Занятие 12

ТЕМА: МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ДИФТЕРИИ И КОКЛЮША.

Цель: 1. Изучить методы микробиологической диагностики дифтерии и коклюша. 2. Ознакомиться с методами специфической профилактики и терапии дифтерии, коклюша.

Возбудители дифтерии

Дифтерия - острое антропонозное инфекционное заболевание с преимущественным респираторным механизмом передачи, характеризующееся местным фибринозным воспалением слизистых оболочек (чаще зева и носа) и явлениями интоксикации. Возбудителем дифтерии является Corynebacterium diphtheriae.

C. diptheriae - грамположительные палочки средней величины, которые в мазках располагаются под углом друг к другу, по полюсам располагаются зерна волютина. При окраске по Нейссеру палочки окрашиваются в светло- коричневый цвет, а зерна волютина в темно- синий, почти черный цвет. Спор, капсул не образуют, неподвижны. Факультативные анаэробы.

Дифтерийные палочки требовательны к питательным средам. Элективными являются - среда Ру (свернутая лошадиная сыворотка), среда Клауберга, содержащая кровь и теллурит калия (или натрия).

На этой среде биовары дифтерийной палочки дают разные колонии: биовар gravis - крупные, серые с неровными краями, с радиальной исчерченностью- R-колонии; биовар mitis - мелкие, черные, с ровными краями- S-колонии; биовар intermedius- похожие на колонии обоих типов. Биовары отличаются и по биохимическим свойствам.

Corynebacterium diphteriae отличается от других представителей рода, ферментирует глюкозу, на среде с цистеином дает облаковидное почернение по ходу укола (проба Пизу); не ферментирует сахарозу и мочевину.

К факторам вирулентности относятся:

- pili, обеспечивающие адгезию;

- ферменты патогенности - гиалуронидаза, нейраминидаза, протеаза;

- ведущий фактор вирулентности - образование экзотоксина, обладающего гистотоксическим, гемолитическим и дермонекротическим действием.

Токсигенность кодируется умеренным фагом- (tox геном), т.е. является результатом лизогенной конверсии

Гистотоксин блокирует синтез белка в клетках макроорганизма, что приводит к некрозу пораженной ткани.

Источником инфекции является только человек- больной и бактерионоситель. Передача заболевания происходит воздушно- капельным и контактно- бытовым путями.

Заболевание носит бактериально-токсический характер. Возбудитель остается на месте входных ворот, а все проявления заболевания связаны с действием токсина. Дифтерия характеризуется образованием в месте локализации возбудителя плотной, спаянной с подлежащей тканью фибринозной пленки, развитием отека и некроза ткани.

Для дифтерии характерна общая интоксикация, с избирательным поражением сердечно - сосудистой системы, почек и надпочечников, нервной системы.

По локализации различают: дифтерия зева, носа, гортани (дифтерийный круп), наружных половых органов, кожи, ран, глаз, уха. Чаще встречаются дифтерия зева и носа.

После перенесенного заболевания остается достаточно напряженный антитоксический иммунитет.

Ведущим методом диагностики является бактериологическое исследование. Микробиологические исследования проводят с целью диагностики дифтерийной инфекции и выявления носительства. Материал для исследования - отделяемое или пленка из зева и носа, а при редких локализациях (дифтерии глаза, уха, раны, кожи, наружных половых органов)- из очага поражения. Забор материала производят стерильным тампоном и засевают на одну из элективных питательных сред. Средами для первичного посева служат кровяной теллуритовый агар или среда Клауберга, хинозольная среда Бучина.

Для определения напряженности противодифтерийного антитоксического иммунитета, вместо раннее применявшейся пробы Шика, ставят РПГА с использованием эритроцитарного дифтерийного диагностикума (взвесь эритроцитов, на которых сорбирован дифтерийный анатоксин).

Возбудитель коклюша

Коклюш – детская антропонозная инфекция, характеризующийся приступами спазматического кашля. Возбудителем коклюша является Bordella pertussis – мелкие, грамотрицательные, овоидные палочки с закругленными концами неподвижны. Спор, капсул не образуют. Строгие аэробы. Очень требовательны к питательным средам. Для их культивирования используют сложные среды – среда Борде – Жангу (картофельно-глицериновый агар с добавлением крови), КУА – казеиново-угольный агар.

На среде Борде – Жангу возбудитель коклюша через 3-4 дня дают рост в виде куполообразных колоний, напоминающие капельки ртути с зоной гемолиза вокруг.

Факторы патогенности:

- экзотоксин – специфический цитотоксин, который вызывает гибель мерцательного эпителия, дыхательных путей, обладает тропизмом к нервной и сосудистой системам;

- эндотоксин, обладающий сенсибилизирующим и общетоксическим действием;

- ферменты агрессии.

Источником инфекции являются больные и бактерионосители.

Основной путь передачи – воздушно-капельный.

Болеют в основном дети.

Заболевание характеризуется приступами спазматического кашля.

Ведущим методом микробиологической диагностики коклюша является бактериологическое исследование. Материалом для исследования является слизь из носоглотки, которую забирают стерильным ватным тампоном, который вводят в носовой ход до задних хоан.

Для взятия материала у детей используют также метод «кашлевых пластинок». Во время приступа кашля ко рту ребенка подносят открытую чашку с питательной средой на расстоянии 15-20 см и держат на период 6-8 кашлевых толчков, затем чашку закрывают и помещают в термостат.

Серодиагностику чаще используют для ретроспективной диагностики заболевания (РА, РСК, ИФА, РПГА).

Для специфической профилактики используют АКДС, в которой коклюшный компонент представлен убитой вакциной.