Лабораторные работы:

1. Влияние температуры на каталитическую активность амилазы слюны.

2. Влияние рН на действие ферментов.

3. Специфичность действия ферментов.

Контрольные задачи:

1. Какой фермент обладает абсолютной специфичностью к субстрату: а) трипсин; б) пепсин; в) уреаза; г) лизоцим?

2. При какой температуре ферменты денатурируют: а) 0С; б) 80-100С; в) 20-30С; г) 30-40С?

3. Как доказать, что способность дрожжевых клеток расщеплять крахмал сохраняется и при их разрушении? Вы располагаете раствором крахмала, раствором Люголя, поваренной солью и льдом.

4. Каким раствором можно воспользоваться для обнаружения примеси свежей крови в воде: разбавленным этанолом, муравьиной кислотой, перекисью водорода, раствором хлорида кальция?

5. Скорость взаимодействия А+В увеличилась в 3 раза после добавления вещества К. В качестве конечных продуктов обнаружились вещества АК и ВК. Является ли К катализатором?

6. К какому классу относится фермент пируваткиназа: а) лигаз; б) гиролаз; в) оксидоредуктаз; г) трансфераз; д) изомераз?

7. Оптимум рН исследуемого фермента 6,9-7,0, субстратом фермента является высокомолекулярный природный полимер, обнаруживаемый по характерному окрашиванию в присутствии йода, продукты взаимодействия фермента с субстратом окрашиваются при нагревании в присутствии сернокислой меди в красно-кирпичный цвет. Назовите фермент, субстрат, реактив, используемый для обнаружения субстрата, продукты гидролиза субстрата и определите принадлежность фермента к классу, группе.

8. Назовите классы и группы, к которым относятся ферменты, катализирующие реакции:

О

||

а) R₁—CН—NH₂ + R₂—C  R₁—C=O + R₂—CН—NH₂

| | | |

COOH COOH COOH COOH

б) R—CH₃ + R₁—H  R—H + R₁—CH₃

в) RH₂ + O₂  R + H₂O₂

г) RH₂ + R₁  R + R₁H₂

д) CH₃—CO—COOH + CO₂  HOOC—CH₂—CO—COOH

9. Какую реакцию катализируют изомеразы:

а) H₂N—CO—NH₂ + H₂O  CO₂ + 2 NH₃;

б) UDP-глюкоза  UDP-галактоза;

в) лактат + NAD⁺  пируват + NADH + H⁺?

ЗАНЯТИЕ VI.

Усвоить:

1. Данные о механизме ферментативной реакции, ее этапах, знать, чем обеспечивается специфичность, что такое активный центр, как он устроен, какие аминокислотные остатки чаще содержатся в нем, что такое центр связывания.

2. Знать, что представляют собой кофакторы, их виды (органические и неорганические), какие из них – коферменты.

3. Знать типы коферментов.

4. Знать, как изменяется скорость ферментативной реакции и способы выражения активности ферментов, уметь различать реакции нулевого и первого порядка.

5. Уметь определять константу Михаэлиса по экспериментальным данным, знать смысл её определения.

6. Знать, что собой представляют эффекторы, усвоить их виды (активаторы и ингибиторы), типы ингибирования (конкурентное, неконкурентное, ингибирование субстратом).

7. Знать типы активации (ионами, путем воздействия на субъединицы, путем защиты фермента).

8. Изучить особенности распределения ферментов в организме (ферменты жизнеобеспечения, органоспецифические, проферменты, изоферменты, ассоциации ферментов).

9. Ферменты плазмы крови: классификация, примеры, диагностическое значение в лабораторной практике.