблицы, схемы.

6.1. Назначение и классификация питательных сред

Бактериологические исследования связаны с использованием питательных сред, которые предназначены для выращивания микроорганизмов как в лабораториях, так и в промышленных условиях.

Питательные среды необходимы для выделения, накопления, сохранения, изучения культуральных и биохимических свойств микроорганизмов. Они должны включать в себя все компоненты, необходимые для конструктивных и энергетических процессов бактериальной клетки, т.е. должны иметь источники углерода, азота, кислорода, водорода, макро- и микроэлементы, «факторы роста» (витамины).

Метаболизм микроорганизмов разнообразен, следовательно, различны их потребности в источниках питания. Отсюда следует, что универсальных питательных сред, одинаково пригодных для культивирования всех видов микроорганизмов, не существует.

Вместе с тем можно сформулировать следующие требования, предъявляемые к питательным средам:

- питательные среды должны содержать все питательные вещества, обеспечивающие оптимальный рост микроорганизмов в искусственных условиях;

- в физико-химическом отношении они должны иметь определенную концентрацию водородных ионов (рН), окислительно-иосстановительный потенциал, влажность, вязкость и изотоничность;

- питательные среды должны быть стерильными и, по возможности, прозрачными.

По составу среды для культивирования микроорганизмов делятся на две группы: натуральные (естественные) и синтетические (табл. 1).

Таблица 1

Классификация питательных сред

По составу	По физическим свойствам	По назначению
Естественные: входят компоненты растительного и животного происхождения	Жидкие Полужидкие Плотные Сухие	Простые Специальные Дифференциально- диагностические Элективные
Синтетические: включают химические компоненты, растворенные в дистиллированной воде

В состав естественных сред входят компоненты растительного и животного происхождения: овощные, фруктовые соки, молоко, кровь, экстракты из мяса и т.д. Широко применяются из этой группы среды – мясо-пептонный бульон (МПБ), мясо-пептонный агар (МПА).

Синтетическими называют среды, в состав которых входят определенные химические соединения, растворенные в дистиллированной воде. В настоящее время микробиологи располагают синтетическими средами, не уступающими по своему составу натуральным.

По назначению питательные среды разделяются на обычные (простые), специальные, дифференциально-диагностические, элективные (избирательные).

К обычным средам относятся мясо-пептонный бульон и агар, на них растут многие виды микроорганизмов.

При отсутствии роста микробов на простых средах применяются специальные среды, в состав которых входят углеводы, сыворотка крови, кровь, асцит и др.

Дифференциально-диагностические среды позволяют достаточно быстро отличить одну группу бактерий от другой. К ним относятся среды для изучения сахаролитических, протеолитических свойств и др.

Элективные среды обеспечивают преимущественное развитие одного вида или группы микроорганизмов и менее пригодны или далее совсем не пригодны для развития других. В состав этих сред входят химические компоненты, которые задерживают развитие определенных групп микроорганизмов (желчь, краски, антибиотики, азид натрия и др.).

По физическому составу различают жидкие, полужидкие, плотные, сухие среды. Жидкие применяются для выяснения физиолого-биохимических особенностей микроорганизмов, для накопления биомассы или продуктов обмена; плотные - для выделения чистых культур (получение изолированных колоний), для хранения культур, количественного учета микроорганизмов и т.д.