3.2. Бактериологические краски

Наиболее широко в микробиологии используют анилиновые красители основного и нейтрального характера. Для окраски мазков применяют красители:

1) красные (фуксин основной, нейтральрот);

2) синий (метиленовый синий);

3) фиолетовые (генцианвиолет, кристаллвиолет, метилвиолет);

4) зеленые (бриллиантовая зелень, малахитовая зелень).

Все применяемые красители поступают в лаборатории в сухом порошкообразном или кристаллическом виде. Из таких красителей, как основной фуксин, генцианвиолет, метиленовая синь, заранее готовят насыщенные спиртовые растворы.

Р е ц е п т ы к р а с и т е л е й:

1. Карболовый фуксин Циля

Основной фуксин	1 г
Спирт 95°-ный	10 мл
Карболовая кислота кристаллическая	5 г
Глицерин	5 – 6 капель
Вода дистиллированная	100 мл

Через 48 ч краситель фильтруют. Срок хранения длительный.

2. Разведенный фуксин Пфейффера

Фуксин Циля	1 мл
Вода дистиллированная	9 мл
Срок хранения не более	1 суток.

3. Щелочная метиленовая синь Лефлера

Насыщенный раствор сини спиртовой	30 мл
1 %-ный раствор едкого натра или калия	1 мл
Вода дистиллированная	100 мл

Срок хранения длительный.

4. Карболовый генцианвиолет

Насыщенный спиртовой раствор Генцианвиолета	10 мл
5%-ный раствор карболовой кислоты	100 мл

Эту краску чаще всего используют при окраске по Граму в модификации по Синеву, пропитывая этой краской и высушивая полоски фильтровальной бумаги.

5. Раствор Люголя

Йодид калия	2 г
Дистиллированная вода	10 мл
Кристаллический йод	1 г

Смесь хорошо закупоривают и ставят на сутки в термостат, после чего добавляют 300 мл дистиллированной воды.

3.3. Простой метод окрашивания препарата для микроскопии

Окраску препаратов производят на специально оборудованном столе, покрытом линолеумом, пластиком, стеклом. На столе должен быть сосуд с дистиллированной водой, емкость для слива красителей, подставка из двух стеклянных трубочек, соединенных с обеих сторон резиновыми трубками (рис. 8), флаконы для красок с пипетками и резиновыми баллончиками (рис. 9).

Рис. 8. Чашка с подставкой для окраски препаратов

Рис. 9. Флаконы для красок

При простом методе окраски пользуются одним красителем: разведенным фуксином (1-2 мин); щелочной метиленовой синью Леффлера (3-5 мин). Фиксированный препарат помещают мазком вверх на подставку. На мазок пипеткой наносят краситель так, чтобы он весь был покрыт раствором. По истечении необходимого времени краситель сливают, препарат промывают водой и высушивают между листами фильтровальной бумаги или на воздухе (мазки из крови и др.). На сухой мазок наносят каплю иммерсионного масла и микроскопируют препарат иммерсионным объективом микроскопа. Простой метод окрашивания препаратов позволяет установить наличие или отсутствие бактерий в исследуемом материале, изучить их морфологию (форму, расположение).