Микробиологическая диагностика сибирской язвы

Материалом для исследования служат: содержимое карбункула и пузырьков, мокрота, испражнения, кровь, моча, секционный материал (кусочки органов). По эпид.показаниям исследуют различные объекты внешней среды, а также шерсть и щетину животных.

Все образцы помещают в герметичные сосуды и транспортируют закупоренными в опломбированных боксах или деревянных ящиках в лаборатории особо опасных инфекций.

Микробиологическую диагностику проводят с соблюдением правил техники безопасности как при особо опасных инфекциях.

Бактериоскопический метод

Первоначально из материала готовят мазки, окрашивают их по Граму и для обнаружения капсул и спор (по Ожешко). Наличие в мазках крупных грамположительных стрептобацилл, окруженных капсулой дает возможность поставить предварительный диагноз.

Бактериологический метод

Для выделения чистой культуры исследуемый материал заливают на МПА и МПБ. На жидких средах дают придонный рост в виде комочка ваты, не вызывая помутнения среды; на плотных средах образует крупные с неровными краями, шероховатые матовые колонии (R-форма). Под лупой колонии напоминают «гриву льва».

Биологический метод

В биопробе патологический материал или испытуемую культуру вводят подкожно: морским свинкам в паховой области, мышам в корень хвоста. Обычно мыши погибают через 1-2 суток, морские свинки – через 2-4 суток. У павших животных исследуют печень, селезенку, лимфатические узлы, почки, кровь из полостей сердца, места введения исследуемого материала.

О наличии возбудителя сибирской язвы свидетельствует типичная патолого-анатомическая картина у подопытных животных, в мазках – отпечатках из органов и крови – наличие грамположительных капсулированных палочек.

Серологический метод диагностики

Серодиагностика проводится в тех случаях, когда не удается обнаружить возбудителя в материале. Для определения антител в сыворотке крови больного используют реакцию латексной агглютинации или РПГА с протективным сибиреязвенным антигеном. Сибиреязвенные антигены определяют в РИФ, ИФА, РСК, РНГА, РП в геле или реакции термопреципитации по Асколи.

Реакция Асколи имеет большое значение, т.к. позволяет обнаружить возбудителя при отрицательных результатах бактериологического исследования.

При массовом загрязнении посторонними микробами материалов (кожа, шерсть, особенно загнившие органы трупа) исследование производят при помощи реакции термопреципитации по Асколи.

Для этого измельченный материал подвергают кипячению в физиологическом растворе в течение нескольких минут, затем фильтруют через бумажный фильтр. В полученной прозрачной жидкости содержится антиген сибиреязвенной палочки. С этим антигеном ставят реакцию преципитации со специфической сывороткой.

Реакция ставится в 2-х преципитационных пробирках. В преципитационную опытную пробирку наливают 0.5 мл преципитирующей сибиреязвенной сыворотки и на нее с помощью пастеровской пипетки наслаивают полученный фильтрат (антиген).

При наличии антигена в исследуемом фильтрате на границе двух жидкостей образуется кольцо преципитации. В контрольной пробирке вместо преципитирующей сыворотки используется нормальная сыворотка.

Таблица 22