Оценка противопероксидной активности антиоксидантов в реакции образования пероксимолибдат-иона методом спектрофотометрии

Куренкова А.Е. (2 курс фарм. ф-т), Ермолаев А.Д. (3 курс фарм. ф-т), Чернов А. В. (3 курс фарм. ф-т)

ГБОУ ВПО ЮУГМУ Минздрава России

Кафедра химии фармацевтического факультета

Научный руководитель – к. фарм. н., доц. Симонян Е.В.

Актуальность: Разработка новых методов определения АОА, сочетающих экспрессность с достоверностью и высокой воспроизводимостью полученных данных, остаются актуальной задачей, поскольку на данный момент не существует унифицированной методики, которая давала бы удовлетворительные результаты при исследовании антиоксидантной и антирадикальной активности.

Цель исследования: Разработка методики для определения противопероксидной активности в реакциях образования пероксимолибдат иона.

Методы и материалы: Спектрофотометрия, метод определения противопероксидной активности в реакциях с образованием иона пероксимолибдата.

Результаты и их обсуждение: Способность антиоксидантов нейтрализовывать пероксид водорода была оценена в реакции с растворами аммония молибдата, с которыми перекись взаимодействует с образованием иона пероксомолибдата. Данная способность характеризуется как противопероксидная активность. Установлено, что при этом образуется окрашенный комплекс с максимумом светопоглощения при 410 нм. При добавлении в инкубационную смесь вещества с антиоксидантной способностью, способного нейтрализовывать перекись водорода, оптическая плотность раствора снижается пропорционально активности исследуемого вещества.

При разработке методики было установлено, что максимум в области 410 нм наблюдается только в разведении аммония молибдата 2,4*10 ^-6М (3 мл). Поэтому дальнейшие исследования проводили с таким количеством реактива.

Определение противоперекисной активности проводили по методике: в мерную колбу вместимостью 25 мл, помещали 3мл 0,02 М раствора молибдата аммония, 1 мл раствора пероксида водорода 3% и 0,1 грамм эквивалент кислоты серной, прибавляли по 0,1 или 0,2 мл 1% водного или спиртового раствора определяемого вещества и доводили объем раствора водой до метки. Выдерживали в течение 20 мин, при температуре 25⁰С. Измеряли оптическую плотность полученных растворов на спектрофотометре СФ-56 при длине волны 410 нм. В качестве контрольного раствора использовали аналогичную смесь, добавляя вместо исследуемого вещества аналогичное количество воды. В качестве раствора сравнения использовали аналогичную смесь без добавления пероксида водорода. Рассчитывали величину противоперекисной активности.

Установлено, что наибольшей противопероксидной активностью обладают экстракты перги и пыльцы, приготовленные с использованием спирта этилового 40% и 70%, а также их комбинации с кислотами янтарной и фумаровой, что коррелирует со значением АОА.

Выводы:

1. Разработана методика определения противоперекисной активности в реакциях антиоксидантов с растворами аммония молибдата.

2. Произведена количественная оценка противоперекисной активности антиоксидантов, в реакциях с образованием ионов пероксимолибдата, это позволило определить, что большая противоперекисная активность, коррелирующая со значением АОА, характерна для спиртовых экстрактов.