Критерии оценки чувствительности стафилококков к пенициллину

Чувствительные			Резистентные
Очень чувствительные	Чувствительные	Умеренно Чувствительные	Слабо чувствительные	Резистентные
0,1 ед.	0,1-0,5 ед.	0,5 ед.	1-10 ед.	10 ед.

11.2. Метод диффузии в агар (метод бумажных дисков)

Наиболее прост и доступен метод определения чувствительности бактерий с помощью дисков, пропитанных антибиотиками. В стерильные чашки Петри, расположенные на горизонтальной поверхности, разливают по 15 мл МПА или другой питательной среды. Среда подсушивается в термостате и засевается исследуемым материалом методом «газона».

Для посева используют взвесь патологического материала (кал, молоко, гной, моча и др.) или выделенную чистую культуру возбудителя. Бактериальную взвесь равномерно распределяют по поверхности плотной питательной среды с помощью шпателя и чашки Петри, подсушивают вновь в термостате.

На поверхности засеянного агара пинцетом раскладывают диски с антибиотиками – по 5-6 дисков на каждую чашку на расстоянии 25 мм от центра чашки. Чашки выдерживают в термостате при 37°С 16-18 ч, после чего учитывают результаты опыта путем измерения зон задержки роста микробов вокруг дисков, включая диаметр самого диска. Размер зон зависит от степени чувствительности возбудителя к данному антибиотику. При зоне диаметром до 10 мм штамм расценивается как устойчивый, 11-15 мм - как малоустойчивый, 15-25 мм - как чувствительный. Зоны, превышающие 25 мм, свидетельствуют о высокой чувствительности микроорганизма к данному антибиотику (рис. 32).

Рис. 32. Метод диффузии в агар (метод бумажных дисков): определение чувствительности стафилококков – I – штамм 26, II – штамм 32; А – к пенициллину, Б – к стрептомицину, В – к неомицину

Задания для самостоятельной работы

1. Определить чувствительность выделенных чистых культур бактерий к антибиотикам методом диффузии в МПА.

2. Демонстрация посевов по определению чувствительности стафилококка к пенициллину методом серийных разведений в МПБ.

3. Полученные результаты внести в бланк экспертизы.

Вопросы для самоподготовки и контроля знаний

1. Бактериостатическое действие антибиотиков проявляется в питательных средах:

А. В задержке роста бактерий.

Б. В гибели бактерий.

В. В стимуляции их роста.

2. В изучаемой культуре после добавления антибиотика наблюдалась задержка роста через 24 часа (МПБ прозрачный), при дальнейшем культивировании в пробирке появилось помутнение. Какое действие антибиотика проявилось?

А. Бактерицидное действие.

Б. Бактериостатическое действие.

3. При определении чувствительности культуры стафилококка к неомицину методом серийных разведений в МПБ приготовили рабочие разведения антибиотика:

1. 8 ЕД/мл; 2. 4 ЕД/мл; 3. 2 ЕД/мл; 4. 1 ЕД/мл;

5. 0,5 ЕД/мл; 6. 0,25 ЕД/мл; 7. 0,125 ЕД/мл.

После посева культуры и суточного роста установили отсутствие роста в первых четырех пробирках. Определите бактериостатическую дозу антибиотика:

А. 8.

Б. 4.

В. 2.

Г. 1.

Д. 0,5.

Е. 0,25.

Ж. 0,125 ЕД/мл.

4. При определении чувствительности бактерий к пенициллину методом диффузии в МПА установлено, что диаметр зоны задержки бактерий равен 8 мм. Какова степень чувствительности бактерий к антибиотику?

А. Устойчивые.

Б. Малочувствительные.

В. Чувствительные.

Г. Высокочувствительные.

5. При исследовании кала от больного колибактериозом теленка на чувствительность микрофлоры к антибиотикам методом диффузии в МПА установлено, что зона задержки роста бактерий с пенициллином составляла 8 мм, левомицетином – 23 мм, биомицином – 32 мм. Какой антибиотик может быть рекомендован для лечения?

А. Пенициллин.

Б. Левомицетин.

В. Биомицин.