Тема 41. Патогенные анаэробы – возбудители столбняка (41.1), ботулизма (41.2), некробактериоза (41.3), копытной гнили (41.4)

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Изучить свойства указанных возбудителей и методы бактериологической диагностики.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Для демонстрации необходимы схемы бактериологической диагностики столбняка, ботулизма, некробактериоза и копытной гнили; готовые фиксированные препараты-мазки микробных культур С1. tetani и Сl. botulinum, мазки (фиксированные) из некротизированной ткани кролика, зараженного возбудителем некробактериоза кролика, готовые посевы культур, биопрепараты.

При подготовке к занятию необходимо уяснить следующие вопросы:

1. Морфологические, тинкториальные и культуральные особенности возбудителей столбняка и ботулизма.

2. Схема бактериологической диагностики столбняка и ботулизма.

3. Морфологические, тинкториальные и культуральные особенности возбудителей некробактериоза и копытной гнили.

4. Схема бактериологической диагностики некробактериоза и копытной гнили.

41.1. Возбудитель столбняка

1. Классификация возбудителя

Сем.: Bacillaceae

Род: Clostridium

Вид: С1. tetani

2. Общая характеристика болезни:

Столбняк – острая раневая инфекционная болезнь, характеризующаяся судорожным сокращением мускулатуры.

3. Восприимчивые животные:

- все виды, включая человека.

4. Патогенез и факторы вирулентности:

- болезнь возникает в результате различных ранений и травм при инфицировании их спорами возбудителя, что возможно при загрязнении почвой или калом,

- возбудитель образует экзотоксин, состоящий из двух компонентов – тетаноспазмина и тетанолизина.

Методы диагностики

А. Бактериологический метод (рис. 118):

Рис. 118. Схема лабораторной диагностики столбняка

Исследования проводят в двух направлениях: обнаружение токсина в исследуемом материале; выделение возбудителя с проверкой его токсичности.

1. Материал для исследования:

- раневой секрет, кусочки тканей, гной из раны.

Обнаружение токсина:

- путем постановки биопробы – полученный экстракт из исследуемого материала вводят подкожно в заднюю лапку двум-трем мышам или двум морским свинкам;

- при наличии токсина через 2-4 сут у животных наблюдается тетаническое сокращение мышц, и они погибают,

- в этом случае дальнейшую работу по выделению культуры не проводят.

2. Микроскопия:

а) методы окраски: простой метод, по Граму;

б) микрокартина: тонкие, стройные палочки до 6 мкм, на конце округлая спора (барабанная палочка) (рис. 119);

Рис. 119. С1. tetani в препаратах: 1 - из культуры, 2 — в раннем экссудате. Увеличение х900

в) грамположительные;

г) образуют споры;

д) капсулу не образуют;

е) подвижны.

3. Культивирование:

а) посев на питательные среды: МППБ и кровяной МПА

б) особенности выделения возбудителя:

- строгий анаэроб.

- оптимальная температура 37°С,

- срок культивирования 18-20 ч;

в) культуральные свойства:

- на МППБ – мелкохлопчатое помутнение с незначительным газообразованием;

- на КМПА – нежный налет с периферическими отростками, вокруг колоний гемолиз;

г) биопроба – белые мыши, морские свинки.

Б. Серологические методы.

- реакция нейтрализации со специфическими сыворотками.

В. Аллергические методы – не используются.

5. Биопрепараты для специфической профилактики:

- концентрированный столбнячный анатоксин (вакцина).

6. Биопрепараты для специфической терапии:

- гипериммунная антитоксическая противостолбнячная сыворотка.